魏艳玲
- 作品数：7 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂B6基因的鉴定、表达及抗原性分析被引量：6
- 2016年
- 目的鉴定、表达猪带绦虫(Taenia solium)丝氨酸蛋白酶抑制剂(Tsserpin B6),探索其作为诊断抗原的可行性。方法利用猪带绦虫基因组和转录组数据设计Tsserpin B6特异引物,RT-PCR扩增获得Tsserpin B6基因,对其DNA、氨基酸序列进行生物信息学分析,利用Clustal X1.83进行序列比对,并用MEGA6.0进行系统进化分析。构建pET-30a-Tsserpin B6重组表达载体,在大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导表达。纯化表达的蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),用猪囊尾蚴阳性血清进行蛋白质印迹(Western blotting)鉴定。结果Tsserpin B6开放阅读框为1 131 bp,编码376个氨基酸。其编码的氨基酸序列具有serpin较为保守的反应中心环和特征性结构域(NEEGAE和FTVDHPFLF),存在9个潜在的线性B淋巴细胞抗原表位。Tsserpin B6的表达产物相对分子质量(M_r)为53 000,主要以包涵体形式存在。Western blotting检测结果显示,所表达的蛋白可与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应,在M_r 53 000处产生特异条带。结论克隆了Tsserpin B6基因,其表达产物能被猪囊尾蚴阳性血清所识别。
- 刘光学张少华郭爱疆侯俊玲魏艳玲王帅骆学农
- 关键词：猪带绦虫抗原性分析
- 猪带绦虫胰岛素受体的特征及其对囊尾蚴生长代谢的抑制研究
- 目的开展猪带绦虫胰岛素/胰岛素受体的相关研究,探索猪囊虫病防控的新技术和新手段。方法根据已完成的猪带绦虫基因组序列,以猪带绦虫的cD NA为模板,扩增猪带绦虫的两条胰岛素受体基因(Ts IR-1316和Ts IR-481...
- 王莉杰魏艳玲刘光学郭爱疆张少华侯俊玲王帅骆学农
- 关键词：猪带绦虫胰岛素受体免疫组化免疫保护
- 文献传递
- 猪带绦虫胰岛素受体TsIR-1316的鉴定及其配体结合结构域的表达
- 2016年
- 目的分析鉴定猪带绦虫(Taenia solium)胰岛素受体TsIR-1316的结构特征,并对其配体结合结构域(LBD)进行表达。方法参考GeneDB数据库猪带绦虫基因组注释信息,设计特异性引物,克隆获得TsIR-1316基因,用BLASTN和BLASTP分别对其核苷酸和氨基酸序列进行同源性比对,并用在线软件对该蛋白的信号肽和结构域进行预测分析。将其LBD克隆至原核表达载体pET-30a(+),表达、纯化后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,用猪囊尾蚴阳性血清和TsIR-LBD免疫兔血清进行蛋白质印迹(Western blotting)鉴定。结果 TsIR-1316的开放阅读框为5 196 bp,编码1 732个氨基酸,与多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis)的同源性为84%,具有典型的酪氨酸激酶家族的结构特征和"V"型三级结构。SDS-PAGE结果显示,所表达的重组蛋白相对分子质量(M_r)为59 000,与预期一致。Western blotting检测结果显示,重组蛋白可与猪囊尾蚴阳性血清及TsIR-LBD免疫兔血清发生特异性反应,在M_r59 000处出现特异条带。结论克隆并鉴定了猪带绦虫TsIR-1316基因,其LBD的表达产物可被猪囊尾蚴阳性血清所识别,具有良好的反应原性。
- 魏艳玲郭爱疆张少华刘光学侯俊玲骆学农
- 关键词：猪带绦虫
- 牛带绦虫胰岛素受体(TsaIR-4810)基因胞外区的克隆及表达
- 胰岛素信号通路是一条相对保守的信号传导途径,在细胞生长发育及代谢调控中发挥重要作用,并可以影响细胞与外界环境的相互作用.已有研究表明,寄生蠕虫不仅存在胰岛素样因子(insulin-like peptide,LP),同时还...
- 魏艳玲郭爱疆张学勇王帅骆学农
- 关键词：牛带绦虫胰岛素受体信号通路原核表达
- 猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810的鉴定及LBD区表达
- 2016年
- 目的克隆鉴定猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810基因,并表达其LBD区。方法设计猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810特异性引物,并分段进行RT-PCR扩增。TsIR-4810的完整ORF序列经BLAST同源比对,SMART预测其结构域,SWISS-MODEL同源建模,并用PhyML构建系统发育树。将TsIR-4810的LBD区克隆至pET-30a中进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果获得的目的基因完整的ORF为4 920bp,其编码蛋白的氨基酸序列与其他生物的胰岛素受体一样,具有相对保守的分泌信号肽、受体L1和L2结构域、FnⅢ结构域、跨膜区和受体酪氨酸激酶域。构建的LBD重组菌株诱导表达了63ku的目的蛋白,与预期大小相符,且主要以包涵体形式存在。结论 TsIR-4810为猪带绦虫胰岛素受体基因,其LBD区的成功表达,将为开展基于胰岛素受体LBD区的新型疫苗和药物奠定基础。
- 魏艳玲郭爱疆刘光学杨锐张少华侯俊玲骆学农
- 关键词：猪带绦虫胰岛素受体LBD
- 猪带绦虫胰岛素受体的分子特征及其重组疫苗的免疫保护效果研究
- 猪囊尾蚴病是重要的人畜共患寄生虫病，不仅对畜牧业造成重大经济损失，并且严重危害人类健康。胰岛素信号通路是一条非常古老且进化十分保守的信号传导途径，不仅在控制细胞生长及代谢调控中发挥重要作用，而且可以影响细胞与外界环境的相...
- 魏艳玲
- 关键词：猪带绦虫胰岛素受体基因组序列
- 文献传递
- 牛带绦虫胰岛素受体(TsaIR-4810)基因胞外区的克隆及表达
- 目的:胰岛素信号通路是一条相对保守的信号传导途径,在细胞生长发育及代谢调控中发挥重要作用,并可以影响细胞与外界环境的相互作用。已有研究表明,寄生蠕虫不仅存在胰岛素样因子(insulin-like peptide,LP),...
- 魏艳玲郭爱疆张学勇王帅骆学农
- 关键词：牛带绦虫胰岛素受体信号通路原核表达
- 文献传递
