杨可
- 作品数：11 被引量：57H指数：4
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢性肾脏病心血管并发症发病机制及临床防治研究
- 赵景宏冯兵袁发焕黄云剑张静波侯卫平王沂芹张翊李芙蓉牟娇聂凌张莹杨可曾薇李艺
- 心血管疾病是慢性肾脏病患者最常见的并发症和首位死亡原因，发病率高达40-75%。44-51%的终末期肾脏病-即“尿毒症”患者死于心血管疾病，此类患者的病死率是普通人群的20-30倍，常规心血管疾病防治措施并不能显著降低慢...
- 关键词：
- 关键词：心血管疾病慢性肾脏病
- 硫酸吲哚酚诱导心肌细胞肥大的研究被引量：3
- 2013年
- 目的研究尿毒症毒素硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate,IS)对心肌细胞肥大的影响及其可能的机制。方法不同浓度的IS(100、250、500、1 000μmol/L)孵育体外培养的新生大鼠心肌细胞(RNCM)3 h后,2,7-dichlorofluorescin dictate(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平。500μmol/L IS孵育心肌细胞24 h后,Real-time PCR检测心肌细胞肥大标志基因心房尿钠肽(atrial natriuretic peptide,ANF)、B型尿钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)及β肌球蛋白重链(beta-myosin heavy chain,β-MHC)的mRNA表达。500μmol/L IS孵育NRCM 48 h后,3H亮氨酸掺入法检测心肌细胞蛋白合成速率,α-actinin免疫荧光染色观察心肌细胞面积。结果 IS可以剂量依赖性的诱导心肌细胞ROS生成增多(P<0.05),500μmol/L IS孵育可以导致心肌细胞肥大标志基因ANF、BNP和β-MHC mRNA表达上调,并显著增加心肌细胞3H亮氨酸摄入量和细胞面积(P<0.05)。结论 IS能够诱导体外培养的新生大鼠心肌细胞肥大,其机制可能与诱导氧化应激增强有关。
- 杨可孙蕾管旭肖堂利徐新丽何婷赵景宏
- 关键词：心肌细胞肥大氧化应激
- 慢性肾脏病患者血清Klotho蛋白水平与炎症因子的相关性分析被引量：16
- 2016年
- 目的 分析慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）患者血清Klotho蛋白水平与炎症因子的相关性,评价CKD患者Klotho与微炎症状态的关系。方法 采用ELISA检测314例CKD 1-5期患者血清中Klotho蛋白、C反应蛋白（C-reaction protein,CRP）、白介素6（interleukin 6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）水平。生化检测血清白蛋白（albumin,ALB）、血磷（serum phosphorus,P）、血肌酐、尿酸（uric acid,UA）、胱抑素,记录患者年龄、性别、身高等指标,通过CKD-EPI公式估算肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate,e GFR）。单因素方差分析比较CKD不同分期血清中炎症因子水平,炎症因子与ALB、e GFR、UA、Klotho、P相关性采用等级相关（Spearman）分析,影响CKD患者炎症因子的因素采用多元线性回归分析。结果 1单因素方差分析结果显示CKD 1-5期患者血清TNF-α含量逐渐升高（P〈0.05）,CRP、IL-6差异无统计学意义（P〉0.05）,Klotho蛋白水平逐渐降低（P〈0.01）。2Spearman相关分析结果显示,CKD患者血清TNF-α水平与e GFR呈负相关（r=-0.550,P〈0.01）;CKD患者血清TNF-α与Klotho呈负相关（r=-0.753,P〈0.01）;Klotho与e GFR呈正相关（r=0.643,P〈0.01）。3多元线性回归分析结果显示,CKD患者血清TNF-α水平与Klotho、e GFR关系密切。结论 CKD患者随着e GFR的降低,血清Klotho水平逐渐下降,炎症因子TNF-α水平逐渐升高,两者之间具有明显的相关性,提示Klotho蛋白降低与CKD微炎症状态的发生和发展有着密切关联。
- 郑昌玲杨可余彦霖何婷徐新丽赵景宏
- 关键词：慢性肾脏病炎症肿瘤坏死因子ΑKLOTHO蛋白
- 尿毒症心肌病的研究进展被引量：15
- 2013年
- 心血管疾病（cardiovascular disease，CVD）是慢性肾病（chronic kidney disease，CKD）最常见的并发症，CKD并发的CVD主要包括高血压、动脉粥样硬化、左室肥厚、心包炎、充血性心功能衰竭、冠脉疾病等。尿毒症心肌病是CKD高血压、高容量负荷以及复杂机体内环境导致的心肌损害，在其基础上易发生恶性心律失常和心力衰竭，是终末期肾病（ESRD）特别是透析患者的首位死亡原因。因此，有效控制尿毒症心肌病可以显著改善CKD患者的预后，降低死亡风险。但是，到目前为止，尿毒症心肌病的发病机制并未完全明确，我们对近年来有关尿毒症心肌病的基本概况和研究进展综述如下。
- 杨可赵景宏
- 关键词：尿毒症心肌病发病机制
- 白藜芦醇对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化的抑制作用
- 2014年
