阿米娜
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 双峰驼天然单域抗体库的构建及鉴定被引量：1
- 2017年
- 重链抗体的可变区VHH是目前天然存在的具有完整功能的最小抗体分子片段,该抗体在基础研究、药物开发等领域应用前景极为广阔。为了构建双峰驼天然单域抗体库并对其进行初步鉴定,从5峰未经免疫的健康骆驼全血中分离淋巴细胞,提取其总RNA,之后反转录为cDNA,利用PCR技术扩增全套编码重链抗体可变区的基因序列,将经过回收并酶切纯化的VHH序列克隆到噬菌体载体上,电转化大肠杆菌TG1感受态细胞,共转化343次。结果表明,构建的双峰驼天然单域抗体库库容为4.4×10~7,转化阳性率为75%,多样性良好,体现为CDR3区碱基序列及长度存在显著差异。成功地构建了双峰驼天然单域抗体库,为今后从中筛选出具有应用价值的特异性单域抗体奠定了基础。
- 包福祥芦婷阿米娜赵鑫鑫邬春艳温靖杜雅楠
- 关键词：双峰驼单域抗体噬菌体展示技术
- 犬瘟热病毒H、F和N基因的克隆及原核表达
- 2018年
- 犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)为负链RNA病毒，属于副黏病毒科麻疹病毒属，可引起犬科、鼬科和浣熊科动物的急性、高度接触性、致死性疾病，该病的主要传染源为患病动物和隐性感染的带毒动物。目前，犬瘟热常年发生，呈散发、地方流行，传染性强、发病率和死亡率高，是养犬业、经济动物养殖和野生动物危害最大的疾病之一。CDV由15 616个核苷酸组成，编码基因按3’～5’端排序依次为：3’端前导序列、核衣壳蛋白基因（N）、磷蛋白基因（P）、基质蛋白基因（M）、融合蛋白基因（F）、血凝素蛋白基因（H）、聚合酶蛋白基因（L）和5’端引导序列。研究表明，CDV的N、F和H三种蛋白在病毒感染和宿主免疫方面起主要作用。因此，H、F和N蛋白的克隆和表达将对CDV的诊断和治疗具有非常重要的意义。
- 包福祥阿米娜阿米娜芦婷赵鑫鑫杜雅楠
- 关键词：犬瘟热病毒原核表达核衣壳蛋白基因N基因熊科动物融合蛋白基因
- 骆驼重链抗体特异性多抗的制备及鉴定
- 2015年
- 目的:骆驼血清中除了常规抗体Ig G1,还存在两种天然缺失轻链的重链抗体Ig G2和Ig G3,其具有分子量小、稳定性强等优点,但由于缺乏有效的检测手段,使其研究和应用受到了一定的限制,因此制备针对骆驼重链抗体的多抗将具有一定应用前景。方法:本实验中,我们从骆驼抗凝血中分离骆驼血浆,经过Protein G/A Resin柱子对骆驼3种亚型抗体进行了分离和纯化。利用纯化的骆驼Ig G2对家兔进行3次免疫制备了针对骆驼重链抗体的多克隆抗体,并对其活性进行了鉴定。结果:SDS-PAGE凝胶电泳检测结果显示我们成功分离到了骆驼各亚型抗体。间接ELISA测定多抗效价为1:4 096,再通过间接ELISA和Western-blot方法测定多抗的特异性,结果显示制备的多克隆抗体与牛Ig G以及骆驼Ig G1无交叉反应,而与Ig G3抗体具有交叉反应性。结论:实验结果显示我们成功制备了骆驼重链抗体特异性多克隆抗体,将对骆驼抗体资源的开发、利用及对骆驼疾病的检测和研究提供有力支持。
- 芦婷辛满喜阿米娜刘艳成杜雅楠包福祥
- 关键词：多克隆抗体
