徐永芳
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：苏州大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一株鼠抗人PD-1单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的:制备鼠抗人PD-1单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法:以稳定表达人PD-1分子的基因转染细胞株L929/PD-1免疫BALB/c小鼠,采用流式细胞术筛选分泌鼠抗人PD-1单抗的杂交瘤细胞株。用Ig G亚型快速定性试纸法、肿瘤细胞株表面PD-1分子识别谱检测、抗体效价测定、竞争结合抑制实验和蛋白质印迹等方法对所获PD-1单抗的生物学特性进行分析鉴定。结果:获得1株持续稳定分泌PD-1单抗的杂交瘤细胞株,命名为6E1。单抗6E1的重链为Ig G1、轻链为κ。单抗6E1对肿瘤细胞株U937、Thp-1、Jurkat细胞表面PD-1分子的识别谱与商品化PD-1单抗MIH4一致。单抗6E1与商品化抗体MIH4具有相似的识别位点。蛋白质印迹检测结果表明单抗6E1可特异性识别PD-1分子。结论:成功获得了1株鼠抗人PD-1单克隆抗体。
- 曹莎莎徐永芳郑小翠葛彦居颂文居颂光
- 关键词：PD-1PD-L1单克隆抗体
- DSS诱导小鼠炎性肠病模型的建立及其病理机制的探讨
- 炎症性肠病（Inflammatory bowel diseases,IBD)是以肠道炎症和组织损伤为特征的慢性疾病，主要分为克罗恩病（Crohn’s disease,CD）和溃疡性结肠炎（ulcerative colit...
- 徐永芳
- 关键词：炎性细胞因子病理机制
- 葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠肠炎模型中炎性因子的变化被引量：1
- 2017年
- 目的 通过建立葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠肠炎模型,观察其炎性因子变化规律.方法 选用C57BL/6雄性小鼠,随机分为DSS组与对照组,DSS组给予3%的DSS溶液自由饮用7d,对照组自由饮水.每天观察小鼠体重、便血、腹泻情况并进行DAI评分;于7d时处死小鼠,观察小鼠肠道形态学的变化;通过组织病理学技术分析肠绒毛长度、肠隐窝数量的变化;通过流式细胞微球芯片捕获技术检测小鼠血清中炎性细胞因子水平的变化.结果 与对照组比较,DSS组小鼠出现明显的体重下降、便血、腹泻等症状,活动度及精神状态变差,DAI评分升高;小鼠肠道充血严重、大肠明显缩短;组织病理切片显示小鼠结肠隐窝结构破坏、减少、绒毛断裂、可见大量的炎性细胞浸润;小鼠血清中促炎性细胞因子IL-6、TNF-α上升,抗炎性细胞因子IL-10明显下降.结论 抗炎性因子与促炎性因子失衡可能是炎性肠病的重要机制.
- 徐永芳郑小翠王海燕葛彦居颂光居颂文
- 关键词：炎症性肠病DSS炎性因子
- 人PD-L1基因转染细胞株的构建及其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:构建稳定表达人PD-L1分子的基因转染细胞株,观察其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响。方法:将编码人PD-L1分子的全长c DNA重组入反转录病毒表达载体p EGZ-Term-R,将重组载体p EGZ-Term-R/PD-L1和辅助病毒载体用脂质体法共转染293T细胞,包装具有感染能力的完整病毒;收集含有完整重组反转录病毒的293T细胞培养上清,感染L929细胞,筛选并获得G418抗性的基因转染细胞。采用流式细胞术检测表达PDL1的基因转染细胞,命名为L929/PD-L1。采用PHA活化T细胞系来源的细胞株Jurkat,并将其与丝裂霉素预处理的L929/PD-L1细胞共培养,用细胞计数法观察L929/PD-L1细胞株对活化的Jurkat细胞增殖能力的影响,并检测其凋亡情况。结果:成功获得了稳定表达人PD-L1基因的转染细胞株L929/PD-L1。PHA可诱导Jurkat细胞活化并表达PD-1分子;L929/PD-L1与PHA刺激后的Jurkat细胞共培养,可抑制Jurkat细胞增殖,促进其凋亡。结论:成功构建了稳定表达人PD-L1的细胞株,PD-L1分子抑制活化的Jurkat细胞增殖,促进其凋亡。
- 宋莉葛彦曹莎莎徐永芳潘建忠谢炜居颂文居颂光
- 关键词：PD-L1基因转染细胞株JURKAT细胞
