陈达
- 作品数：10 被引量：47H指数：5
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- 关节软骨含水率变化与骨关节炎筋骨失养的关系探讨被引量：2
- 2016年
- 骨关节炎病在筋骨,筋骨失养为主要病理表现,常见于中老年人,软骨退变在骨关节炎筋骨失养过程中发挥重要作用。水占关节软骨湿重的80%,是软骨所需营养物质的重要媒介,在关节软骨生化组成中所占比重最大,水与胶原纤维及蛋白多糖相结合共同提供了软骨细胞生物学功能的内环境,与软骨生物力学功能密切相关。调节含水率可能是延缓或阻止软骨退变的重要机制之一,提示有效调控关节软骨含水率在骨关节炎形成和发展中的作用,对骨关节炎筋骨失养的防治研究具有重要意义。
- 陈后煌邵翔郑文伟马玉环陈达叶蕻芝李西海
- 关键词：骨关节炎含水率软骨
- 骨关节炎骨赘形成的机制探讨被引量：7
- 2016年
- 骨赘是在生物力学和生物化学因素的共同影响下,发生于关节边缘的骨和软骨性新生组织,是骨关节炎病理过程中的一个特征性表现。骨赘的形成是用于临床诊断骨关节炎的一个特征性结构变化,其本质是关节组织的代偿性修复;但因骨赘形成改变了关节的力学结构,使关节面不适应,结果却引起了关节畸形和破坏,加重了关节退变。因此,深入研究骨赘形成机制、骨赘与骨关节炎病理进展的内在联系,为骨关节炎的防治研究提供新的思路。
- 陈后煌邵翔马玉环郑文伟陈达叶蕻芝李西海
- 关键词：骨关节炎骨赘软骨退变生物力学
- 跳骨片含药血清抑制脂多糖诱导的软骨细胞炎症反应的作用机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨跳骨片含药血清抑制脂多糖诱导的软骨细胞炎症反应的作用机制。方法:将10只8周龄雄性SD大鼠随机分为跳骨片组和空白组,跳骨片组以0.32 g·kg-1剂量的跳骨片灌胃,空白组给予等量生理盐水灌胃;每天灌胃1次,连续7 d;末次灌胃1 h后,经腹主动脉取血,分别制备跳骨片含药血清和空白血清,低温保存备用。从10只4周龄SD大鼠膝关节软骨中分离软骨细胞并培养,光学显微镜下观察软骨细胞形态,并用Ⅱ型胶原酶免疫组化鉴定。将培养好的第2代软骨细胞随机分为空白血清组、模型组、跳骨片含药血清组,其中空白血清组以含10%空白血清的培养基(dulbecco modified eagle medium,DMEM)培养;模型组以浓度为10 ng·mL-1的脂多糖和含10%空白血清的DMEM培养;跳骨片含药血清组以浓度为10 ng·mL-1的脂多糖和含10%跳骨片含药血清的DMEM培养;3组均连续干预培养8 h,采用酶联免疫吸附法检测软骨细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)3、MMP9含量,采用荧光定量RT-PCR法检测软骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达水平,采用Western blot法检测软骨细胞中β-链蛋白(β-catenin)、卷曲蛋白-2(Frizzled-2)的蛋白表达量,采用免疫荧光检测法检测软骨细胞中β-catenin、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthasc kinase-3β,GSK-3β)、蛋白多糖1(proteoglycans 1,PGS1)的蛋白表达量。结果:(1)软骨细胞免疫组化鉴定结果。第2代软骨细胞胞浆及细胞膜呈棕黄色阳性染色,具有典型的软骨细胞生物学特征。(2)软骨细胞MMP3、MMP9含量。脂多糖干预8 h后,空白血清组、模型组和跳骨片含药血清组的软骨细胞MMP3、MMP9含量比较,组间差异均有统计学意义[(34.019±1.036)ng·mL-1,(44.645±2.473)ng·mL-1,(32.941±1.792)ng·mL-1,F=36.060,P=0.000;(1.348±0.038)ng·mL-1,(1.562±0.112)ng·mL-1,(1.331±0.015)ng·mL-1,F=11.319,P=0.000];模型组软骨细胞MMP3、MMP9含量均高于空白血�
- 郑文伟何晓娟贾良良马玉环陈后煌邵翔陈达刘献祥李西海叶蕻芝
- 关键词：软骨细胞跳骨片软骨退变基质金属蛋白酶类炎症反应
- 透骨消痛胶囊抑制脂多糖诱导软骨细胞炎症反应的机制研究被引量：5
- 2016年
