穆敏
- 作品数：14 被引量：63H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院棉花研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家现代农业产业技术体系建设项目河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 陆地棉萌发至幼苗期抗冷性的鉴定被引量：24
- 2016年
- 【目的】低温胁迫是影响棉花正常生长的重要因子之一,通过对棉花种质进行合理的抗冷性鉴定,可以为棉花的抗冷机制研究提供重要的先决条件,进而为棉花抗冷品种的选育提供一定的理论参考。【方法】利用4个抗冷性不同的陆地棉品种(系),设置0、4、10和15℃不同温度处理7 d,然后在正常条件(28℃,光照/黑暗,14 h/10 h)恢复生长7 d,筛选适合棉花萌发期进行抗冷性鉴定的低温条件;然后对4个品种(系)进行0℃低温处理1、2、3、4、5、6和7 d,恢复正常生长7 d,筛选萌发期抗冷性鉴定0℃低温处理的天数。对于芽期的抗冷性鉴定,选用抗冷性差异显著的2个陆地棉材料进行4℃低温处理0、1、2、3、4、5、6和7 d,筛选适用于芽期抗冷鉴定的低温处理的天数。将47个陆地棉材料(子叶期)进行4℃处理24 h,恢复正常生长7 d后调查冷害指数,鉴定棉花子叶期的抗冷性。采用南京建成生物工程研究所研制的试剂盒测定芽期和子叶期低温胁迫后的生化指标。【结果】通过对棉花不同时期,包括萌发期、芽期和子叶期进行不同低温胁迫条件的筛选,最终初步建立了适合棉花不同时期的抗冷性鉴定标准。0℃处理4 d,恢复正常生长7 d的相对子叶平展率可以作为萌发期的抗冷鉴定指标;4℃处理5 d,恢复正常生长的7 d的子叶平展率可以作为芽期的抗冷鉴定指标;4℃处理24 h,恢复正常生长的7 d的抗冷指数可以作为子叶期的抗冷鉴定指标。抗冷材料豫2067芽的SOD酶活和POD酶活均在低温处理前期呈上调趋势,之后下降至趋于平稳,而冷敏感材料衡棉3号芽的两种酶在低温处理前期迅速下降,然后上调后趋于平稳;2个材料芽的CAT酶活性在低温处理早期均先上升后下降,在冷处理后期抗冷材料豫2067的CAT酶活一直高于冷敏感材料衡棉3号;2个材料的可溶性蛋白含量在冷处理早期比较接近,在冷处理后期抗冷材料�
- 王俊娟王德龙阴祖军王帅樊伟丽陆许可穆敏郭丽雪叶武威喻树迅
- 关键词：生育时期抗冷性生化特性
- 鉴定棉花萌发期抗冷性的方法
- 本发明公开了鉴定棉花萌发期抗冷性的方法。本发明所提供的方法，包括：检测棉花的子叶平展率，获得棉花的相对子叶平展率，根据棉花的相对子叶平展率鉴定或辅助鉴定棉花抗冷性，相对子叶平展率高的棉花的抗冷性高于相对子叶平展率低的棉花...
