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一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法: 本发明涉及一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法；驯化培养方法为首先配制不同铜离子浓度驯化培养基和基础培养基；将所培养的产朊假丝酵母种子液，接种到不同铜离子浓度驯化培养基中，摇床培养；选择所培养的菌液中OD600值高，...; 李旺宋洋洋李元晓武晓红丁轲张光勤; 文献传递

黄曲霉毒素分解酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达与应用: 2018年; 本试验旨在研究黄曲霉毒素分解酶(ADTZ)基因在枯草芽孢杆菌中的表达与应用。试验通过构建枯草芽孢杆菌ADTZ基因的整合表达载体,将ADTZ基因整合到野生型枯草芽孢杆菌(B.subtilis LN)中,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)初步检测ADTZ蛋白的表达情况。将重组枯草芽孢杆菌作为发酵菌种接种到发霉玉米中进行发酵试验,检测发霉玉米样品中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量的变化,验证ADTZ基因在枯草芽孢杆菌中的表达效果。结果表明,通过构建整合表达载体成功将ADTZ基因整合到枯草芽孢杆菌基因组中,在SDS-PAGE上检测到重组枯草芽孢杆菌能够分泌表达特异性蛋白条带。经过重组菌发酵的发霉玉米AFB1的含量较未接种和接种野生型枯草芽孢杆菌发酵的发霉玉米AFB1的含量差异显著(P<0.05)。由此可见,ADTZ基因可成功整合到野生型枯草芽孢杆菌中,并进行了胞外分泌表达,表达产物具有生物活性,能有效地降解AFB1。; 史敦胜聂利波宋洋洋李元晓李旺; 关键词：基因重组枯草芽孢杆菌发酵

一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法: 本发明涉及一种酵母菌富集铜离子的驯化培养和检测方法；驯化培养方法为首先配制不同铜离子浓度驯化培养基和基础培养基；将所培养的产朊假丝酵母种子液，接种到不同铜离子浓度驯化培养基中，摇床培养；选择所培养的菌液中OD600值高，...; 李旺宋洋洋李元晓武晓红丁轲张光勤

产纤维素酶枯草芽孢杆菌Kpg酶学性质研究及对麸皮纤维素含量的影响被引量：10: 2018年; 对枯草芽孢杆菌B.subtilis Kpg所产纤维素酶的酶学性质进行研究,确定该纤维素酶的最佳温度和最适pH,并进行固体发酵麸皮试验,验证Kpg纤维素酶的实践效果。试验以3,5-二硝基水杨酸酶活测定法为基础,通过改变纤维素酶的反应温度和pH环境,确定最适反应温度和最适pH环境。为研究其实际降解能力,将枯草芽孢杆菌Kpg添加到麸皮中,在37℃环境中发酵6d。结果显示,枯草芽孢杆菌Kpg纤维素酶的最适反应温度为60℃,此时纤维素酶活性最大为108.45U/mL;反应液最适pH值为6.0,此时纤维素酶活性为97.72U/mL;在两者最适条件共同作用下,纤维素酶活性为113.58U/mL。发酵试验结果显示,枯草芽孢杆菌Kpg能够显著降低麸皮中的纤维素含量(P<0.05),同时显著提高发酵麸皮中的真蛋白含量(P<0.05)。枯草芽孢杆菌Kpg表现出的酶学性质符合发酵微生物选育的标准和特征,为生物饲料的开发和应用提供数据参考。; 聂利波李旺史敦胜宋洋洋王占彬; 关键词：枯草芽孢杆菌纤维素酶酶活性分析

富铜酵母驯化研究: 铜是动物体内必需的的微量元素之一，在动物体内发挥多种营养和调控作用。无机铜在动物饲料中的生物学效价低，对环境污染严重。有机铜具有利用率高，污染小等优点，被广泛应用于畜牧生产中。酵母菌具有较强的富集微量元素的能力，经常被作...; 宋洋洋; 关键词：产朊假丝酵母响应面法饲料酵母

