程霄翔 作品数:7 被引量:5 H指数:2 供职机构: 福建医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
小鼠囊胚滋养外胚层的形成与雌激素受体α 2015年 滋养外胚层由具有上皮细胞特性的桑葚胚外层细胞发育而来,为腔化以及囊胚顺利着床奠定重要基础。滋养外胚层的形成受一系列复杂的分子网络调控,包括上皮细胞特性建立和定向分化。雌激素受体α(ERα)是一种配体依赖型转录因子,广泛存在于许多细胞和组织中,参与调节生理代谢。有研究报道ERα与调控滋养外胚层形成的分子存在关联。本文旨在对小鼠滋养外胚层形成的分子调控机制进行概述。 程霄翔 王世鄂关键词:上皮细胞 分化 雌激素受体Α Pin1抑制剂对小鼠植入前胚体外发育的影响 被引量:1 2016年 目的观察Pin1在小鼠植入前胚中的定位分布及其抑制剂胡桃醌(Juglone)对小鼠植入前胚体外发育的影响。方法免疫荧光染色观察不同发育阶段植入前胚中Pin1的分布;收集小鼠1-细胞胚,以KSOM培养液为对照组,以培养液中添加有不同浓度的Juglone为实验组,观察各组1-细胞胚体外发育情况;Real-time PCR检测体外发育2-细胞胚内干细胞转录因子(Sox2、Oct4、c-Myc和Klf4)m RNA表达水平。结果小鼠不同发育阶段植入前胚中都存在Pin1的表达,胞质和胞核内均有分布,且核内荧光着色明显比胞质强;10μmol/L和25μmol/L胡桃醌持续作用93h(注射人绒毛膜促性腺激素后27h^120h)使1-细胞胚阻滞于2-细胞阶段,极少能过渡至4-细胞胚(P<0.01)。25μmol/L胡桃醌短时间作用18h(注射人绒毛膜促性腺激素后27~45h)同样使1-细胞胚发育阻滞于2-细胞胚(P<0.01);25μmol/L胡桃醌组2-细胞胚内Sox2 m RNA表达水平低于KSOM组(P<0.05),而Klf4、cMyc和Oct4 m RNA表达水平无明显变化(P>0.05)。结论小鼠1-细胞胚之后,Pin1主要定位在细胞核内,提示其可能参与细胞转录活动。且Pin1抑制剂(胡桃醌)能使2-细胞胚至4-细胞胚过渡率明显降低,并使干细胞转录因子Sox2 m RNA表达下调,提示Pin1在小鼠植入前胚早期发育阶段具有一定作用,其参与调控合子基因组激活与干细胞转录因子Sox2有关。 连秀丽 宋婵婵 贺琳 程霄翔 陈俊明 杜娟 刘玥 王世鄂关键词:PIN1 胡桃醌 实时定量聚合酶链反应 免疫荧光 小鼠 阻滞和非阻滞品系小鼠次级卵母细胞基因表达水平的比较 被引量:1 2016年 目的:通过基因芯片检测阻滞品系昆明(KM)小鼠和非阻滞品系B6C3F1小鼠次级卵母细胞(MⅡ卵)基因表达差异,探讨KM小鼠植入前胚体外发育阻滞是否与母源基因表达差异相关.方法:分别收集KM小鼠和B6C3F1小鼠MⅡ卵,运用基因芯片分析和real-time PCR验证,母源基因的差异表达.结果:基因芯片检测共筛出差异表达基因995个,其中B6C3F1小鼠MⅡ卵上调基因有793个;下调基因有202个.B6C3F1小鼠MⅡ卵表达上调的基因主要与调节基因转录、蛋白质合成与转运、氧化还原、生长因子等相关.结论:KM与B6C3F1小鼠植入前胚体外发育潜能不同可能与母源基因表达差异相关. 吕俊杰 逄丽丽 程霄翔 连秀丽 初晨凤 魏建恩 王世鄂关键词:基因表达 小鼠 雌激素受体α抑制剂MPP对小鼠合子型基因组激活的影响可能与S期启动相关 被引量:2 2015年 目的观察雌激素受体α(ERα)特异性抑制剂甲基哌啶吡唑(Methyl-Piperidino-Pyrazole,MPP)对小鼠早期胚胎发育的影响与合子型基因组激活(ZGA)发生的时间是否相关,并检测与小鼠ZGA密切相关的2-细胞胚DNA复制是否受MPP处理的影响,为进一步探讨ERα在小鼠ZGA过程中的作用机制提供实验基础。