许梦微
- 作品数：37 被引量：33H指数：3
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 应用荧光定量PCR方法检测伪狂犬病病毒弱毒株在猪体组织中的分布
- 2023年
- 为了解伪狂犬病病毒(PRV)TK/PK/gE三基因缺失弱毒株在猪体组织中的分布情况,针对PRV gB基因保守区设计并合成1对特异性引物,建立并优化了一种可快速、定量检测PRV的SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR方法。该检测方法特异性强且敏感度高,最低检测浓度为10^(1)拷贝/μL。PRV TK/PK/gE三基因缺失弱毒株免疫仔猪后可少量存在于大脑、小脑、肝脏、脾脏、肺脏、扁桃体和颌下淋巴结中,部分仔猪鼻甲骨病毒含量较高。应用本研究建立的荧光定量PCR方法阳性检出率为79.2%,而常规PCR方法阳性检出率仅为45.8%。结果表明,本研究建立的荧光定量PCR方法为了解弱毒株在猪体的分布提供了快速、敏感的检测手段。PRV TK/PK/gE三基因缺失弱毒株在猪组织中的分布情况为进一步揭示其组织嗜性、安全性和免疫机制提供了数据。
- 许梦微朱来旭陈赛赛张传健张传健郑亚婷王志胜童玲曹瑞兵刘娅梅
- 关键词：伪狂犬病病毒
- 几株伪狂犬病病毒的增殖特性与保存条件被引量：1
- 2020年
- 高滴度的抗原是制备优质疫苗的首要条件。对6株伪狂犬病病毒在仓鼠肾(baby hamster kidney,简称BHK)细胞和猪睾丸细胞(swine testicular,简称ST)细胞上的增殖效率进行了比较,同时测定不同保存温度和冻融条件对病毒滴度的影响。结果表明,几株伪狂犬病病毒在BHK细胞和ST细胞上增殖效率均很高,可达到生产要求。相较于ST细胞,各毒株在BHK细胞上出现病变时间更早。然而,所有毒株在ST细胞上的病毒滴度都高于同期在BHK细胞上的滴度。强毒株AH02LA株在2种细胞上滴度可达108.0 TCID 50/0.1 mL以上,表现为发生病变早,病毒增殖快,峰值到来早的特性。通过强毒株AH02LA株获得的基因缺失株LA-A株和自然传代缺失致弱株LA2017株峰值均达108.0 TCID 50/0.1 mL,展现出优良疫苗株的潜质。保存条件试验表明,PRV在-70℃保存30 d和4℃保存12 d内滴度相对稳定,而-20℃保存的病毒滴度下降明显。多次冻融后,滴度有所下降,相较于-70℃,-20℃条件下冻融病毒滴度下降更为显著,建议避免多次冻融。本试验结果可为PRV疫苗抗原在实际生产中制备与保存提供科学依据。
- 陈赛赛郑亚婷郭容利王志胜王志胜刘娅梅许梦微王彩楠刘娅梅
- 关键词：伪狂犬病病毒冻融
- 用于检测PCV2的融合蛋白、制备方法及应用
- 本发明提供用于检测PCV2的融合蛋白、制备方法及应用，涉及PCV2病毒防治诊断领域。所述融合蛋白，是将抗人红细胞H抗原纳米抗体和抗PCV2纳米抗体通过Linker序列连接而成。本发明还要求保护所述融合蛋白的编码基因，含有...
- 王义伟徐海许梦微侯继波
- 文献传递
- 猪源伪狂犬病病毒传代致弱LA2017株的安全性和免疫效力研究被引量：4
- 2020年
- 为检测猪源伪狂犬病病毒变异株AH02LA株作为疫苗后选株的安全性及免疫效力。本研究对4日龄初生仔猪和产前1个月妊娠母猪免疫LA2017株后的安全性、28~35日龄仔猪免疫效力以及免疫猪后排毒和同群传播性进行了研究。结果显示:滴鼻接种4日龄仔猪和肌肉注射产前1个月的妊娠母猪,均无任何临床症状,表明该疫苗株具有良好的安全性;肌肉注射接种28~35日龄的仔猪,免疫后7 d产生对PRV变异株AH02LA的完全保护并且可以阻止排毒,免疫14 d后攻毒均未发病和排毒,而PRV Bartha K61株免疫猪后7 d攻毒,有4头猪出现了体温升高,鼻拭子样品均检出病毒,免疫后14 d和21 d时对试验猪攻毒,PRV Bartha K61株免疫组均有猪发病,且鼻拭子样品均检出病毒;在抗体产生水平方面,PRV LA2017株免疫后14 d产生高水平中和抗体,PRV中和指数抗体≥10 000,且维持至免疫后5个月,而Batha-K61组免疫后1个月至3个月针对PRV变异株AH02LA的中和指数仅为178~1000,且4个月就开始下降;在同群感染方面,PRV LA2017株肌肉注射接种28~35日龄仔猪后14 d内均未从鼻拭子和肛门拭子检出排毒,gB抗体全部转为阳性,同群非免疫接种猪PRV gB和gE的ELISA抗体均为阴性,表明PRV LA2017株安全性好,无横向传播,不引起同群感染。结果表明,PRV LA2017株作为疫苗株对猪伪狂犬变异株的保护效果显著优于Bartha K61株,该毒株安全性好、抗体水平高和持续时间长,是一株极具开发价值的猪伪狂犬病流行株的弱毒疫苗候选株。
- 王志胜刘名江刘名江乔永峰乔永峰郑亚婷许梦微郭容利张传健许梦微王继春
- 关键词：猪伪狂犬病病毒安全性
- 伪狂犬病病毒传代致弱毒株及其应用
- 本发明提供伪狂犬病病毒传代致弱毒株及其应用，属于动物医学的疫苗领域。该伪狂犬病病毒传代致弱毒株，是伪狂犬病病毒LA2017株，保藏编号为CGMCC No.18170。本发明还提供所述伪狂犬病病毒传代致弱毒株在制备伪狂犬病...