- 目的探讨透骨消痛胶囊抑制脂多糖(LPS)诱导的软骨细胞炎症反应作用机制。方法对4周龄雄性SD大鼠采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞并进行体外培养,将软骨细胞分为空白组、模型组以及透骨消痛胶囊组,空白组加入含10%胎牛血清(FBS)的低糖型Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM/LOW)2 mL,模型组加入含10 ng/mL LPS、10%FBS的DMEM/LOW培养基2 mL,透骨消痛胶囊组加入含10 ng/mL LPS、透骨消痛胶囊(300μg/mL)、10%FBS的DMEM/LOW培养基2 mL。干预8 h后,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测各组微小RNA(miRNA)-140表达变化,免疫荧光观察各组带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTS)4、基质金属蛋白酶(MMP)-3表达变化,Image J分析各组平均光密度。结果与空白组相比,模型组MMP-3表达升高(P<0.05)、ADAMTS4表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,透骨消痛胶囊组MMP-3表达下降(P<0.05)、ADAMTS4表达明显下降(P<0.01)。与空白组相比,模型组软骨细胞miRNA-140表达明显降低(P<0.05);与模型组相比,透骨消痛胶囊组软骨细胞miRNA表达明显升高(P<0.05)。结论透骨消痛胶囊能促进miRNA-140表达,降低ADAMTS4、MMP-3分泌,抑制炎症反应介导的软骨基质降解,从而延缓骨关节炎软骨退变。
- 邵翔陈后煌陈达马玉环郑文伟叶蕻芝李西海
- 关键词：软骨细胞骨关节炎基质金属蛋白酶-3炎症反应
- 跳骨片水提物对体外大鼠关节软骨细胞活性的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨跳骨片水提物对体外大鼠关节软骨细胞活性的影响。方法:4周龄SPF级SD大鼠5只,采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞,倒置相差显微镜观察软骨细胞的形态结构,Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定软骨细胞。0,25,50,100μg·mL^(-1)跳骨片水提物对第3代软骨细胞,分别干预24,48,72 h后,MTT法检测细胞活性。结果:1Ⅱ型胶原免疫组化染色后软骨细胞胞浆呈棕黄色,为阳性;2以0μg·mL^(-1)跳骨片水提物干预的软骨细胞作为对照组,干预24 h后,50μg·mL^(-1)组软骨细胞活性明显高于对照组(P<0.05);干预48 h后,25,50μg·mL^(-1)组明显高于对照组(P<0.05);干预72 h后,25,50,100μg·mL^(-1)组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:跳骨片水提物在25,50,100μg·mL^(-1)时均可以促进软骨细胞的增殖,具有剂量和时间依赖性,其中50μg·mL^(-1)干预24 h后最为明显。
- 郑文伟马玉环林平冬陈后煌邵翔陈达李西海叶蕻芝无
- 关键词：MTT法软骨细胞
- 牛膝多糖对软骨细胞Ⅱ型胶原及蛋白聚糖表达的影响被引量：10
- 2016年
- 目的:探讨牛膝多糖(ABPS)对大鼠膝关节软骨细胞Ⅱ型胶原及蛋白聚糖表达的影响。方法:取4周龄健康SD大鼠10只,分离膝关节,刮下双侧膝关节表面软骨组织,采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞。建立软骨细胞体外培养体系,倒置相差显微镜观察细胞形态,采用Ⅱ型胶原免疫组化法鉴定软骨细胞。体外培养到第2代软骨细胞,分别用0,50,100,200μg·m L^(-1)的ABPS对软骨细胞进行干预。干预后,Western blot检测各组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖的表达变化,免疫荧光观察空白组与加药组Ⅱ型胶原的表达变化。结果:第2代软骨细胞的形态学表明软骨细胞的典型特征:软骨细胞含有丰富的Ⅱ型胶原。Western blot检测结果显示,ABPS促进软骨细胞Ⅱ型胶原表达,并且在100μg·m L^(-1)时表达最高,差异有统计学意义(P<0.05)。同时100μg·m L^(-1)的ABPS干预软骨细胞后,软骨细胞中的蛋白聚糖表达增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组的Ⅱ型胶原荧光表达相比,ABPS干预后软骨细胞的Ⅱ型胶原荧光表达更强。结论:ABPS促进了软骨细胞Ⅱ型胶原及蛋白聚糖的表达。
