乔永峰
- 作品数:22 被引量:56H指数:4
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- 猪源伪狂犬病病毒AH02LA株糖蛋白的基因序列测定与对比分析被引量:3
- 2017年
- 为了分析猪源伪狂犬病病毒AH02LA株糖蛋白的基因序列特征,本研究设计了17对特异性引物,通过PCR扩增AH02LA株的11个糖蛋白基因并进行序列测定,然后将其与PRV变异株(TJ株与HeN1株)和PRV经典株(Bartha株与Kaplan株)作比对分析。结果:成功扩增了11个糖蛋白基因序列,序列比对发现,AH02LA株的gB、gD、gG、gK和gM基因与PRV变异株的同源性为100%,而与PRV经典株的同源性为98%~99%;AH02LA株的gC、gE和gI基因与PRV变异株的同源性为99%,而与经典株的同源性为95%~97%,而且AH02LA株的gB、gC、gD、gE、gI和gN基因的插入或缺失也与变异株完全一致。研究表明,AH02LA株的主要糖蛋白基因序列与变异株高度同源,该毒株是一株典型的变异株。
- 许梦微王义伟乔永峰王志胜刘娅梅侯继波王继春
- 关键词:伪狂犬病毒变异株糖蛋白
- 伪狂犬病病毒LA-A株、构建方法及其应用
- 本发明提供伪狂犬病病毒LA-A株、构建方法及其应用,属于动物医学的疫苗领域。伪狂犬病病毒株LA-A株,是敲除伪狂犬病病毒AH02LA株gE基因后获得的,所述伪狂犬病病毒AH02LA株的保藏登记号为:CGMCC No.10...
- 王继春郭容利乔永峰顾一奇柳畅许梦微王志胜刘芳侯继波
- 猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗(LA-A株)的最小免疫剂量和制品保存期的研究被引量:1
- 2020年
- 本研究将伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株(PRV AH02LA株)的gE基因缺失株(LA-A株)接种BHK-21细胞,经纯悬浮培养制备抗原,甲醛灭活后制备油乳剂灭活疫苗,并确定该灭活疫苗的最小免疫剂量和效力检验方法,以及在2~8℃保存期。结果显示:猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗(LA-A株)的效力检验方法为以2.0 mL(抗原含量108.20TCID50)接种4~5周龄PRV阴性健康仔猪,颈部肌肉注射,间隔28 d以相同剂量和方法加强免疫,加强免疫后第21 d,免疫猪血清PRV抗体中和指数应不低于10000,攻毒保护率应不低于80%;最小免疫剂量为1.0 mL(抗原含量107.90 TCID50);制品保存期:在2~8℃保存期为18个月。该研究结果为新型疫苗的研制提供了重要的试验依据。
- 乔永峰郭容利郭容利刘娅梅刘娅梅郑亚婷许梦微王志胜张传健侯继波王志胜王继春
- 关键词:猪伪狂犬病灭活疫苗最小免疫剂量保存期
- 一种新型火鸡疱疹病毒细菌人工染色体的构建与鉴定被引量:2
- 2016年
- 拟构建一种新型火鸡疱疹病毒(HVT)全基因组细菌人工染色体(BAC),通过同源重组方法将mini-F载体插入HVT基因组的糖蛋白C(glycoprotein C,gC)基因的等位位点得到mini-F重组HVT,提取重组病毒的DNA转入大肠杆菌DH10B细胞,再转入GS1783细胞获得BAC,拯救病毒获得mini-F重组病毒和gC恢复病毒后,与亲本病毒(HVT FC126)比较生长动力学和对鸡马立克病的免疫效力。结果:获得数个BAC阳性克隆,取其中一个克隆(BAC^(HVT-G))成功拯救出HVT mini-F重组病毒(HVT^(BAC-ΔgC)),并成功获得了gC恢复毒株(HVT^(BAC-gC-R))。生长特性和免疫效力试验表明HVT^(BAC-gC-R)与HVT FC126无显著差异,而HVT^(BAC-ΔgC)增殖能力和免疫效力均明显下降。成功构建了HVT全基因组的感染性BAC;HVT的gC基因是一个非必需基因,但对病毒的增殖能力和免疫效力有重要影响。
- 王志胜刘芳许梦微乔永峰侯继波王继春
- 关键词:火鸡疱疹病毒细菌人工染色体生长动力学免疫效力
- 伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株及其应用
- 本发明提供伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株及其应用,属于动物医学的疫苗领域。伪狂犬病病毒LA1206‑80株,保藏编号为:CGMCC No.14329。本发明还提供伪狂犬病病毒双基因缺失弱毒株在制备伪狂犬病疫苗中的应用、一种...
