常馨月
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家鲆鲽类产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 斑马鱼BLT1-like基因的克隆和表达分析
- 2015年
- 为了研究白三烯B_4受体在斑马鱼发育和免疫中的功能,本实验利用RACE技术克隆得到了斑马鱼白三烯B_4受体样(BLT1-like)基因BLT1-like1和BLT1-like2的全长cDNA序列,其分别编码339和356个氨基酸。序列和结构分析发现,其编码的2个蛋白均属于G蛋白偶联受体家族视紫红质蛋白亚族,并具有典型的G蛋白偶联受体的特征,与人的BLT1同源度达31%以上。进一步将2个基因与绿色荧光蛋白融合表达,发现其具有较好的细胞膜定位功能;Western印迹检测也证实,重组表达细胞的全细胞蛋白可与人源BLT1的多克隆抗体发生特异性相互作用。此外,荧光定量PCR分析结果显示,在斑马鱼幼鱼发育过程中,BLT1-like1在胚胎发育12 h显著上调,mRNA表达量上升至1 h时的18倍,而BLT1-like2在胚胎发育24 h发生显著上调,表达量上升至1 h时的34倍;斑马鱼成鱼中的2个基因在心脏和肝脏中表达量相对较高,而肠道、皮肤和眼睛中表达量相对较低。说明斑马鱼体内可能存在多个BLT1基因,实验结果为鱼类BLT1基因的克隆和功能鉴定提供基础。
- 唐宇飞刘晓红常馨月吴海珍张元兴
- 关键词：斑马鱼基因克隆基因表达
