曲志虎
- 作品数：5 被引量：14H指数：1
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金上海市博士后基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去铁胺对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的调控
- 张晓玲戴尅戎曲志虎范启明屠锦雯方波陈莹
- 课题来源：上海市科委科技人才计划启明星项目；项目编号：07QA14062。研究目标：1.明确去铁胺可以促进BMP-2诱导的骨髓间质干细胞向成骨细胞分化；2.阐明去铁胺促进BMP-2诱导的骨髓间质干细胞向成骨细胞分化的分子...
- 关键词：
- 关键词：骨缺损修复去铁胺骨髓间质干细胞
- 人IL-1受体拮抗蛋白重组逆转录病毒载体的构建、鉴定及在骨关节炎软骨细胞中的表达
- 2008年
- 目的构建含人IL-1受体拮抗蛋白(IL-1 receptor antagonist,IL-1Ra)逆转录病毒表达载体(PLXRN-IL-1Ra),体外转染人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞,研究其相关特性。方法利用细菌内同源重组技术快速构建PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒重组质粒,经测序及酶切鉴定正确后转染PT67细胞,包装成为重组PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒,并使用小鼠肾成纤维细胞系NIH/3T3对病毒进行滴度测定。实验分为3组:未转染组(A组)、PLXRN空质粒转染组(B组)、PLXRN-IL-1Ra转染组(C组),病毒感染人OA软骨细胞后,RT-PCR检测细胞内IL-1Ra基因的转录和表达;ELISA法检测细胞培养上清液中人IL-1Ra蛋白表达。结果酶切鉴定及基因测序证实重组逆转录病毒质粒中含有人IL-1Ra cDNA,测定包装的病毒滴度为3×104CFU/mL。原代软骨细胞体外培养呈多角形或梭形,甲苯胺蓝染色见细胞内有紫色异染颗粒。RT-PCR结果显示在C组出现311bp人IL-1Ra mRNA片段,A、B组未见人IL-1Ra mRNA的表达带,GAPDH在各组均有表达。ELISA检测发现C组细胞上清有一定量的人IL-1Ra表达,蛋白浓度为(60.47±15.13)ng/L,A组和B组均无人IL-1Ra表达。结论构建的IL-1Ra逆转录病毒表达载体成功地感染人OA软骨细胞,并在体外获得稳定表达,为将表达人IL-1Ra基因的人OA软骨细胞用于OA基因治疗提供了实验依据。
- 芮云峰王友张晓玲孙红立曲志虎戴尅戎
- 关键词：逆转录病毒载体骨关节炎软骨细胞基因治疗
- 白细胞介素-1受体拮抗蛋白和白细胞介素-10联合基因转染人骨关节炎软骨细胞的研究被引量：14
- 2007年
- 目的探讨逆转录病毒载体PLXRN介导的人白细胞介素-1受体拮抗蛋白(hIL- 1Ra)和白细胞介素-10(hIL-10)联合基因转染在人骨关节炎(OA)关节软骨细胞中稳定表达的可行性。方法构建含目的基因的表达载体PLXRN-IL-1Ra和PLXRN-IL-10,经酶切及测序鉴定正确后单个或联合转染人OA软骨细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内目的基因的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中hIL-IRa和ML-10蛋白表达量的水平。结果酶切和测序表明获得了与预期结果一致的PLXRN-IL-1Ra和PLXRN-IL-10真核表达载体。稳定转染软骨细胞后,RT-PCR检测到了细胞内hIL-1Ra和hIL-10 mRNA片段。ELISA检测发现基因转染组均有相应的一定量的ML-1Ra和ML-10表达,单个基因转染组中分别为(60.47±15.13)和(19.73±4.10)ng/L;联合基因转染组为(67.15±11.47)和(16.76±9.96)ng/L。未转染组及PLXRN空质粒转染组均无hIL-1Ra和hIL-10表达,基因转染组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而单个基因转染组和联合基因转染组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论逆转录病毒载体PLXRN介导的hIL-1Ra和hIL-10联合基因可有效地感染人OA关节软骨细胞并获得稳定表达,为将表达hIL-1Ra和hIL-10目的基因的人OA软骨细胞用于OA基因治疗提供了依据。
- 芮云峰王友张晓玲孙红立曲志虎戴尅戎
- 关键词：白细胞介素-1受体白细胞介素-10基因转染骨关节炎软骨细胞
- 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白与骨形态发生蛋白基因转染骨髓间充质干细胞促进成骨的体外实验研究
- 2007年
- 骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）是构建修复骨缺损、骨不连组织工程产品的重要种子细胞之一，我们既往的研究表明，腺病毒介导的骨形态发生蛋白（bone morphogenic protein2，BMP2）基因转染MSC可有效促进骨形成^[1,2]。但腺病毒载体进入机体后，也激发了针对腺病毒产生的抗原特异性细胞免疫和体液免疫反应^[3]。因此，宿主对病毒和病毒感染细胞的免疫反应介导了：（1）病毒感染细胞的清除和转移基因表达的丧失；
- 张晓玲张超汤亭亭曲志虎楼觉人戴尅戎
- 关键词：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白基因转染病毒感染细胞
- 玉米醇溶蛋白仿生组织工程支架材料体内外诱导成骨的实验研究
- 2009年
- 目的检测玉米醇溶蛋白（zein）仿生三维多孔支架材料的生物相容性、骨诱导性和生物可降解性。方法将人骨髓基质干细胞（BMSCs）载人海藻酸钠或zein制成复合物。通过扫描电镜观察、噻唑蓝分析法以及碱性磷酸酶染色与定量检测，分别比较zein和海藻酸钠对BMSCs体外黏附、增殖和分化的影响。取24只8周龄裸鼠，随机分为两组，制成肌袋植入异位成骨模型。对照组单纯植入zein，实验组植入zein与兔BMSCs复合物。术后2、4、8和12周取材进行影像学和组织学观察。结果与海藻酸钠相比，zein在任何时间段均能够更好地促进兔BMSCs的体外增殖和分化，差异有统计学意义（P〈0．05）。同时，与单纯植入zein相比，BMSCs能够增强zein体内诱导成骨的作用。结论zein具有良好的生物相容性、骨诱导性和生物可降解性。
- 屠锦雯曲志虎芮云峰黄金刚童海骏张晓玲
- 关键词：玉米醇溶蛋白骨髓基质干细胞异位成骨
