- 可编辑核酸酶介导的哺乳动物基因敲入技术最新进展被引量:5
- 2016年
- 实验哺乳动物模型是研究基础生物学及人类疾病的重要工具,对实现转基因操作,尤其是基因敲入(knock-in,KI),具有重大意义。锌指核酸酶(zinc-fi nger nucleases,ZFN)、类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALEN)和RNA介导的、基于成簇的规律间隔的短回文重复序列和Cas9蛋白的DNA核酸内切酶[clustered regulatory interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/Cas9-based RNA-guided DNA endonucleases,CRISPR/Cas9]等的出现,为科研工作者提供了革命性的转基因操作工具。这些可编辑核酸酶通过在靶标序列位置产生双链断裂缺口(double strand breaks,DSBs),并在同源修复模板存在的情况下发生同源重组,进而实现精确的基因敲入。该文主要综述了这些技术的原理及其在哺乳动物KI中取得的最新进展、提高KI效率以及降低脱靶效应的举措等,将有助于KI技术在未来转基因实践中的广泛应用。
- 张敏杰孙玲刘真蔡毅君孙强杨宇丰陈文锋
- 关键词:基因敲入锌指核酸酶哺乳动物
- 利用CRISPR/Cas9实现果蝇的基因敲入
- 对生物过程中的机制研究依赖于遗传学操作,通过分析对相关基因活性进行干扰导致的表型可推断出其扮演的角色。实现基因组的敲入有利于我们更加精确的检测或操纵目标基因的表达,加深我们对相应生物过程的了解。果蝇作为模式生物以多样化的...
- 张敏杰
- 关键词:基因敲入果蝇
- 文献传递
- 昆虫定点基因敲入组合物及其使用方法和应用
- 本发明提供了一种用于昆虫定点基因敲入的组合物,所述组合物包含单切口酶或其编码多核苷酸;重组因子或其编码多核苷酸;和任选的,包含外源性基因的供体DNA。本发明还提供了相应的基因敲入方法以及制备转基因昆虫的方法。本发明的组合...
- 杨宇丰张西张敏杰陈文锋孙玲李江
- 昆虫定点基因敲入组合物及其使用方法和应用
- 本发明提供了一种用于昆虫定点基因敲入的组合物,所述组合物包含单切口酶或其编码多核苷酸;重组因子或其编码多核苷酸;和任选的,包含外源性基因的供体DNA。本发明还提供了相应的基因敲入方法以及制备转基因昆虫的方法。本发明的组合...
- 杨宇丰张西张敏杰陈文锋孙玲李江
- 文献传递