王旭东
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NSCLC EGFR-TKIs获得性耐药:相关进展及我们的初步工作
- 陈正堂江飞龙韩静赵凤仪王江王旭东
- YAP1在人肺腺癌细胞厄洛替尼耐药中的作用被引量：5
- 2016年
- 目的探讨Yes相关蛋白1(YAP1)基因在肺腺癌耐厄洛替尼(ER)中的作用及可能机制。方法在PC-9细胞与耐ER PC-9细胞(PC-9/ER)中,实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测YAP1 mRNA表达;Western印迹与间接免疫荧光分别检测YAP1蛋白表达与定位。以YAP1抑制剂维替泊芬(VP)作用PC-9/ER细胞后,比较处理前后YAP1 mRNA和蛋白表达改变、Yap1下游AKT、p-AKT分子表达变化、Cell Counting Kit 8(CCK-8)法计算PC-9/ER耐药指数改变。结果 PC-9/ER耐药指数为99.80±25.81;与PC-9细胞相比较,YAP1 mRNA和YAP1蛋白在PC-9/ER中表达增高;VP抑制效率为(50.96±5.86)%,同时下调了下游AKT、p-AKT蛋白的表达;PC-9/ER细胞的ER半数抑制浓度(IC50)由(11.10±2.72)降低为(1.47±0.32)μmol/L(P=0.024),耐药指数降为原来的1/8。结论 YAP1介导耐ER肺腺癌的作用机制可能是通过PI3K/AKT信号通路,YAP1可能成为肺癌治疗的靶标。
- 王江王旭东赵凤仪韩静孙华科孙建国陈正堂
- 关键词：维替泊芬肺腺癌厄洛替尼耐药靶向治疗
- Rab25在非小细胞肺癌厄洛替尼获得性耐药中的作用被引量：2
- 2016年
- 目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)厄洛替尼获得性耐药中的作用。方法传代培养PC9及其厄洛替尼耐药PC9/ER细胞,采用CCK-8法检测PC9/ER细胞的耐药指数。应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,q PCR)及Western blot检测对比同等厄洛替尼浓度(0.1、0.2、0.3μmol/L)处理条件下,Rab25在两种细胞中的mRNA及蛋白表达差异,并以免疫荧光法定位Rab25在细胞中的分布。用小干扰RNA(siRab25)转染PC9/ER细胞,并以流式细胞仪及CCK-8法分别检测Rab25敲减后PC9/ER细胞的增殖指数(proliferation index,PI)及厄洛替尼IC50值的变化。结果 PC9/ER细胞的耐药指数是68.82±21.42。相同厄洛替尼浓度处理48 h后,PC9/ER细胞Rab25 mRNA及蛋白水平均高于PC9细胞(P<0.05),增高的Rab25蛋白主要表达于细胞膜。而且PC9/ER细胞Rab25蛋白水平随厄洛替尼处理浓度(0.1、0.2、0.3μmol/L)递增而增高。siRab25在PC9/ER细胞中成功转染后,转染组的厄洛替尼IC50值及PI均明显低于对照组(P<0.05)。结论Rab25在NSCLC厄洛替尼获得性耐药细胞中高表达,起着促进耐药的作用。
- 王旭东王江赵凤仪韩静孙建国陈正堂
- 关键词：RAB25非小细胞肺癌厄洛替尼
