国敏
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：复旦大学附属华山医院更多>>
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- Exendin-4通过下调CD147-MMPs通路改善t-PA溶栓后脑出血转化被引量：1
- 2016年
- 目的脑出血是急性缺血性脑卒中患者进行t-PA静脉溶栓治疗后面临的主要问题。本研究旨在探究exendin-4(EX-4)对缺血急性期t-PA溶栓后脑出血转化的影响。方法实验采用C57BL/6小鼠制作大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,经尾静脉注射t-PA干预模拟溶栓治疗。小鼠随机分为4组(均n=18):对照组(MCAO+生理盐水);t-PA干预组(MCAO+t-PA);EX-4干预组(MCAO+EX-4);t-PA+EX-4干预组(MCAO+t-PA/EX-4)。EX-4(10 mg·kg-1)于t-PA给药前经尾静脉注射。TTC染色法观察脑梗死体积,伊文思蓝染色检测血脑屏障通透性,Western blot检测CD147及血脑屏障紧密连接蛋白zo-1和occludin的表达,ELISA法检测血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量。结果与t-PA干预组比较,EX-4干预组可减轻MCAO小鼠的梗死体积[(33.67±5.72)mm3],同时可减轻t-PA引起的脑出血[(1.3±0.17)mg·d L-1];t-PA干预组zo-1和occludin水平降低,而EX-4可逆转两者的下降,保护血脑屏障完整性;t-PA干预组显著上调血清MMP-2/-9及缺血脑组织的CD147(MMPs上游调节分子)水平(分别升高2.5、4.6和3倍),而EX-4干预组抑制MMP-2/-9及CD147水平的增加。结论 EX-4能保护血脑屏障完整性,减轻脑缺血急性期t-PA溶栓后脑出血转化,这一作用与EX-4抑制CD147-MMPs通路有关。
- 国敏王寻王卫峰董强崔梅
- 关键词：EXENDIN-4CD147血脑屏障
- 一种采用快速免疫磁珠法分离脑脊液中不同细胞来源外泌体亚型的方法
- 本发明涉及一种采用快速免疫磁珠法分离脑脊液中不同细胞来源外泌体亚型的方法，具体步骤包括：(1)对脑脊液进行预处理；(2)加入PE标记的一抗进行分选；(3)加入免疫磁珠；(4)增加磁场，进行分离。与现有技术相比，本发明精准...
- 董强崔梅国敏陈兴栋赵鸿琛丁梦媛
- 文献传递
- PINK1介导缺氧损伤时星形胶质细胞对神经元的保护作用被引量：5
- 2016年
- 目的探究星形胶质细胞内PTEN诱导假定激酶1(PINK1)缺失对缺血时神经保护作用的影响及其作用机制。方法离体培养原代星形胶质细胞,使用小干扰RNA(si RNA)沉默PINK1表达,氧糖剥夺(OGD)建立细胞缺氧模型,分为4组:PINK1沉默组(si RNA+转染剂)、空质粒组(空质粒+转染剂)、转染剂组(只加转染剂)和对照组(星形胶质细胞),各组均与神经元共培养;另设立神经元单独培养组。免疫荧光染色观察神经元凋亡情况。定量PCR及ELISA检测星形胶质细胞促红细胞生成素(EPO)及血管内皮生长因子(VEGF)表达量;Western blot检测星形胶质细胞内缺血诱导因子(HIF)及核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白水平。结果 OGD损伤后神经元凋亡率较高,与星形胶质细胞共培养后神经元凋亡率显著降低(P<0.05)。PINK1基因沉默后共培养神经元凋亡增加,星形胶质细胞EPO及VEGF分泌量减少、胞内EPO及VEGF转录水平降低(P<0.05);HIF-1、HIF-2与NF-κB通路活化水平均显著降低(P<0.05)。结论星形胶质细胞对OGD损伤神经元有保护作用,其作用通过EPO及VEGF实现;PINK1基因沉默后星形胶质细胞对缺血神经元保护作用减弱,可能与NF-κB通路活化水平降低、HIF激活受损进而下调EPO和VEGF表达量有关。
- 王寻国敏王卫峰董强崔梅
- 关键词：星形胶质细胞红细胞生成素血管内皮细胞生长因子
- 一种高灵敏的磁珠分选联合胶体金标记的外泌体免疫电镜方法
- 本发明涉及一种高灵敏的磁珠分选联合胶体金标记的外泌体免疫电镜方法，具体包括以下步骤：(1)制备生物素化的抗体；(2)纯化目标亚型外泌体；(3)免疫标记。与现有技术相比，本发明克服了目前免疫电镜技术检测外泌体时纯度低、效率...
