陈红利
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 腮腺炎病毒核蛋白原核表达及其血清学检测方法的建立被引量:2
- 2017年
- 目的可溶性表达具有良好抗原性的腮腺炎病毒核蛋白(nuclear protein,NP),并建立特异性的腮腺炎病毒IgG抗体血清学检测方法。方法提取腮腺炎病毒RNA,用RT-PCR法扩增NP基因全长,并连接至pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pET-32a(+)-NP,鉴定正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,可溶性成分经饱和硫酸铵沉淀粗提后,再利用镍柱进行亲和层析纯化,获得高纯度的NP蛋白,并用Western blot方法进行鉴定。包被纯化后NP抗原建立间接酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测方法 (NP ELISA法),并检测了348份健康儿童血清中抗腮腺炎病毒IgG抗体水平,与维润腮腺炎病毒ELISA IgG抗体检测试剂盒(维润ELISA法)进行平行比较。结果本研究建立的NP ELISA法和维润ELISA法符合率为78.45%(273/348);与维润ELISA法比较灵敏性为72.58%(135/186),特异性为85.19%(138/162)。两种方法检测348份健康儿童血清腮腺炎病毒IgG抗体的阳性率分别为45.69%(159/348)和53.45%(186/348)。结论利用原核表达的方法成功制备出具有腮腺炎抗原特性的NP抗原,并建立了腮腺炎病毒IgG抗体ELISA检测方法,为腮腺炎病毒人群血清流行病学调查奠定了基础,但需进一步使用中和试验评估两种方法的敏感性和特异性。
- 陈红利曹蕾郉文月崔爱利祝双利毛乃颖许文波扈瑞平
- 关键词:腮腺炎病毒血清学间接ELISA检测方法WESTERNBLOT
- 拉米夫定致周围神经病
- 2015年
- 1例56岁女性患者因慢性乙型肝炎服用拉米夫定100 mg,1次/d.3年后患者出现四肢麻木.肌电图检查示感觉神经传导速度减慢.给予维生素B1、甲钴胺治疗2个月,未见好转.停用拉米夫定,改为阿德福韦酯10 mg,1次/d口服.2个月后,患者四肢麻木症状明显好转.
- 赵晓卫陈红利徐灿丽
- 关键词:拉米夫定周围神经系统疾病
- 腮腺炎病毒血清学检测方法的建立及应用
- 目的:利用原核表达的方法制备具有良好抗原性的腮腺炎病毒部分血细胞凝集素及神经氨酸酶(hemagglutinin and neuraminidase,HN)和核蛋白(nuclear protein,NP),并建立特异性的腮...
- 陈红利
- 关键词:腮腺炎病毒原核表达血清学检测间接ELISA法
- 文献传递