- 目的探讨白藜芦醇对高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)发生上皮-间充质细胞转分化(epitheliamesenchymal transition,EMT)的抑制作用及机制。方法体外培养HK-2细胞,分为正常对照组(NG,5.5 mmol/L)、高糖组(HG,30 mmol/L)、白藜芦醇组(RES,10μmol/L)、高糖(30 mmol/L)+白藜芦醇(10μmol/L)组(HG+RES)、二苯基碘(diphenyleneiodonium)组(DPI,10μmol/L)、高糖(30 mmol/L)+DPI(10μmol/L)组(HG+DPI)。倒置显微镜下观察高糖对细胞形态的影响。免疫荧光检测上皮细胞标志物波形蛋白(cytokeratin)及间充质细胞标志物波形蛋白(vimentin)的表达变化,Western blot检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、NADPH氧化酶亚基(NOXs)的表达变化,DCFH-DA法检测细胞内ROS水平。结果与正常对照组相比,高糖处理后的HK-2细胞失去原有形态,呈长梭形改变,上皮细胞标志物cytokeratin及E-cadherin表达明显减少,间充质细胞标志物vimentin及α-SMA表达明显升高(P<0.01),同时NADPH氧化酶亚基NOX1、NOX4表达明显升高(P<0.01),NOX2无明显变化,ROS产生明显增多[(1 723.82±303.97)vs(2 579.36±353.76),P<0.01],而加入白藜芦醇或NADPH氧化酶抑制剂DPI预孵育后,均能抑制高糖诱导的HK-2细胞EMT(P<0.01)和ROS[(1 803.36±199.54)或(1 837.45±266.83)vs(2 579.36±353.76),P<0.01]产生增多,并且白藜芦醇可以明显抑制高糖诱导的NOX1以及NOX4表达升高(P<0.01)。结论白藜芦醇可能通过抑制NADPH氧化酶降低肾小管上皮细胞ROS生成,进而抑制高糖状态下HK-2细胞EMT的发生。
- 何婷管旭孙蕾杨可肖堂利徐新丽杨琴赵景宏
- 关键词：白藜芦醇高糖上皮-间充质转分化NADPH氧化酶
- Klotho对FGF2诱导的肾小管上皮细胞上皮-间充质转分化的抑制作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨Klotho抑制成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor2,FGF2)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质转分化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制。方法重组人Klotho蛋白预孵育前后,倒置显微镜观察FGF2对HK-2细胞形态的影响,免疫荧光检测上皮细胞标志物cytokeratin和间充质细胞标志物vimentin的表达变化,Western blot检测α-SMA、E-cadherin和ERK1/2的表达变化。结果 100 ng/mL的FGF2作用于HK-2细胞48 h后,HK-2细胞变成长梭形,细胞间隙明显增大,上皮细胞标志物E-cadherin的表达明显下降,间充质细胞标志物α-SMA表达明显升高(P<0.05),提示FGF2可以诱导HK-2细胞发生EMT。而Klotho蛋白预孵育可以显著抑制FGF2诱导的EMT,并且FGF2/FGFR(FGFs受体)下游信号分子pERK1/2的表达明显减弱(P<0.05)。结论 Klotho可以通过减弱FGF2信号通路活化抑制FGF2诱导的HK-2细胞EMT,Klotho可能参与了肾间质纤维化的发生和发展。
- 管旭杨可肖堂利李艺何婷徐新丽赵景宏
- 关键词：KLOTHOFGF2上皮-间充质转分化
- 雷帕霉素对糖尿病肾病小鼠足细胞自噬的改善作用被引量：14
- 2013年
- 目的探讨雷帕霉素(Rapamycin)对糖尿病肾病小鼠肾小球足细胞自噬和损伤的影响,以及对糖尿病肾病的改善作用,阐明糖尿病肾病可能的发生机制。方法健康雄性Balb/c小鼠48只,采用完全随机设计分组法分为柠檬酸对照组(n=12)、雷帕霉素对照组(n=12)、链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)组(STZ组,n=12)和STZ+雷帕霉素组(n=12)。采用腹腔注射STZ制备糖尿病动物模型,成模后即给予小鼠腹腔注射雷帕霉素2 mg/(kg·48 h),雷帕霉素注射0、2、4、8、12周时分别测定各组小鼠血糖和体质量,12周时留取24 h尿标本,取肾脏称质量、检测24 h尿蛋白和肌酐,计算尿蛋白/肌酐值(UACR)和肾质量/体质量值(KW/BW)。PAS染色观察肾组织病理改变,透射电镜观察肾小球足细胞自噬体大小和数量、细胞器损伤情况,Western blot检测足细胞自噬标志物LC3蛋白的表达变化,nephrin免疫荧光染色观察足细胞数量。结果与对照组相比,STZ组小鼠血糖、UACR、KW/BW明显增高(P<0.05),PAS染色发现肾小球基膜增厚,系膜基质增多,电镜提示足细胞足突增宽、融合,足细胞和自噬体数量减少,自噬活化标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值明显下降(P<0.01)。与STZ组比,雷帕霉素处理后STZ小鼠肾小球病理变化有所改善,足细胞和自噬体数量增多,细胞器损伤减轻,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值上调,UACR和KW/BW下降(P<0.05),但血糖无统计学差异。结论糖尿病小鼠腹腔注射雷帕霉素可以减轻肾小球病理改变和足细胞损伤,其作用可能与促进足细胞自噬有关,而维持足细胞自噬平衡可能是延缓糖尿病肾病进展的有效措施。
