王孝庆
- 作品数：6 被引量：25H指数：3
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 1岁以下小儿围术期早期死亡风险因素流行病学调查
- 2016年
- 目的:研究1岁以下小儿围术期早期(≤3 d)死亡相关风险因素的临床流行病学特征。方法:遴选2011年至2013年温州医科大学附属第二医院76例新生儿及婴儿手术后死亡病例的临床资料,对其性别、出生孕周、年龄、出生体质量、术前体质量、术前是否存在合并症(心血管、呼吸、血液、肝肾等疾病)、术前意识状态、电解质紊乱情况、营养情况、美国麻醉医师协会(ASA)分级、手术部位、手术类型、手术持续时间、手术分级共15项可能的风险因素进行回顾性分析及统计学处理。结果:对新生儿及婴儿的出生体质量、术前合并呼吸系统疾病、ASA分级、意识状态与死亡时间行spearman秩相关分析,结果P值均小于0.05。以上4种风险因素经logistic逐步回归分析,只有术前合并呼吸系统疾病及麻醉ASA分级2个风险因素保留。受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,与新生儿及婴儿围术期早期(≤3 d)死亡时间高度相关的风险因素是术前合并呼吸系统疾病(ROC曲线下面积为0.643)和麻醉ASA分级(ROC曲线下面积为0.694)。结论:术前合并呼吸系统疾病和麻醉ASA分级是新生儿及婴儿围术期早期死亡的有效预测因子,且ASA分级相对预测作用更强。
- 孔微微王孝庆王中苏万梦娇解康杰谢作楷上官王宁连庆泉李军
- 关键词：新生儿婴儿围术期死亡
- RNA干扰高迁移率族蛋白1对Aβ25-35刺激HT22细胞中晚期糖基化终末产物受体/Toll样受体4信号通路相关蛋白表达的影响被引量：5
- 2019年
- 目的研究RNA干扰高迁移率族蛋白1(HMGB1)对β淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)刺激HT22细胞HMGB1、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、Tol样受体4(TLR4)、NF-κB、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等蛋白表达的影响。方法 Aβ25-350,2.5,5,10,20和40μmol·L-1作用HT22细胞24 h后,MTT法检测细胞存活,计算半数抑制浓度(IC50)。将对数生长期的HT22细胞分为5组:正常细胞对照组、Aβ25-3540μmol·L-1组、小干扰RNA(siRNA)50μmol·L-1组、siRNA或scramble siRNA+Aβ25-35组(HT22细胞转染si RNA或scramble si RNA 50μmol·L-1作用24 h后,再加入终浓度为40μmol·L-1人工合成的Aβ25-35处理24 h),显微镜观察细胞形态变化,免疫荧光检测HMGB1在细胞中位置的改变,Western印迹法检测细胞内HMGB1,RAGE,TLR4和NF-κB P65的表达,ELISA法检测细胞上清液中IL-1β和TNF-α的水平。结果Aβ25-35作用HT22细胞24 h,IC50为41.17μmol·L-1。后续采用Aβ25-3540μmol·L-1进行实验。Aβ25-3540μmol·L-1作用24 h后,细胞大量死亡,聚集成团,突起减少,细胞间隙增大,且HMGB1从核内转移至核外。细胞内的HMGB1,RAGE,TLR4和NF-κB P65表达均显著升高(P<0.05),细胞上清液中IL-1β和TNF-α的水平显著升高(P<0.05);经siRNA 50μmol·L-1处理24 h,可显著降低细胞内HMGB1,RAGE,TLR4和NF-κB P65的表达(P<0.05)及细胞上清液中IL-1β和TNF-α的水平(P<0.05)。结论 RNA干扰HMGB1可减少Aβ25-35刺激HT22细胞HMGB1,RAGE,TLR4和NF-κB P65的表达。
- 韩园刘煜戈文威王孝庆曹红李军
- 关键词：小干扰RNA高迁移率族蛋白1Β淀粉样蛋白
- 依托孕烯对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响
- 2016年
- 目的 建立大鼠阿尔茨海默病（AD）模型,观察背侧海马注射依托孕烯对AD大鼠学习记忆能力、海马γ-氨基丁酸（GABA）A受体α1亚基（GABAAα1）及γ-氨基丁酸转运蛋白-1（GAT-1）表达的影响.方法 雄性SD大鼠36只,体重230～270 g,双侧基底核各注射IBO 8 μg建立AD模型,成模后随机分为4组（n=9）：假手术组（Sham组）、溶剂对照组（Con组）、依托孕烯组（ENG组）、GABAA受体拮抗剂组（BIC组）.术后1周行连续6d的Morris水迷宫定位航行实验检测大鼠学习记忆能力,Con、ENG、BIC组在测试第1、2d后2h内背侧海马给予相应药物,BIC组在ENG海马给药前30 min腹腔注射8 mg/kg荷包牡丹碱.免疫组织化学法（n=6）和Western blot法（n=3）检测各组海马CA1/3区GABAAα1及GAT-1的表达.结果 分别与Sham组及Con组比较,ENG组及BIC组大鼠平均逃避潜伏期（AEL）均明显缩短（P＜0.05）,海马CA1/3区GABAAα1阳性细胞数均显著减少[CA1：（5.9±0.7）、（6.6±1.0）个比（3.7±0.8）、（3.1±0.4）个;CA3：（5.9 ±1.3）、（6.2±0.6）个比（3.8±0.6）、（2.8±0.6）个,P＜0.01],CA3区GAT-1阳性细胞均显著减少[（23.7±2.3）、（23.0±1.7）个比（18.3±1.8）、（17.6±2.4）个,P＜0.01],海马GABAAα1（P＜0.05）和GAT-1（1.7±0.5、1.7±0.4比0.9±0.4、0.5±0.2,P＜0.01）蛋白表达水平均明显降低.4组间CA1区GAT-1阳性细胞数差异无统计学意义（P＞0.05）;ENG组和BIC组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 依托孕烯可显著改善AD大鼠学习记忆能力,其机制与调节GABA受体水平的表达有关,其中GABAAα1及GAT-1可能参与其中记忆功能的调节作用.