- 王俊娟叶武威王德龙陆许可阴祖军王帅樊伟莉穆敏郭丽雪
- 文献传递
- 酵母耐盐相关基因HAL1在棉花中的功能表达被引量：4
- 2016年
- 【目的】克隆酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)耐盐基因HAL1(halotolerance)并转化棉花,探究该基因在棉花中的功能,进一步探究酵母耐盐相关基因在高等植物中的具体功能。【方法】根据随NCBI核酸数据库中酵母耐盐基因HAL1的mRNA全长序列信息,利用RT-PCR技术从酿酒酵母AS2.375中克隆该基因。选择酶切位点XbaⅠ和SmaⅠ对表达载体pBI121::GFP进行双酶切,采用In-Fusion技术构建pBI 121-ScHAL1::GFP融合表达载体。以自发荧光较弱的陆地棉品种Y-2067、ZA-23、GZ-2的花粉为材料,用基因枪轰击棉花花粉进行瞬时表达研究。采用基因枪活体转化技术将外源基因表达载体pBI121-HAL1::GFP转化棉花盐敏感材料中s9612,获得T_0棉花转基因种子。用100mol·L^(-1)NaCl盐溶液对转基因T_0种子进行耐盐性发芽试验,并进行分子检测,对鉴定出的转基因植株进行叶盘耐盐性分析。【结果】从酿酒酵母As2.375中克隆耐盐基因ScHAL1,基因全长885 bP,共编码294个氨基酸。对其序列进行分析,发现HAL1蛋白中丝氨酸所占比例最大,整个蛋白呈碱性且带正电,属于亲水性蛋白。根据蛋白二级结构预测结果,推测该蛋白的结构功能域可能主要由无规则卷曲和β-折叠片构成。棉花花粉瞬时表达结果表明,转化HAL1后,3种陆地棉花粉的绿色荧光现象都明显增强,说明该基因可以在这3种陆地棉的花粉中表达。用100 mol·L^(-1)NaCl盐溶液对转基因棉花T_0种子和受体材料中s9612自交种进行胁迫,发现转基因种子萌发能力明显强于受体材料,表明HAL1可以提高种子耐盐性。根据基因核苦酸序列设计2对引物对T_0转基因棉花幼苗进行分子检测,将纯化后的PCR产物进行直接测序,测序结果证明转基因成功。对鉴定出的转基因植株进行叶盘耐盐性分析发现;在600 mol·L^(-1)NaCl和400 mol·L^(-1)NaCl盐胁迫下转基因植株叶盘叶绿素含量均高于对照植株,且在600 mol·L^(-1
- 穆敏舒娜王帅郭丽雪樊伟丽阴祖军王俊娟王德龙叶武威
- 关键词：酵母陆地棉分子检测
- 蛋白质GhDHN1在调控植物抗逆性中的应用
- 本发明公开了蛋白质GhDHN1在调控植物抗逆性中的应用。所述蛋白质GhDHN1为a1)或a2)或a3)：a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；a2)在序列表中序列2所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋...
- 王俊娟叶武威穆敏王帅陆许可陈修贵王德龙阴祖军樊伟莉郭丽雪王晓歌舒娜
- 文献传递
- 棉花耐盐相关基因GhVP的表达及功能分析被引量：4
- 2016年
- 为了研究Gh VP基因在棉花中的表达特性和功能,克隆了棉花Gh VP基因,构建p BI121-Gh VP∷GFP荧光表达载体,采用基因枪技术转化洋葱内表皮细胞,结果显示Gh VP基因编码蛋白定位于细胞质膜上。将构建的p BI121-Gh VP∷GFP荧光表达载体转化棉花花粉,花粉荧光明显增强,说明该基因可以在棉花中表达,为Gh VP基因可以在棉花中表达提供了依据,为培育棉花耐盐新材料奠定了基础。
- 赵小洁穆敏陆许可阴祖军王德龙王俊娟樊伟丽王帅叶武威
- 关键词：棉花GHVP亚细胞定位花粉
- 棉花脱水素GhDHN1的克隆及其表达被引量：14
- 2016年
