刘晓红
- 作品数：15 被引量：7H指数：1
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 增殖细胞核抗原蛋白在Spodoptera frugiperda昆虫细胞中的表达及纯化被引量：6
- 2018年
- 目的：利用昆虫细胞表达系统生产重组的人增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）,并进行纯化和抗体结合特性鉴定。方法：以HeLa细胞逆转录的cDNA为模板,扩增人PCNA基因,并插入杆状病毒载体AcMNPV。利用昆虫细胞得到PCNA基因的重组杆状病毒。病毒感染细胞表达蛋白,联合镍柱亲和层析和离子交换层析获得高纯度的重组人PCNA蛋白。ELISA法测定抗体结合特异性。结果：以HeLa细胞cDNA为模板得到的基因序列同GenBank的人PCNA基因序列一致。草地贪夜蛾细胞（Spodoptera frugiperda,Sf9）表达重组人PCNA（recombinant human PCNA,rPCNA）的最佳感染值（MOI）和感染时间分别为0.05h和144h。rPCNA的产量高达110mg/L细胞,纯度〉95%。间接ELISA法检测抗体结合特性,rPCNA的敏感性和特异性分别为93.3%和85.0%。结论：建立了rPCNA的表达和纯化方法,获得了高效表达、高度抗体结合特异性的PCNA蛋白,该蛋白质能进一步开发为PCNA相关疾病的体外诊断试剂盒,具较大的应用价值。
- 陈军军娄颖张元兴刘琴刘琴
- 关键词：增殖细胞核抗原杆状病毒昆虫细胞蛋白质纯化
- 基于胞内甜菜碱积累的疫苗制备方法及制剂
- 本发明涉及基于胞内甜菜碱积累的疫苗制备方法及制剂，揭示了一种新型的制备活细胞疫苗冻干制剂的方法，该方法包括培养活细胞使得活细胞内积累甜菜碱、之后再进行冻干的步骤。本发明的方法可以极为显著地提高活细胞在冻干后的存活率以及细...
- 马悦王启要刘晓红张元兴
- 文献传递
- 一种大菱鲆圆环病毒及其应用
- 本发明涉及水产动物疾病病原鉴定及检测技术领域，尤其是涉及一种大菱鲆圆环病毒及其应用。本发明所述的大菱鲆圆环病毒保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO:V202416，其全基因组序列如SEQ ID NO.3...
- 吴宵马悦王启要刘晓红姜博尹刘琴阳大海张艺蓓
- 一种灭活杀香鱼假单胞菌疫苗及其制备与应用
- 本发明涉及免疫学技术领域，尤其是涉及一种灭活杀香鱼假单胞菌疫苗及其制备与应用。本发明灭活杀香鱼假单胞菌疫苗包括浓度为5×10<Sup>6</Sup>CFU/mL～3×10<Sup>8</Sup>CFU/mL的杀香鱼假单胞...
- 吴宵王启要马悦刘晓红邵帅孙飞丁昊远
- 一种鲑鱼甲病毒DNA疫苗及其制备方法与应用
- 本发明涉及一种鲑鱼甲病毒DNA疫苗及其制备方法与应用，所述鲑鱼甲病毒DNA疫苗包括含有鲑鱼甲病毒结构蛋白的基因片段和大菱鲆分子佐剂CpG‑ODN基因片段的质粒，所述结构蛋白基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示...
- 吴宵王启要马悦刘晓红邵帅王卓张博雅
- 新型爱德华氏菌减毒疫苗株、其制备方法及其应用
- 本发明涉及一种新型爱德华氏菌减毒株，其中目标基因或其编码的蛋白的表达被调控。所述的爱德华氏菌减毒可用作爱德华氏菌病害的预防性药物，对于抑制爱德华氏菌感染具有极其显著的效果。
- 王启要殷开宇马佳宝马悦刘晓红刘琴张元兴徐荣静曲江波
- 文献传递
- 斑马鱼BLT1-like基因的克隆和表达分析
- 2015年
- 为了研究白三烯B_4受体在斑马鱼发育和免疫中的功能,本实验利用RACE技术克隆得到了斑马鱼白三烯B_4受体样(BLT1-like)基因BLT1-like1和BLT1-like2的全长cDNA序列,其分别编码339和356个氨基酸。序列和结构分析发现,其编码的2个蛋白均属于G蛋白偶联受体家族视紫红质蛋白亚族,并具有典型的G蛋白偶联受体的特征,与人的BLT1同源度达31%以上。进一步将2个基因与绿色荧光蛋白融合表达,发现其具有较好的细胞膜定位功能;Western印迹检测也证实,重组表达细胞的全细胞蛋白可与人源BLT1的多克隆抗体发生特异性相互作用。此外,荧光定量PCR分析结果显示,在斑马鱼幼鱼发育过程中,BLT1-like1在胚胎发育12 h显著上调,mRNA表达量上升至1 h时的18倍,而BLT1-like2在胚胎发育24 h发生显著上调,表达量上升至1 h时的34倍;斑马鱼成鱼中的2个基因在心脏和肝脏中表达量相对较高,而肠道、皮肤和眼睛中表达量相对较低。说明斑马鱼体内可能存在多个BLT1基因,实验结果为鱼类BLT1基因的克隆和功能鉴定提供基础。
- 唐宇飞刘晓红常馨月吴海珍张元兴
- 关键词：斑马鱼基因克隆基因表达
- 长链不饱和脂肪酸在制备预防爱德华氏菌的组合物中的应用
- 本发明涉及长链不饱和脂肪酸(UFA)在制备预防爱德华氏菌的组合物中的应用。首次揭示UFA对于抑制爱德华氏菌感染宿主具有极其显著的效果。UFA通过结合爱德华氏菌的EsrC蛋白，使EsrC蛋白激活菌体内三型分泌系统(T3SS...
- 王启要魏立帆张元兴刘琴刘晓红马悦
- 文献传递
- 基于胞内甜菜碱积累的疫苗制备方法及制剂
- 本发明涉及基于胞内甜菜碱积累的疫苗制备方法及制剂，揭示了一种新型的制备活细胞疫苗冻干制剂的方法，该方法包括培养活细胞使得活细胞内积累甜菜碱、之后再进行冻干的步骤。本发明的方法可以极为显著地提高活细胞在冻干后的存活率以及细...
- 马悦王启要刘晓红张元兴
- 鲆鲽鱼类爱德华氏菌病活疫苗创制与应用
- 刘琴王启要张元兴肖婧凡吴海珍刘晓红阳大海王蓬勃马悦曲江波齐冬梅蓝胜芝
- 爱德华氏菌病是危害中国鲆鲽、鳗、鲶等多种鱼类养殖业的主要病害，发病率超过50％，给养殖业造成巨大的经济损失。引发爱德华氏菌病的主要病原为杀鱼爱德华氏菌，原名迟钝(缓)爱德华氏菌。该菌是胞内寄生菌，能够逃避抗生素和宿主体液...
- 关键词：
- 关键词：爱德华氏菌病活疫苗病害诊断鱼类养殖
