余彦霖
- 作品数：4 被引量：23H指数：2
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路促进高磷诱导血管平滑肌细胞钙化被引量：2
- 2017年
- 目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核转录因子-κB(nuclear transcription factorκB,NF-κB)信号通路对高磷诱导小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)成骨样分化以及血管钙化过程的影响。方法体外培养小鼠血管平滑肌细胞系。首先将实验分为正常对照组和高磷组,观察高磷对VSMCs的影响;其次分为正常对照组、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)组(PDTC组)、高磷组和高磷+PDTC组,观察PDTC对高磷诱导的VSMCs成骨样分化及钙化的抑制作用;最后分为正常对照组、正常对照+control siRNA组、正常对照+TLR4 siRNA组、高磷组、高磷+control siRNA组、高磷+TLR siRNA组,观察TLR4基因的小分子干扰RNA(siRNA)对高磷诱导的VSMCs成骨样分化及钙化的抑制作用。采用茜素红S染色观察高磷对细胞钙盐沉积的影响,Western blot检测TLR4、p-NF-κB、SM22α、骨形态发生蛋白2(bone morphogenic protein2,BMP2)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达变化。结果与正常对照组相比,高磷处理后,VSMCs的钙盐沉积明显增多[(0.079±0.011)vs(0.193±0.017),P<0.01],TLR4[(0.228±0.008)vs(0.526±0.017),P<0.01]、p-NF-κB[(0.271±0.003)vs(0.454±0.008),P<0.01]蛋白的表达明显升高,与成骨样分化及钙化相关的BMP2、Runx2蛋白表达亦明显升高,而平滑肌细胞标志物SM22α表达则减少;加入PDTC处理后,高磷状态下的VSMCs的钙盐沉积明显降低[(0.121±0.013)vs(0.217±0.031),P<0.01],p-NF-κB[(0.094±0.006)vs(0.380±0.009),P<0.01]表达明显受抑制,BMP2和RUNX2表达明显下降,而SM22α的表达则明显上调;高磷状态下,应用TLR4 siRNA转染VSMCs后,VSMCs的TLR4[(0.117±0.047)vs(0.377±0.012),P<0.01]表达明显受抑制,同样,p-NF-κB[(0.264±0.013)vs(0.601±0.027),P<0.01]的表达亦明显下降,BMP2和Runx2(P<0.01)蛋白的表达明显受抑,而SM22α[(0.321±0.011)vs(0.194±0.004),P<0.01]的表达则明显上升
- 张道海肖堂利余彦霖刘亮刘永郑昌玲聂凌赵景宏
- 关键词：高磷血症血管钙化
- 慢性肾脏病患者血清Klotho蛋白水平与炎症因子的相关性分析被引量：15
- 2016年
- 目的 分析慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）患者血清Klotho蛋白水平与炎症因子的相关性,评价CKD患者Klotho与微炎症状态的关系。方法 采用ELISA检测314例CKD 1-5期患者血清中Klotho蛋白、C反应蛋白（C-reaction protein,CRP）、白介素6（interleukin 6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）水平。生化检测血清白蛋白（albumin,ALB）、血磷（serum phosphorus,P）、血肌酐、尿酸（uric acid,UA）、胱抑素,记录患者年龄、性别、身高等指标,通过CKD-EPI公式估算肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate,e GFR）。单因素方差分析比较CKD不同分期血清中炎症因子水平,炎症因子与ALB、e GFR、UA、Klotho、P相关性采用等级相关（Spearman）分析,影响CKD患者炎症因子的因素采用多元线性回归分析。结果 1单因素方差分析结果显示CKD 1-5期患者血清TNF-α含量逐渐升高（P〈0.05）,CRP、IL-6差异无统计学意义（P〉0.05）,Klotho蛋白水平逐渐降低（P〈0.01）。2Spearman相关分析结果显示,CKD患者血清TNF-α水平与e GFR呈负相关（r=-0.550,P〈0.01）;CKD患者血清TNF-α与Klotho呈负相关（r=-0.753,P〈0.01）;Klotho与e GFR呈正相关（r=0.643,P〈0.01）。3多元线性回归分析结果显示,CKD患者血清TNF-α水平与Klotho、e GFR关系密切。结论 CKD患者随着e GFR的降低,血清Klotho水平逐渐下降,炎症因子TNF-α水平逐渐升高,两者之间具有明显的相关性,提示Klotho蛋白降低与CKD微炎症状态的发生和发展有着密切关联。