- 王继春陈赛赛郭容利乔永峰王志胜许梦微郑亚婷刘娅梅张传健吕家轩
- 猪流行性腹泻病毒伪狂犬病病毒载体重组病毒、制备方法及其应用
- 本发明提供猪流行性腹泻病毒伪狂犬病病毒载体重组病毒、制备方法及其应用，属于动物医学的疫苗领域。猪流行性腹泻病毒伪狂犬病病毒载体重组病毒，是在伪狂犬病病毒基因组中UL40与UL41之间非编码区插入PEDV S蛋白基因表达盒...
- 王继春张传健郭仕琦郭容利陈赛赛王志胜许梦微郑亚婷刘娅梅
- 文献传递
- 猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗(LA-A株)的最小免疫剂量和制品保存期的研究
- 本研究采用伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株(PRV AH02LA 株)的gE 基因缺失株(LA-A 株)接种BHK-21 细胞,经纯悬浮培养制备抗原,经甲醛灭活后制备油乳剂灭活疫苗,检测...
- 乔永峰郭容利宋增财刘娅梅许梦微郑亚婷陈赛赛王志胜张传健侯继波范红结王继春
- 关键词：猪伪狂犬病变异株灭活疫苗最小免疫剂量保存期
- 伪狂犬病病毒US3基因编码丝/苏氨酸蛋白激酶功能的研究进展被引量：1
- 2021年
- 伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)属于甲型疱疹病毒亚科水痘病毒属,其基因组约为150 kb,可分为独特长区、内部重复序列、独特短区以及末端重复序列。PRV US3基因位于其基因组的独特短区,属于复制非必须基因,是病毒的重要毒力基因,编码产物是丝/苏氨酸激酶。US3基因编码蛋白是一种多功能蛋白,可参与PRV逃避宿主免疫清除,抑制病毒介导的细胞凋亡,影响病毒粒子在细胞核质中的运输,调动感染细胞肌动蛋白骨架重排,诱导宿主细胞形态改变进而增强PRV在细胞中的传播能力,在病毒生命周期的多个阶段发挥作用。本文综述了PRV US3编码蛋白功能的研究进展,为PRV致病机制的研究提供了参考。
- 郭仕琦许梦微王志胜何青王继春王继春
- 关键词：伪狂犬病病毒编码蛋白
- 猪伪狂犬病毒AH02LA株糖蛋白的基因序列分析
- 为了分析猪伪狂犬病毒新型变异株AH02LA 糖蛋白的基因序列特征,本研究设计了16 对特异性引物,通过PCR 扩增AH02LA 株的11 种糖蛋白基因序列,将其与GenBank 收录的PRV 经典株Bartha(JF79...
- 许梦微乔永峰顾一奇柳畅王志胜刘娅梅侯继波王继春
- 关键词：伪狂犬病毒糖蛋白毒力
- 表达禽流感病毒H5亚型基因重组鸭瘟病毒的构建被引量：1
- 2015年
- 为了应用和发展鸭肠炎病毒(DEV)载体疫苗,基于细菌人工染色体(BAC)人工合成带有p MCMV IE启动子和HA基因序列的表达盒,将其插入到UL55和LORF11之间的非编码区,从而构建出DEV载体疫苗。RFLP分析结果显示DEV BAC及其突变体条带与预期结果存在轻微的差异,将BAC及其突变体拯救后发现其生长性能与亲本病毒没有显著差异。间接免疫荧光和Western blot结果显示,载体疫苗在感染鸡胚成纤维细胞(CEF)后大量表达了HA蛋白质。表明成功构建了能稳定表达禽流感病毒H5亚型基因重组鸭瘟病毒。
- 许梦微王志胜乔永峰顾一奇柳畅侯继波姜平王继春
- 关键词：细菌人工染色体HA基因