- 董强崔梅国敏陈兴栋赵鸿琛丁梦媛
- 文献传递
- 腺苷参与生酮饮食提高大脑中动脉阻塞模型小鼠脑缺血耐受作用被引量：2
- 2016年
- 目的探究生酮饮食对大脑中动脉阻塞(MCAO)模型小鼠的作用及可能的作用机制。方法建模前小鼠予以3周饮食预处理,随机作用为标准饮食对照组、高碳水化合物饮食组和生酮饮食组(各组n=30),采用MCAO法建立脑缺血模型,TTC染色法观察脑梗死体积,伊文斯蓝染色检测血脑屏障通透性,激光多普勒血流仪测量局部脑血流量,活体微透析结合高效液相色谱法(HPLC)检测脑内缺血区腺苷水平。结果生酮饮食组体重显著降低并伴随血β-羟基丁酸含量明显增加(P<0.05)。生酮饮食后小鼠对缺血耐受性明显增强,小鼠梗死体积、神经功能评分、血脑屏障通透性下降(P<0.05),局部脑血流量及腺苷含量增加(P<0.05),阻断腺苷A1受体其神经保护作用消失。结论生酮饮食能显著增加小鼠对缺血的耐受性,可能是通过增加缺血区细胞外腺苷水平、上调局部脑血流量实现的,而腺苷的这一作用可能通过其A1受体所介导。
- 国敏王寻王卫峰董强崔梅
- 关键词：生酮饮食大脑中动脉阻塞腺苷脑卒中
- 一种高灵敏的磁珠分选联合胶体金标记的外泌体免疫电镜方法
- 本发明涉及一种高灵敏的磁珠分选联合胶体金标记的外泌体免疫电镜方法，具体包括以下步骤：(1)制备生物素化的抗体；(2)纯化目标亚型外泌体；(3)免疫标记。与现有技术相比，本发明克服了目前免疫电镜技术检测外泌体时纯度低、效率...
- 董强崔梅国敏陈兴栋赵鸿琛丁梦媛
- 生酮饮食可通过抑制内质网应激相关NLRP3炎症小体提高脑缺血耐受
- 缺血性脑卒中由局部脑区血供减少或完全中断引起,具有高死亡率和高致残率.在卒中发生前通过一定干预诱导神经保护状态,可减轻缺血后脑组织损伤及神经功能障碍.生酮饮食为高脂(80-90％)低碳水化合物低蛋白质饮食,生酮饮食对卒中...
- 国敏王寻陈方哲董强崔梅
- 关键词：缺血性脑卒中生酮饮食内质网应激
- 缺氧诱导因子-1靶基因参与生酮饮食提高大脑中动脉闭塞模型小鼠脑缺血耐受作用被引量：3
- 2016年
- 目的探究生酮饮食对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型小鼠的作用及缺氧诱导因子-1靶基因参与机制。方法小鼠随机分为正常对照组及标准饮食组、高碳水化合物饮食组、生酮饮食组,建模前通过3周饮食干预后,饮食干预的3组小鼠建造MCAO模型,正常对照组给予标准饮食但不进行MCAO造模。2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色观察脑梗死体积,Longa评分法对模型鼠进行神经功能评分,聚合酶链反应检测缺血区脑组织缺氧诱导因子-1下游靶基因红细胞生成素、血管内皮生长因子、葡萄糖转运体1、单羧酸转运体4的mRNA表达量。结果生酮饮食组小鼠脑组织梗死体积更小,神经功能评分更低,缺血区脑组织中红细胞生成素、血管内皮生长因子、葡萄糖转运体1、单羧酸转运体4的mRNA表达显著增加。结论生酮饮食可能是通过增加缺血区缺氧诱导因子-1靶基因表达,从而提高MCAO小鼠脑组织对缺血的耐受性。
- 国敏崔梅董强
- 关键词：生酮饮食大脑中动脉闭塞