响应面法优化产朊假丝酵母培养及干燥工艺被引量：3: 2019年; 本研究旨在优化产朊假丝酵母液体培养参数及干燥保护剂配方,提高产朊假丝酵母液体培养数量,制备出高复苏率的活性干酵母。以装液量、转速、温度和培养时间为影响因素,设计单因素试验,并采用Box-Behnken试验设计及响应面分析法优化产朊假丝酵母液体培养方案。在此条件下培养酵母,以L-谷氨酸钠、乳糖、脱脂奶粉为影响因素进行单因素保护试验,并采用响应面分析法优化干燥保护剂的组合。结果表明,产朊假丝酵母最佳培养条件为装液量45 mL/250 m L,转速200 r/min,温度30℃,培养时间24 h。在此条件下,培养的产朊假丝酵母数量可以达到9.34×10~8CFU/mL;最佳保护剂组合1%L-谷氨酸钠、12%脱脂奶粉、6%乳糖,经干燥后,产朊假丝酵母复苏率达到81.9%。此时活菌数7.65×10~8CFU/g,比未加保护剂组提高了3.83倍。; 宋洋洋柴鸿勋韩蕴琦李旺; 关键词：响应面法产朊假丝酵母

饲用产朊假丝酵母优化培养研究被引量：2: 2017年; 产朊假丝酵母作为新型饲料微生物菌种受到越来越多研究的关注。然而,关于产朊假丝酵母高效培养的研究不多。研究以OD值和活菌数作为测定指标,研究产朊假丝酵母最优培养参数,为开发饲用酵母提供数据。试验采用单因素试验与3因素3水平正交试验相结合的设计方法对产朊假丝酵母培养基成分(碳源、氮源和无机盐)进行培养和优化。通过单因素试验及正交试验,得出最优培养基为蔗糖60、酵母浸粉20及KH_2PO_4 1g/L,此时酵母细胞数达8 300万CFU/mL。与对照组相比菌数提高3倍,为饲料产品的开发奠定基础。; 宋洋洋李旺聂利波史敦胜; 关键词：产朊假丝酵母正交设计

枯草芽孢杆菌纤维素酶基因整合载体的构建被引量：2: 2017年; 目的:以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为宿主,构建纤维素酶基因整合表达载体,获得能够表达纤维素酶并且降解纤维素的工程菌。方法:通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)从B.subtilis LN基因组中克隆同源片段M1、M2基因片段,以质粒pGEM-T为载体,将同源片段M1、M2、启动子P43和葡萄糖苷酶基因CelKg连接在一起构建整合载体pGEM-Kmpgmt,并采用双交换同源重组的方式将其转化进入B.subtilis LN基因组中。结果:通过PCR和双酶切验证整合载体构建完成,并成功整合到野生型B.subtilis LN中,获得重组菌B.subtilis Kpg。刚果红染色结果显示重组菌对羧甲基纤维素钠有降解作用。改良培养基37℃条件下摇瓶培养,重组菌B.subtilis Kpg生长至18 h时上清液中纤维素酶活力比野生型B.subtilis LN提高了115%。; 聂利波王占彬史敦胜宋洋洋李旺; 关键词：同源重组纤维素酶基因枯草芽孢杆菌

生物方法降解黄曲霉毒素的研究被引量：4: 2017年; 黄曲霉毒素是黄曲霉、寄生曲霉等真菌代谢过程中产生的次级代谢产物,是一种剧毒物质,能够导致机体病变、基因突变和癌变。广泛存在于粮食、食品以及饲料中,对人体健康和动物生产造成严重的不良影响,给粮食储存和畜牧业发展造成巨大的经济损失。生物方法降解黄曲霉毒素是一种有效、安全和环保的黄曲霉毒素解毒方法,论述了生物方法降解黄曲霉毒素,并对生物方法降解黄曲霉毒素应用前景进行展望。; 史敦胜李旺聂利波宋洋洋王占彬; 关键词：黄曲霉毒素次级代谢产物微生物降解方法

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宋洋洋