- 马玉环郑文伟陈后煌邵翔陈达叶蕻芝李西海
- 关键词：骨关节炎牛膝多糖蛋白聚糖软骨细胞
- 全文增补中
- 乌头汤抑制骨关节炎炎症反应的作用机制探讨被引量：8
- 2016年
- 炎症是导致骨关节炎发生发展的关键因素之一。乌头汤是治疗痹证的常用方剂,具有抑制白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α等炎症因子的作用。通过深入了解骨关节炎与炎症反应的关系,探讨乌头汤治疗骨关节炎的作用机制,为乌头汤治疗骨关节炎的应用研究提供新思路。
- 陈达陈后煌邵翔马玉环郑文伟叶蕻芝李西海
- 关键词：骨关节炎乌头汤痹证炎症反应
- 免疫组织化学技术检测新生乳鼠颞下颌关节软骨基质与Ihh表达的实验研究
- 2016年
- 目的:探讨颞下颌关节发育的分子生物学机制。方法:选取5只BAL B/C新生乳鼠,取头,常规固定、脱钙、脱水、包埋,采用免疫组织化学技术检测颞下颌关节CollagenⅡ(ColⅡ)、CollagenⅠ(ColⅠ)、Aggrecan和印度豪猪蛋白(Ihh)的表达。结果:颞下颌关节盘中,ColⅠ和ColⅡ表达阳性,Ihh表达强阳性,Aggrecan未见明显表达;髁状突软骨中,ColⅡ表达阳性,Aggrecan表达强阳性,Ihh和ColⅠ少量表达。结论:ColⅡ、ColⅠ、Aggrecan和Ihh正常表达,在颞下颌关节形成与发育过程中发挥重要的作用。
- 邵翔陈后煌陈达马玉环郑文伟叶蕻芝李西海
- 关键词：颞下颌关节软骨基质免疫组织化学技术小鼠
- 补肾壮筋汤抑制炎症介导骨关节炎软骨基质降解的作用机制研究
- 目的探讨补肾壮筋汤抑制炎症介导骨关节炎软骨基质降解的作用机制研究方法1.选取2月龄SPF级雄性SD大鼠共45只,采用随机数字法将所选取的大鼠均分为三组,即空白组(15只)和造模组(30只),空白组行假手术(生理盐水灌胃)...
- 陈达
- 关键词：骨关节炎补肾壮筋汤软骨基质软骨细胞
- 文献传递
- 跳骨片抑制大鼠膝骨关节炎Wnt/β-catenin信号转导通路介导炎症反应的机制研究被引量：8
- 2017年
- 目的探讨跳骨片对大鼠膝骨关节炎(OA)Wnt/β-catenin信号转导通路介导炎症反应的机制。方法将30只8周龄雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、跳骨片组,每组10只。空白组不予任何处理,模型组、跳骨片组均采用改良Hulth法建立OA动物模型。建模成功后跳骨片组每天予跳骨片0.32 g/kg灌胃,空白组和模型组每天予等量生理盐水灌胃,干预12周后分别取3组大鼠双侧膝关节股骨髁、关节软骨和滑膜,将股骨髁常规固定、脱钙、包埋及切片,对切片分别进行苏木精-伊红(HE)、甲苯胺蓝染色,光镜下观察关节软骨组织形态学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测滑膜中白细胞介素(IL)-1β、基质金属蛋白酶(MMP)-13、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;蛋白质免疫印迹检测关节软骨β-catenin、Wnt-4蛋白表达。结果模型组滑膜中,IL-1β表达量明显高于空白组和跳骨片组(P<0.01),MMP-13表达量高于空白组和跳骨片组(P<0.05),TNF-α表达量明显高于空白组(P<0.01)、高于跳骨片组(P<0.05);模型组关节软骨中,β-catenin蛋白表达量明显高于空白组和跳骨片组(P<0.01),Wnt-4蛋白表达量高于空白组和跳骨片组(P<0.05)。HE染色显示跳骨片组软骨破坏程度低于模型组,甲苯胺蓝染色显示跳骨片组软骨细胞蛋白多糖含量高于模型组(P<0.01)。结论跳骨片能抑制关节软骨Wnt/β-catenin信号转导通路,降低滑膜中IL-1β、MMP-13、TNF-α表达,抑制炎症反应介导的软骨基质降解,延缓关节软骨退变。
- 郑文伟马玉环陈后煌邵翔陈达李西海叶蕻芝
- 关键词：跳骨片WNT/Β-CATENIN信号转导通路骨关节炎炎症反应
