曾昊
- 作品数：6 被引量：47H指数：4
- 供职机构：山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室更多>>
- 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金山东省农业重大应用技术创新课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪流行性腹泻病毒JX16株的分离鉴定及体外传代对其毒力的影响被引量：6
- 2019年
- 2010年中国新出现了以新生仔猪高发病率、高死亡率为主要特征的变异株。为了明确山东地区猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异株特征,本试验利用Vero细胞对莒县某猪场的腹泻病料进行了病毒分离和体外传代培养。通过光学显微镜和细胞超薄切片观察、RT-PCR检测、间接免疫荧光试验、S基因序列进化分析、滴度测定和致病力试验进行病毒序列及特征分析,并探究接毒后细胞脱落时间的变化。光学显微镜观察发现,该病毒感染Vero细胞后能引起典型的合胞体病变;细胞超薄切片观察发现,病毒粒子多呈致密核芯,能引起宿主细胞线粒体肿胀,溶解;RT-PCR检测和间接免疫荧光试验结果证实其为PEDV,最终通过测序证实该毒株为变异毒株。体外传代培养至100代过程中,随着病毒代次升高,其对细胞适应性不断增强。接毒后细胞脱落时间由48 h逐渐缩短至17 h,病毒滴度由6代时的105.3TCID50/mL逐渐升高至100代的107.5TCID50/mL。致病力试验结果显示,病毒毒力随代次升高逐渐下降,40代时对仔猪已无致病力。本试验结果为PEDV突变株致病基因的确定及疫苗的研发奠定了基础。
- 唐融志陈智焦安琪赵鲁于江张玉玉孙文博张树金曾昊彭军吴家强
- 关键词：传代培养致病力
- 山东省猪腹泻病例中PEDV、TGEV和PRV的感染调查与分析被引量：15
- 2017年
- 为了解山东省规模化猪场由猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪伪狂犬病毒(PRV)引起猪病毒性腹泻的流行情况,自2014年1月至2016年12月,对来自山东省各地规模化猪场的猪腹泻病料(共3 035份)进行PCR检测。结果显示,PEDV、PRV和TGEV阳性率分别为67.49%、9.33%和3.29%;3年间,PEDV阳性率在2014年第四季度最低,为48.15%,2015年第四季度阳性率最高,为88.57%,2016年各季度阳性率相对2015年呈波动下降趋势;TGEV阳性率在2014年第四季度最高,为18.52%,2015年第三季度阳性率为15.38%,2016年第一季度阳性率为6.67%,其他季度未检测出阳性病料;PRV阳性率在2016年第二季度最高,为15.68%,除2014年第一季度未检出阳性病料外,2014年第二季度阳性率最低,为2.56%。通过对69份被动送检的病料进行PEDV、TGEV和PRV混合感染检测发现,这部分病料中PEDV、TGEV、PRV阳性率分别为86.96%、5.80%和37.68%;总单独感染率为69.57%,PEDV、TGEV和PRV单独感染率分别为57.97%、1.45%和10.14%;总混合感染率为30.43%,PEDV/PRV、PEDV/TGEV和TGEV/PRV混合感染率分别为26.09%、2.90%和1.45%;总单独感染率比总混合感染率高。结果表明,山东省存在PEDV、PRV和TGEV 3种病毒流行,存在PEDV/TGEV、TGEV/PRV和PEDV/PRV的混合感染,混合感染中主要为PEDV/PRV混合感染,不存在PEDV/PRV/TGEV的混合感染。目前PEDV是引起山东省猪病毒性腹泻的主要病因,本试验结果可为山东省猪病毒性腹泻的诊断和控制提供参考。
- 王淞曾昊陈智焦安琪张树金于江孙文博张玉玉陈蕾杜以军李俊吴家强王金宝
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒猪伪狂犬病毒
- 2015-2017年山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行病学调查与分析被引量：14
- 2019年
- 为了解山东地区生猪主要病毒性疾病的发生情况,掌握疫病发生及变化规律。本试验对2015-2017年山东省各生猪养殖场送检的病料和血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)3种病原抗原和抗体检测及遗传演化分析。结果显示:2015-2017年CSFV平均抗原阳性率为9.99%,抗体水平逐年提高,平均抗体阳性率为79.38%;样品序列测定结果显示,目前CSFV的主要流行毒株为2.1d亚型。PRRSV平均抗原阳性率为41.44%,平均抗体阳性率为83.28%,2015-2017年PRRSV抗原和抗体水平均趋于平稳趋势。2017年PRV平均抗原阳性率12.30%,gE平均抗体阳性率为30.95%,gB平均抗体阳性率为74.70%,2017年PRV野毒感染的风险有所提高。结果表明,虽然部分病毒性传染病的发生发展出现一些变化及风险,但仍处于可防可控的范围。该调查分析结果可为山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行和防控提供参考。
