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基于恒温指数扩增反应高灵敏度检测端粒酶活性: 2016年; 端粒酶延伸产物是具有(ggttag)n重复序列的DNA.设计1条与2个重复序列相匹配的特异性的DNA探针-(ctaacc)2使其与端粒酶延伸产物杂交,形成双链DNA.过量的DNA探针被磁性石墨烯吸附,通过磁分离去除.利用恒温指数扩增反应(IEXPAR)对端粒酶延伸产物捕捉的DNA探针进行快速的扩增.用与双链DNA特异性结合的SYBR Green I染料对扩增产物进行实时荧光检测.在优化条件下,可以检测到低至50个癌细胞中的端粒酶活性.实现了恒温扩增条件下端粒酶活性的高灵敏度检测.; 周晓毓张佳玉周曼贾红霞; 关键词：端粒酶活性

基于杂交链式反应信号放大和磁分离技术荧光检测端粒酶活性被引量：6: 2016年; 端粒酶是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶,它一般在癌细胞中被激活.它与端粒DNA的不断复制以及癌细胞的不断增殖密切相关.所以检测端粒酶的活性对癌症的早期诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的开发具有重要意义.利用杂交链式反应（HCR）无酶放大检测信号,建立了一种简单、快速的端粒酶活性检测方法.端粒酶延伸产物是一条末端具有（ggttag）_n重复序列的DNA.在实验过程中,通过链霉亲合素与生物素的特异性作用将端粒酶延伸产物连接在磁性微球上.设计一条端粒酶延伸产物特异性的DNA探针I作为杂交链式反应的引发探针.DNA探针I的3′-端与端粒酶延伸产物的重复序列匹配,通过杂交,DNA探针I被固定在磁球上;DNA探针I的5′-端引发DNA探针II和探针III发生杂交链式反应.DNA探针II和探针III上都标记有荧光基团,可以利用荧光直接进行信号检测.在反应过程中,通过磁分离去除多余未反应的三种DNA探针.在优化条件下,可以检测到1.0×10~5个Hela细胞中的端粒酶活性.该方法简单、快速、检测成本低,分析全程无酶参与,在肿瘤或癌症的临床诊断以及以端粒酶为靶标分子的抗癌药物的筛选上具有广阔的应用前景.; 张佳玉周晓毓周曼贾红霞; 关键词：端粒酶活性荧光检测磁分离

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周曼

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