- 王继春宋增财郭容利乔永峰王志胜许梦微刘娅梅郑亚婷范红杰侯继波
- 一种新型火鸡疱疹病毒的细菌人工染色体、构建方法与应用
- 本发明提供一种新型火鸡疱疹病毒的细菌人工染色体、构建方法与应用,涉及动物医学领域。所述细菌人工染色体,是将HVT基因组中的gC基因敲除,并替换为mini‑F质粒序列。所述细菌人工染色体的构建方法:扩增HVT基因组中gC基...
- 王继春王志胜许梦微刘芳乔永峰刘娅梅侯继波
- 文献传递
- 重组鸭病毒性肠炎病毒、制备方法和应用
- 本发明提供重组鸭病毒性肠炎病毒、制备方法和应用,属于动物医学的疫苗领域。本发明禽流感病毒血凝素基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1的第1437至3131位核苷酸。本发明重组鸭病毒性肠炎病毒,是在鸭病毒性肠炎病毒基因...
- 王继春许梦微王志胜乔永峰侯继波
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒基因工程弱毒疫苗株及其应用
- 本发明提供伪狂犬病病毒基因工程弱毒疫苗株及其应用,属于动物医学疫苗领域。所述疫苗株,是将伪狂犬病病毒Bartha K61株基因组中的gC基因替换为伪狂犬病病毒AH02LA株的gC基因、gD基因替换为伪狂犬病病毒AH02L...
- 王继春刘娅梅张传健陈赛赛乔永峰呙明鹏王志胜许梦微郑亚婷郭容利侯继波
- 文献传递
- 表达禽流感病毒H5亚型基因重组鸭瘟病毒的构建被引量:1
- 2015年
- 为了应用和发展鸭肠炎病毒(DEV)载体疫苗,基于细菌人工染色体(BAC)人工合成带有p MCMV IE启动子和HA基因序列的表达盒,将其插入到UL55和LORF11之间的非编码区,从而构建出DEV载体疫苗。RFLP分析结果显示DEV BAC及其突变体条带与预期结果存在轻微的差异,将BAC及其突变体拯救后发现其生长性能与亲本病毒没有显著差异。间接免疫荧光和Western blot结果显示,载体疫苗在感染鸡胚成纤维细胞(CEF)后大量表达了HA蛋白质。表明成功构建了能稳定表达禽流感病毒H5亚型基因重组鸭瘟病毒。
- 许梦微王志胜乔永峰顾一奇柳畅侯继波姜平王继春
- 关键词:细菌人工染色体HA基因
- 猪伪狂犬病病毒AH02LA株的分离鉴定及其对仔猪致病性研究被引量:12
- 2016年
- 从安徽六安某爆发伪狂犬病猪场送检的流产仔猪脑组织样品中分离获得1株病毒,经鉴定为伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV),命名为PRV AH02LA株。PRV AH02LA株的糖蛋白g D和g I基因序列与2011年以来我国分离的变异株同源性最高(99.5%~100%),而与其他毒株同源性低。该分离株在BHK21细胞上增殖能力强,最高滴度达到109.0TCID50/m L。该分离株对4~5周龄和9~10周龄的PRV阴性猪能引起100%发病和死亡。临床上4~5周龄猪有严重的神经症状,也有明显的呼吸道症状;而9~10周龄猪主要表现呼吸道症状。说明本研究分离获得的PRV AH02LA是一株伪狂犬病毒变异株,其对仔猪的致病力较强。
- 乔永峰顾一奇柳畅呙荣兵许梦微王志胜刘娅梅郭容利刘芳侯继波王继春
- 关键词:伪狂犬病病毒变异株糖蛋白D