方法 1收集昆明小鼠1-细胞胚、2-细胞胚和4-细胞胚,以空白KSOM培养液(单纯型优化的胚胎培养基)为对照组,以KSOM中添加MPP为实验组;将各时间点收集的早胚培养3h后再移入新KSOM培养液中继续培养至囊胚阶段,并记录囊胚数;2收集昆明小鼠末期1-细胞胚,分别置于上述两组培养液中培养15h至2-细胞胚S期后期,用荧光显微镜技术检测2-细胞胚核像变化;Brd U标记法分析DNA复制情况。结果1于不同时间段经MPP 3h处理后,在1-细胞胚末期、2-细胞早期和2-细胞胚中后期,MPP处理对小鼠早胚发育具有显著的抑制作用,其阶段特异性影响与小鼠ZGA发生的时间一致。另外,MPP对2-细胞胚G1/S过渡期(36~39h)抑制明显,但是对S期中后期(39~42h)进程无显著影响。2与KSOM组相比,经MPP处理15h后,2-细胞胚核变圆;Brd U标记水平明显下降。结论MPP在小鼠早胚中的阶段性作用与ZGA有关;ERα可能通过促进S期启动来调控ZGA。 许颂华 程霄翔 宋婵婵 贺琳 刘玥 连秀丽 逄丽丽 王世鄂关键词:雌激素受体Α 抑制剂 小鼠 细胞周期 Pin1抑制剂对小鼠植入前胚体外发育及2-细胞胚内干细胞因子表达的影响 本研究旨在观察Pin1在小鼠植入前胚中的定位分布及其抑制剂Juglone对小鼠植入前胚体外发育及2-细胞胚内干细胞因子表达的影响,为进一步阐明Pin1在植入前胚中的作用机制提供理论依据.本实验利用免疫荧光法检测小鼠不同发... 连秀丽 宋婵婵 贺琳 程霄翔 陈俊明 杜娟 刘明 王世鄂ERα特异性抑制剂和激动剂对小鼠滋养外胚层分化的影响 目的:观察雌激素受体α(ERα)在小鼠早胚细胞系分化期间的定位分布及其特异性抑制剂(MPP)和激动剂(PPT)对小鼠8-细胞胚体外发育至囊胚的影响;探讨MPP和PPT对小鼠囊胚形成过程中与滋养外胚层和内细胞团细胞系分化相... 程霄翔关键词:雌激素受体Α MPP 囊胚 FGF10对小鼠植入前胚体外发育及2-细胞胚内G蛋白偶联受体30表达的影响 被引量:2 2016年 目的观察成纤维细胞生长因子10(FGF10)对小鼠受精卵体外发育和2-细胞胚内G蛋白偶联受体30(GPR30)水平的影响,为进一步探讨FGF10在小鼠植入前胚体外发育中的作用提供依据。方法以M16培养液为对照组,M16中分别添加不同浓度的FGF10为实验组,收集昆明(KM)雌性小鼠与KM雄性小鼠交配所得的受精卵,分别观察各组受精卵体外发育情况。收集KM小鼠受精卵,分别置于M16和含不同浓度FGF10的M16培养液中培养,获取体外发育的2-细胞胚,采用免疫荧光染色结合激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内GPR30水平。结果添加FGF10实验组发育到4-细胞胚、桑葚胚和囊胚的比率明显高于对照组,其中以添加浓度为10ng/ml的FGF10实验组的效果最明显。免疫荧光染色结果显示,10ng/ml的FGF10实验组体外发育2-细胞胚内GPR30免疫荧光染色强度明显高于对照组。结论 FGF10可促进KM小鼠植入前胚的体外发育,其作用可能与上调2-细胞胚内GPR30有关。 逄丽丽 刘玥 许颂华 程霄翔 连秀丽 徐渝婷 林凌 王世鄂关键词:成纤维细胞生长因子10 体外发育 小鼠