- 祁旦巳王孝庆王中苏叶莉莎王斌曹红李军
- 关键词：阿尔茨海默病记忆Γ-氨基丁酸
- RNA干扰HMGB1表达在Aβ25-35损伤小鼠HT22细胞中的作用
- 目的： 目的：本实验采用人工合成的Aβ25-35处理小鼠海马神经元（HT22细胞）24h作为AD模型，采用MTT法来检测细胞活力，同时运用RNAi技术干扰靶基因HMGB1的表达，研究干扰HMGB1对NF-κB信号转导通...
- 王孝庆
- 关键词：Β-淀粉样蛋白高迁移率族蛋白1细胞损伤
- 文献传递
- 姜黄素抑制β淀粉样蛋白致小胶质瘤细胞神经炎症反应被引量：5
- 2017年
- 目的:采用β-淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))致小鼠小胶质瘤细胞(BV2细胞)炎症建立阿尔茨海默病(AD)模型,观察高迁移率族蛋白1(HMGB1)与糖基化终末产物受体(RAGE)介导炎症反应的关系,并探讨姜黄素(Cur)对BV2细胞活力、HMGB1、RAGE、IL-1β、TNF-α、NF-κB表达的影响。方法:将对数生长期的BV2细胞分为4组。对照组:不做任何处理;Aβ_(25-35)模型组:40μmol/L Aβ_(25-35)刺激24 h;Aβ_(25-35)+RAGE受体阻断组:抗RAGE抗体10μmol/L预处理1 h后,加入40μmol/L Aβ_(25-35)刺激24 h;Aβ_(25-35)+Cur治疗组:姜黄素10μmol/L预处理1 h后,加入40μmol/L Aβ_(25-35)刺激24 h。孵育24 h后行细胞形态学观察,CCK8检测细胞活性,Western blot法检测细胞HMGB1、NF-κB、RAGE蛋白的表达情况,ELISA法检测上清液HMGB1、IL-1β、TNF-α的含量。结果:与对照组相比,Aβ_(25-35)模型组、Aβ_(25-35)+RAGE受体阻断组细胞活力明显下降,胞内HMGB1表达明显升高(P<0.05),总NF-κB表达增加(P<0.05),上清液中IL-1β和TNF-α含量升高(P<0.05)。与Aβ_(25-35)模型组、Aβ_(25-35)+RAGE受体阻断组相比,Aβ_(25-35)+Cur治疗组细胞内HMGB1、RAGE、NF-κB表达明显下降(P<0.05),上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α含量明显下降(P<0.05)。结论:姜黄素可减轻Aβ_(25-35)引起的BV2细胞炎症反应,其机制与抑制HMGB1表达及核外释放、抑制NF-κB通路有关,与RAGE表达下调部分相关。
- 张旭彤王孝庆王中苏张英曹红李军
- 关键词：姜黄素淀粉样Β蛋白BV2细胞高迁移率族蛋白质类糖基化终末产物受体
- 姜黄素减弱Aβ_(25-35)致大鼠原代小胶质细胞的神经炎症反应被引量：16
- 2016年
- 目的:研究姜黄素(Cur)对β-淀粉样蛋白(Aβ)刺激下大鼠原代小胶质细胞活力及高迁移率族蛋白1(HMGB1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:取新生SD大鼠大脑皮层行混合胶质细胞原代培养,摇床振摇法分离小胶质细胞并行Iba-1免疫细胞化学鉴定。在培养的小胶质细胞中加入Aβ_(25-35)作用24 h后,观察细胞形态并用CCK-8实验确定造模浓度及Cur的治疗浓度。将大鼠原代小胶质细胞分为5组:正常组、Aβ_(25-35)模型组、Cur组、Aβ_(25-35)+Cur治疗组、Aβ_(25-35)+DMSO组;用Western blot法检测细胞内HMGB1、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、NF-κB的表达情况,取上清液用ELISA检测HMGB1、IL-1β、TNF-α的表达。结果:Iba-1的阳性率在95%以上,培养的大鼠原代小胶质细胞可用于实验。Western blot实验结果示Aβ_(25-35)活化诱导后,细胞内的HMGB1、RAGE和NF-κB表达明显升高(P<0.05),加入姜黄素后细胞内的HMGB1、RAGE和NF-κB表达明显减少(P<0.05)。ELISA结果示Aβ_(25-35)活化诱导后,细胞上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α明显升高(P<0.05),加入姜黄素后上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α明显下降(P<0.05)。结论:姜黄素可明显抑制Aβ_(25-35)刺激下大鼠原代小胶质细胞的神经炎症反应。
- 刘绪华王孝庆王中苏赵航钱小伟曹红李军
- 关键词：阿尔茨海默病姜黄素Β-淀粉样蛋白小胶质细胞高迁移率族蛋白1
