王鲲
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
- 供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 山羊血管紧张素转化酶2(ACE2)的克隆、抗体制备及分布定位
- 王鲲刘小倩肖航杨维维张源淑
- 血管紧张素转化酶2(ACE2)在LPS诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)不同程度炎症损伤中的保护作用
- 张瑜娟肖航刘小倩王换换王鲲张源淑
- ACE 2在奶牛乳腺中的表达定位及其抗炎性损伤作用的研究被引量：11
- 2017年
- 本研究旨在通过体内外试验,明确ACE 2在奶牛乳腺中的表达定位,并对其在高精料饲喂致内源性奶牛乳房炎中的抗损伤作用进行初步探讨。体外试验分别选用牛乳腺组织样品和牛乳腺上皮细胞(Mac-T细胞),RTPCR和Western blotting法检测ACE 2在奶牛乳腺组织中的mRNA和蛋白表达;免疫荧光法测定ACE 2蛋白在Mac-T细胞中的定位。体内试验,选用6头健康泌乳期荷斯坦奶牛,随机分为对照组和高精料饲喂组,饲喂20周后,活体采集乳腺组织及乳。测定乳中LPS含量、体细胞数及相关炎性指标;制作乳腺组织学切片;分析乳腺组织中ACE、AT1、ACE2、MasR mRNA表达水平,ELISA法检测Ang II、Ang1-7含量。体外试验结果表明,奶牛乳腺中ACE2在基因和蛋白水平上均有表达,细胞学定位在细胞的胞浆和胞膜。体内试验结果显示,高精料长期饲喂,奶牛乳中体细胞数和LPS含量均明显升高(P<0.01);乳中NAGase和AKP酶活力均显著高于正常对照组(P<0.05),MPO活力两组之间无明显差异;乳腺组织学表现出一定炎性损伤变化;其中Ang1-7含量显著增高(P<0.05),Ang II的含量显著降低(P<0.05);ACE、AT 1、ACE 2、MasR mRNA表达量均显著上升((P<0.05)),ACE2/ACE mRNA比值高于对照组。本研究首次证实奶牛乳腺组织中有ACE 2的存在。在高精料长期饲喂造成奶牛乳房炎性损伤时,乳腺组织中RAS处于激活状态,ACE/ACE2比例失衡,以ACE 2-Ang1-7-MasR轴的活力处于优势状态,即ACE 2的抗损伤作用占优势。ACE 2可能通过降解AngII,产生Ang1-7发挥抗损伤作用,对乳腺组织炎性损伤具有一定的保护作用。
- 刘小倩刘颖荣超王鲲肖航张源淑
- 关键词：抗损伤
- β-CM7干预对糖尿病大鼠心肌肾素-血管紧张素系统的影响及其保护机制被引量：1
- 2016年
- 本文旨在探究β-CM7对糖尿病大鼠心肌组织肾素-血管紧张素系统(Renin angiotensin system,RAS)的影响及其保护机制。32只雄性SD大鼠通过相应处理被分为正常对照组、模型对照组、胰岛素治疗组(3.7×10^(–8) mol/d)及β-CM7干预组(7.5×10^(–8) mol/d)。连续饲养30 d后,处死大鼠取心肌。β-CM7在干预糖尿病模型后,组织中AngⅡ含量显著降低,Ang1-7含量极显著升高;AT1受体和Mas受体mRNA表达均显著升高;ACE和ACE2的mRNA表达均显著升高,且酶活均显著升高。综上可得,β-CM7可以通过激活RAS的负性调节通路"ACE2-Ang1-7-Mas轴"显著抑制大鼠心肌ACE mRNA和蛋白的强表达,缓解AngⅡ对心肌组织的损伤,提示β-CM7抑制心肌损伤的作用可能与ACE/ACE2通路有关。
- 王鲲韩东宁张瑜娟荣超张源淑
- 关键词：糖尿病大鼠心肌RAS系统
- 真核表达质粒pcDNA.3.1(+)-ACE2的构建及其在CHO细胞中的表达被引量：4
- 2018年
- 为了构建pcDNA.3.1（＋）-血管紧张素转化酶2（ACE2）真核表达质粒并检测在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中的表达,从羊肾脏中提取总RNA,经RT-PCR扩增出ACE2基因,后将其与pcDNA3.1载体进行连接重组,构建pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,经HindⅢ、XhoⅠ限制性内切酶双酶切及DNA序列测序分析等方法验证后,通过Lipofectamine 3000脂质体介导转染至CHO细胞,Western blot法检验ACE2基因在蛋白质水平上的表达。结果显示：RT-PCR扩增出大小约为2 200 bp特异ACE2基因片段,连接获得的pcDNA3.1（＋）-ACE2重组体经HindⅢ、XhoⅠ酶切后分别出现约2 200 bp和5 000 bp片段,测序分析与Gen Bank上公布的结果完全一致,表明成功克隆了重组pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,Western blot检测显示该pcDNA3.1（＋）-ACE2能在CHO细胞中表达。本研究成功构建了pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,并证实其能在CHO中表达,为后续探究ACE2蛋白活性及其作用的研究奠定了基础。
- 肖航王凯王换换王鲲张源淑
- 关键词：真核表达质粒转染CHO细胞
- 血管紧张素转化酶2(ACE2)在小鼠乳腺中的表达定位及在LPS诱导的乳腺炎症损伤中的作用及其机制
- 血管紧张素转化酶2(Angiotensin Converting Enzyme 2,ACE2)是新发现的肾素-血管紧张素系统(RAS)中ACE的同源物,其在心肌损伤、糖尿病肾损伤、肝脏纤维化及SARS引起的肺损伤等病理过...
- 王鲲刘小倩肖航王凯刘颖张源淑
