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岳风先

作品数:2 被引量:3H指数:1
供职机构:昆明理工大学医学院更多>>
发文基金:云南省卫生科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇星状病毒
  • 1篇组成型
  • 1篇组成型启动子
  • 1篇结构蛋白
  • 1篇抗体
  • 1篇克隆
  • 1篇活性
  • 1篇活性测定
  • 1篇非结构蛋白
  • 1篇杆菌
  • 1篇PROTEI...
  • 1篇表达纯化
  • 1篇病毒
  • 1篇产气肠杆菌
  • 1篇肠杆菌
  • 1篇NON-ST...

机构

  • 2篇昆明理工大学
  • 2篇云南省第一人...

作者

  • 2篇井申荣
  • 2篇毛小琴
  • 2篇张成
  • 2篇刘志成
  • 2篇汪玉婷
  • 2篇岳风先
  • 1篇崔成成

传媒

  • 2篇医学分子生物...

年份

  • 2篇2016
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
产气肠杆菌组成型启动子的筛选及其活性测定被引量:2
2016年
目的:从产气肠杆菌基因组中筛选组成型启动子,并检测其活性。方法用Sau3 AⅠ限制性内切酶将产气杆菌的基因组酶切到500 bp大小,连接到pCMR8 a载体上,转化DH5α感受态后涂布氯霉素和卡那抗生素的双抗平板上筛选启动子,经SDS-PAGE分析启动子的蛋白表达能力,筛选较强启动子并对其进行截短和顺反性实验,最后利用截短启动子表达不同的蛋白。结果成功筛选到了5个启动子序列,获得到了表达能力最强启动子的截短核心序列,验证了其具有反向启动外源蛋白表达的能力,成功表达了其他外源蛋白。结论本实验通过大肠埃希菌表达系统成功的筛选并验证了产气杆菌的一种组成型启动子,具有较强的启动外源蛋白表达能力,对工业上蛋白的生产及实验室表达某种蛋白具有重要意义。
苑荣亮仉秋实汪玉婷岳风先刘志成张成井敏敏毛小琴井申荣
关键词:产气肠杆菌组成型启动子蛋白表达活性测定
人星状病毒非结构蛋白nsP1a/1表达纯化及多克隆抗体的制备被引量:1
2016年
目的:表达纯化人星状体病毒( human astrovirus, HAstV)非结构蛋白nsP1a/1,免疫动物制备多克隆抗体。方法利用PCR技术扩增nsP1a/1基因序列,构建到大肠埃希菌原核表达系统中表达重组nsP1a/1蛋白,使用镍柱亲和层析法对重组蛋白进行纯化,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE)和二噻啉甲酸(BCA)实验对重组蛋白的纯度与浓度进行分析,以重组的nsP1a/1蛋白为抗原,免疫雄性SPF级SD 大鼠获得多抗血清,用 ELISA 测定抗体效价、 Western 印迹检测抗体特异性。结果nsP1a/1-pET28a原核表达载体构建成功,将其转化至大肠埃希菌BL21(DE3)细菌中诱导表达了重组蛋白,免疫大鼠获得的多抗血清几何平均效价达到1∶406374。结论本实验成功地运用原核表达系统表达并鉴定了人星状体病毒非结构蛋白nsP1a/1,为进一步研究人星状病毒的复制及病毒感染的临床诊断奠定基础。
苑荣亮崔成成井敏敏刘志成汪玉婷岳风先张成井申荣毛小琴
关键词:多克隆抗体NON-STRUCTURALPROTEINS
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