- 张树金曾昊于江于江陈智张玉玉陈蕾陈蕾郭立辉郭立辉任素芳李玉保李玉保
- 关键词：猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒伪狂犬病病毒
- 山东省副猪嗜血杆菌分子流行病学调查及其外膜蛋白P2基因的表达纯化被引量：7
- 2018年
- 根据副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白(outer membrane proteins,Omp)P2基因序列(GenBank登录号:FJ685754.1)设计引物,对2015～2016年在山东省不同地区采集的225份病料进行PCR扩增和遗传演化分析,结果发现2015年和2016年Hps检出阳性率分别为7.63%、7.48%,细菌分离确定225份样品中17份为阳性;Hps菌株之间的氨基酸同源性在86.7%～99.7%,同源性较高的蛋白具有交叉反应性。构建Hps omp P2基因原核表达载体,确定OmpP2蛋白的最佳诱导温度,通过亲和层析Ni-IDA树脂纯化,获得高纯度的OmpP2蛋白,Western blot确定纯化的OmpP2蛋白与不同血清型的Hps阳性血清均存在良好的反应原性。本研究为进一步探索Hps OmpP2的生物学特性及对副猪嗜血杆菌病的血清学诊断、亚单位疫苗的开发奠定了基础。
- 杨杰李建达曾昊任素芳曾昊任素芳郭立辉孙文博陈智丛晓燕
- 关键词：副猪嗜血杆菌流行病学纯化
- 山东省2014—2015年主要猪病的监测被引量：4
- 2016年
- 为给猪病防控措施的制定提供参考,2014—2015年对山东省主要猪群疫病进行了抗原抗体检测,分析其感染状况与流行趋势。结果显示:2014—2015年间,猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗原阳性率由48.10%降低到40.56%,而其抗体阳性率由74.88%提高到84.39%。伪狂犬病(PR)抗原阳性率由4.07%提高到10.86%,期间的野毒(g E)抗体阳性率和免疫(g B)抗体阳性率基本一致。猪瘟(CFS)抗原阳性率由25.80%降低到12.61%,而其抗体阳性率由56.46%提高到71.54%。除CFS在2014年第二季度高发外,PRRS和PR的发生无明显季节性,三者的抗原阳性率与抗体阳性率大致呈负相关。猪流行性腹泻(PED)抗原阳性率由65.48%提高到77.73%,其在2014年第三季度高发,而在2015年全年高发。传染性胃肠炎(TGE)仅为零星发生。猪链球菌(SS)的抗原阳性率变化不大,平均为9%左右。副猪嗜血杆菌(HPS)抗原阳性率由30.42%降低到20.22%。总之,山东省PRRS和CFS等疫病的抗原感染率呈下降趋势,抗体阳性率呈上升趋势,说明山东省的主要猪病得到一定程度地控制。同时,依据生猪养殖业中存在的问题,提出了相应的防控对策。
- 夏焱春张玉玉曾昊张梅洁焦安琪杨杰郭立辉任素芳陈智孙文博于江陈蕾杜以军李俊吴家强
- 关键词：猪病抗原抗体
- 2017-2019年山东省部分地区猪瘟流行病学调查被引量：2
- 2020年
- 为掌握近年来山东地区猪瘟病毒(CSFV)的流行及其遗传变异情况,本研究对2017年1月-2019年12月从山东省济南市、泰安市、聊城市、青岛市等10个地区采集的1687份疑似猪瘟感染猪病料运用反转录PCR方法进行了病毒核酸检测,将CSFV检测为阳性的样品进行E2基因和CSFV全基因扩增和测序,利用生物信息学软件DNAStar和Mega 7.0对CSFV的E2蛋白以及全基因序列进行遗传进化分析。另外,将这些地区采集的4866份血清样本进行了抗体ELISA检测。结果显示,1687份病料中病原检测有188份阳性,总阳性率为11.1%,其中2017-2019年病原检测阳性率分别为8.5%、13.1%、15.1%,抗原阳性率逐年上升且呈不稳定性,提示规模化猪场猪瘟兔化弱毒疫苗的免疫存在一定的风险和压力;采集的4866份血清样本中4146份呈现抗体阳性(85.2%),统计得到2017-2019年抗体阳性率分别为84.3%、83.0%、92.3%,抗体阳性率呈现上升趋势,说明山东省规模化养殖场猪群猪瘟疫苗免疫保护的整体水平逐年提高;从阳性病料中扩增获得了5株CSFV全基因组序列和5株病毒E2基因序列,经过序列比对发现,5株临床分离毒株与2.1d亚型的CSFV全基因组序列同源性在97.5%~99.0%之间,表明5株分离毒株与2.1d亚型的CSFV亲缘性较近,分离毒株氨基酸位点的突变集中在102位(L→M)以及159位(K→R)氨基酸处。本研究分析了2017年1月-2019年12月山东部分地区猪群中CSFV毒株的流行与变异情况,为指导山东省CSFV预防与控制提供了有力的参考。
- 王佳芸王鑫王鑫曾昊曾昊于江于江陈智张玉玉孙文博郭立辉任素芳李玉保
- 关键词：分子流行病学全基因组E2基因
