冷俊
- 作品数:4 被引量:0H指数:0
- 供职机构:同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金:上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MBD2在5-杂氮-2′-脱氧胞苷对PC3前列腺癌细胞株去甲基化过程中的变化研究
- 目的观察MBD2在细胞生长过程中和在5-杂氮-2’-脱氧胞苷处理PC3前列腺癌细胞株过程中的转录变化方法MSP检测下游抑癌基因GSTP1、RASSF1A的甲基化状态;实时荧光定量PCR检测在生长过程中各调控基因GNMT1...
- 翁文浩冷俊李智
- 关键词:5-AZA-CDR甲基化
- 文献传递
- 5-杂氮-2′-脱氧胞苷对前列腺癌PC3细胞系生长以及抑癌基因GSTP1、RASSF1A转录的影响
- 2009年
- 目的:观察DNA去甲基化药物5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-CdR)对前列腺癌细胞株PC3抑癌基因GSTP1和RASSF1A转录改变以及细胞增殖活性的影响。方法:用不同浓度5-aza-CdR(2、5、10μmol/L)处理前列腺癌细胞株PC3,利用甲基化特异性PCR(MSP)法检测用药前PC3细胞株GSTP1、RASSF1A启动子甲基化状态;采用实时荧光定量RT-PCR法检测用药过程中GSTP1和RASSF1A mRNA转录改变;用MTT法和流式细胞术检测用药前后PC3肿瘤细胞增殖活性改变。结果:GSTP1、RASSF1A启动子区域出现甲基化现象。与对照组相比,药物组培养24h后GSTP1和RASSF1A mRNA表达未发生明显改变;培养48h后5、10μmol/L药物组GSTP1和RASSF1A mRNA表达出现上调;72h后各浓度药物组均检测出两基因mRNA表达升高(P<0.05)。药物组培养24和48h未出现明显的细胞增殖抑制现象和细胞周期改变;培养72h后,药物组细胞增殖抑制显著(P<0.05),细胞周期改变明显(P<0.05),阻滞于G0/G1期。结论:GSTP1和RASSF1A基因在PC3前列腺癌细胞系中的失表达可能与其启动子CpG岛高甲基化有关;5-aza-CdR能在一定程度上抑制PC3细胞增殖,干扰细胞周期,提高GSTP1和RASSF1A的转录水平。
- 翁文浩郑军华冷俊李智李晶华
- 关键词:GSTP1基因RASSF1A基因
- 5-杂氮-2′-脱氧胞苷对PC3前列腺癌细胞株的生长和GSTP1、RASSF1A基因异常甲基化的影响
- 目的用去甲基化药物5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza- CdR)对PC3前列腺癌细胞株进行处理.观察DNA甲基化的可逆性以及药物细胞生长增殖活性的影响.为肿瘤治疗提供新靶点。方法用甲基化特异PCR(MSP)检测GSTP...
- 翁文浩冷俊李智李晶华
- 关键词:GSTP1RASSF1A
- 文献传递
- 5-Aza-CdR对膀胱癌EJ细胞系生长及Apaf-1基因异常甲基化的影响
- 2009年
- 目的观察5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2-′deoxyc ityd ine,5-Aza-CdR)对体外培养的膀胱癌EJ细胞增生、细胞周期影响及其对此细胞株中Apaf-1基因的甲基化状态的影响。方法不同浓度5-Aza-CdR处理体外培养膀胱癌EJ细胞后,用MTT法检测药物处理24、48、72 h后的细胞增殖活性;PI染色和流式细胞仪检测药物处理72 h后的细胞周期分布;MSP法检测用药前后细胞中Apaf-1基因的甲基化状态;Real-tim e RT-PCR法检测用药前后细胞中Apaf-1的mRNA表达变化。结果2×10-6、5×10-6、1×10-5mol/L 5-Aza-CdR处理膀胱癌EJ细胞24、48、72 h后,细胞增生受到抑制,有时间和剂量依赖性。流式细胞仪分析表明,不同药物浓度处理EJ细胞72 h后细胞增殖指数降低明显:5×10-6、1×10-5mol/L组分别为(34.09±0.79)、(28.55±1.76),与对照组(42.78±1.23)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。在5-Aza-CdR处理前未检测到膀胱癌EJ细胞系的Apaf-1基因的mRNA表达,经过5-Aza-CdR处理后,Apaf-1基因在膀胱癌EJ细胞系中甲基化状态得到了逆转,Apaf-1基因的mRNA重新表达。结论5-Aza-CdR对膀胱癌EJ细胞具有增生抑制作用;Apaf-1基因的表达情况与其甲基化状态的改变有关。
- 冷俊翁文浩李智许闪闪李晶华
- 关键词:5-AZA-CDRAPAF-1基因膀胱肿瘤DNA甲基化