- 郑昌玲杨可余彦霖何婷徐新丽赵景宏
- 关键词：慢性肾脏病炎症肿瘤坏死因子ΑKLOTHO蛋白
- 硫酸吲哚酚促进肾纤维化的机制研究被引量：5
- 2016年
- 目的探讨尿毒症毒素硫酸吲哚酚（indoxyl sulfate,IS）诱导肾纤维化的作用及可能机制。方法 24只3周龄健康雄性CD-1小鼠,体质量14-15 g,建立1/2肾切除模型后,采用完全随机分组法将小鼠分为IS处理组（n=12）和对照组（n=12）,分别给予小鼠腹腔注射IS 100 mg/（kg·d）和等体积灭菌磷酸缓冲溶液,IS注射4周后留取肾脏标本,Masson染色观察小鼠肾间质胶原沉积情况,免疫组化染色检测观察小鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和β-catenin蛋白表达变化,Western blot检测β-catenin蛋白表达变化;用不同浓度的IS（0、2、10、50 mg/L）孵育人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）72 h后,Western blot检测β-catenin表达变化。结果与对照组比较,Masson染色发现腹腔注射IS 4周后,小鼠肾脏胶原沉积明显增加[（2.43±0.51）vs（6.57±0.51）,P〈0.05],IS处理组肾小管上皮细胞β-catenin[（0.87±0.74）vs（10.87±1.21）,P〈0.05]以及α-SMA[（1.30±0.56）vs（13.53±0.50）,P〈0.05]的表达均明显增加;与对照组相比,IS处理组HK-2细胞的β-catenin表达显著增加,且呈剂量依赖效应[（0.71±0.71）vs（0.96±0.70）或（0.71±0.71）vs（1.10±0.95）,P〈0.01]。结论 IS可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路发挥促小鼠肾纤维化的作用。
- 余彦霖肖堂利刘亮何婷徐新丽管旭杨可赵景宏
- 关键词：WNT/Β-CATENIN肾纤维化
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ抑制高磷诱导血管平滑肌细胞钙化被引量：1
- 2016年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators activated receptorγ,PPARγ)对高磷诱导的小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的抑制作用。方法体外培养小鼠血管平滑肌细胞,先分正常对照组、高磷组(HP,2.6 mmol/L),观察高磷对VSMCs的影响,再分为正常对照组、高磷组(HP,2.6 mmol/L)、罗格列酮组(RGL,10μmol/L)、高磷(2.6 mmol/L)+罗格列酮(10μmol/L)组(HP+RGL),观察PPARγ激动剂罗格列酮对高磷诱导的VSMCs钙化的抑制作用。茜素红S(alizarin red S)染色观察高磷对细胞钙盐沉积的影响。Western blot检测PPARγ、血管平滑肌22alpha蛋白标志物(SM22α)、骨形成蛋白2(BMP2)和成骨特异性转录因子2(Runx2)的表达变化。结果与正常对照组相比,高磷处理后的VSMCs的钙盐沉积明显升高[(0.08±0.02)vs(0.19±0.03),P<0.01],成骨细胞标志物BMP2[(0.26±0.02)vs(0.74±0.03),P<0.01]及Runx2表达[(0.29±0.03)vs(0.91±0.04),P<0.01)],明显升高。同时PPARγ[(0.93±0.04)vs(0.58±0.02),P<0.05]及平滑肌细胞标志物SM22α表达减少[(1.02±0.09)vs(0.77±0.03),P<0.05],而加入罗格列酮后,高磷状态下VSMCs的钙盐沉积明显降低[(0.19±0.02)vs(0.12±0.03),P<0.05],PPARγ[(0.63±0.04)vs(0.85±0.03),P<0.05]和SM22α[(0.69±0.02)vs(0.99±0.03),P<0.01]表达明显上升,相反,BMP2[(1.02±0.04)vs(0.48±0.05),P<0.01]及Runx2[(1.00±0.06)vs(0.67±0.03),P<0.01]的表达则明显受抑。结论高磷诱导VSMCs向成骨细胞分化和钙化可能与下调PPARγ的表达有关,而罗格列酮可通过激活PPARγ抑制高磷状态下VSMCs钙化的发生。
- 刘亮肖堂利余彦霖何婷徐新丽管旭杨可张道海郑昌玲赵景宏
- 关键词：血管钙化高磷血症