- 【目的】通过对棉花脱水素基因结构特征及其在低温胁迫下表达模式进行分析,探讨脱水素在棉花响应低温过程中的功能,为棉花抗冷育种提供理论基础。【方法】以棉花抗冷品种豫2067为试验材料,根据棉花陆地棉基因组序列查找已知脱水素(dehydrin,Dhn)基因的CDS序列,利用Primer5软件设计引物,克隆该基因,并命名为GhDHN1;采用生物信息学方法分析其蛋白质性质、氨基酸含量特征、功能结构域、系统进化树;选择XbaⅠ和SmaⅠ酶切位点对植物表达载体p BI121::GFP进行双酶切,采用In-Fusion连接技术构建融合蛋白瞬时表达载体p BI121-GhDHN1::GFP;分析其在洋葱表皮细胞中的瞬时表达,进行亚细胞定位;利用抗冷材料豫2067在三叶期对低温处理(4℃,24 h)前后的叶片和根系进行转录组测序,筛选差异表达基因;在三叶期时分别对豫2067(抗冷品种)和衡棉3号(冷敏感品种)进行低温(4℃,24 h)处理,利用实时荧光定量方法分别比较根、茎、叶中GhDHN1表达量,对该基因在2个抗冷差异材料叶中的表达量进行比较;对豫2067进行不同时间低温(4℃)处理,分析GhDHN1在叶片和根中的动态表达模式。【结果】该基因全长为726 bp,开放阅读编码框为636 bp,编码211个氨基酸,预测分子量为23.79 k D,等电点为5.04,富含谷氨酸(26.10%)和赖氨酸(19.40%),不含色氨酸,半衰期为30 h,蛋白呈酸性,带负带荷,带负电荷的残基总数为60%;GhDHN1的二级结构α螺旋(Alpha helix)包含116个氨基酸残基,占54.98%,组成该蛋白的主体结构,无规则卷曲(Random coil)的氨基酸残基有87个;GhDHN1位于陆地棉D亚组第9染色体(Dt_chr9)上,在cDNA的259—348位置上含有一个长度为90 bp的内含子,2个外显子长度分别为258和378 bp;SMART和CDD分析表明该氨基酸序列含有2个保守的富含赖氨酸的K片段和1个保守的富含丝氨酸S片段,具有亲水素蛋白结构域pfam00257,表明该蛋白为K_2S型脱水素;�
- 王俊娟穆敏王帅陆许可陈修贵王德龙樊伟丽阴祖军郭丽雪叶武威喻树迅
- 关键词：棉花脱水素亚细胞定位低温胁迫实时荧光定量PCR
- 陆地棉GhLEA3基因及其在抗低温胁迫方面的应用
- 本发明涉及生物技术领域，具体公开了陆地棉GhLEA3基因及其在抗低温胁迫方面的应用。所述陆地棉GhLEA3基因编码一种与植物抗低温胁迫相关的蛋白质，是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)具有SEQ ID NO.1所示的氨基...
- 王俊娟叶武威陆许可阴祖军陈修贵王德龙王帅穆敏郭丽雪樊伟丽陈超
- 文献传递
- 酿酒酵母三个耐盐相关基因克隆及其在棉花中转化
- 盐渍化是限制植物生长和农作物产量的一个重要因素。棉花是盐碱地的先锋作物，是开发利用盐渍化土地的理想作物之一。通过基因工程和转基因技术提高棉花耐盐性已经成为当前棉花育种的一个迫切需求和重要方向。 相关研究表明，酿酒酵母(...
- 穆敏
- 关键词：棉花酿酒酵母盐胁迫基因克隆基因表达分子检测
- 文献传递
- 一种棉花子叶期抗冷鉴定方法
- 本发明涉及植物的抗冷性鉴定，具体提供一种棉花子叶期抗冷鉴定方法，其为将长势均匀的多株待测品系子叶期的健壮幼苗低温处理，再在正常温度下恢复生长，然后调查茎的状态和子叶受伤害情况，按标准判定冷害级别，计算待测品种抗冷指数，按...
- 王俊娟叶武威王德龙阴祖军穆敏王帅陆许可樊伟莉郭丽雪
- 蛋白质GhDHN1在调控植物抗逆性中的应用
- 本发明公开了蛋白质GhDHN1在调控植物抗逆性中的应用。所述蛋白质GhDHN1为a1)或a2)或a3)：a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；a2)在序列表中序列2所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋...
- 王俊娟叶武威穆敏王帅陆许可陈修贵王德龙阴祖军樊伟莉郭丽雪王晓歌舒娜
- 文献传递