- 肖堂利孙蕾管旭杨可何婷徐新丽黄云剑赵景宏
- 关键词：雷帕霉素自噬足细胞糖尿病肾病
- UCP2在硫酸吲哚酚诱导心肌细胞肥大中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨解耦联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)在硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate,IS)诱导心肌细胞肥大中的作用和机制。方法分离培养新生Sprague-Dawley大鼠心肌细胞,0、100、250、500、1 000μmol/L IS孵育心肌细胞1 h或500μmol/L IS孵育心肌细胞0、15、30、45、60 min后,Western blot检测心肌细胞UCP2蛋白表达变化。UCP2慢病毒转染心肌细胞后,通过α-actinin免疫荧光染色观察细胞大小,3H-亮氨酸掺入法评价蛋白合成速率,Real-time PCR检测肥大相关基因ANF、BNP和β-MHC mRNA的表达,同时利用MitosoxTM探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成情况。结果与对照组相比,IS处理组心肌细胞的UCP2蛋白水平明显下降(P<0.05);与IS处理组相比,UCP2过表达可以明显抑制IS诱导的心肌细胞ROS生成、体积增大、3H-亮氨酸摄入增加及肥大相关基因(ANF、BNP和β-MHC mRNA)的表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IS诱导心肌细胞肥大可能与其下调UCP2表达及促进氧化应激有关,而UCP2过表达或许可以通过抑制氧化应激拮抗IS诱导的心肌细胞肥大。
- 徐新丽杨可管旭肖堂利何婷余彦琳刘亮赵景宏
- 关键词：心肌细胞肥大解偶联蛋白2
- 硫酸吲哚酚促进肾纤维化的机制研究被引量：5
- 2016年
- 目的探讨尿毒症毒素硫酸吲哚酚（indoxyl sulfate,IS）诱导肾纤维化的作用及可能机制。方法 24只3周龄健康雄性CD-1小鼠,体质量14-15 g,建立1/2肾切除模型后,采用完全随机分组法将小鼠分为IS处理组（n=12）和对照组（n=12）,分别给予小鼠腹腔注射IS 100 mg/（kg·d）和等体积灭菌磷酸缓冲溶液,IS注射4周后留取肾脏标本,Masson染色观察小鼠肾间质胶原沉积情况,免疫组化染色检测观察小鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和β-catenin蛋白表达变化,Western blot检测β-catenin蛋白表达变化;用不同浓度的IS（0、2、10、50 mg/L）孵育人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）72 h后,Western blot检测β-catenin表达变化。结果与对照组比较,Masson染色发现腹腔注射IS 4周后,小鼠肾脏胶原沉积明显增加[（2.43±0.51）vs（6.57±0.51）,P〈0.05],IS处理组肾小管上皮细胞β-catenin[（0.87±0.74）vs（10.87±1.21）,P〈0.05]以及α-SMA[（1.30±0.56）vs（13.53±0.50）,P〈0.05]的表达均明显增加;与对照组相比,IS处理组HK-2细胞的β-catenin表达显著增加,且呈剂量依赖效应[（0.71±0.71）vs（0.96±0.70）或（0.71±0.71）vs（1.10±0.95）,P〈0.01]。结论 IS可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路发挥促小鼠肾纤维化的作用。
- 余彦霖肖堂利刘亮何婷徐新丽管旭杨可赵景宏
- 关键词：WNT/Β-CATENIN肾纤维化
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ抑制高磷诱导血管平滑肌细胞钙化被引量：1
- 2016年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators activated receptorγ,PPARγ)对高磷诱导的小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的抑制作用。方法体外培养小鼠血管平滑肌细胞,先分正常对照组、高磷组(HP,2.6 mmol/L),观察高磷对VSMCs的影响,再分为正常对照组、高磷组(HP,2.6 mmol/L)、罗格列酮组(RGL,10μmol/L)、高磷(2.6 mmol/L)+罗格列酮(10μmol/L)组(HP+RGL),观察PPARγ激动剂罗格列酮对高磷诱导的VSMCs钙化的抑制作用。茜素红S(alizarin red S)染色观察高磷对细胞钙盐沉积的影响。Western blot检测PPARγ、血管平滑肌22alpha蛋白标志物(SM22α)、骨形成蛋白2(BMP2)和成骨特异性转录因子2(Runx2)的表达变化。结果与正常对照组相比,高磷处理后的VSMCs的钙盐沉积明显升高[(0.08±0.02)vs(0.19±0.03),P<0.01],成骨细胞标志物BMP2[(0.26±0.02)vs(0.74±0.03),P<0.01]及Runx2表达[(0.29±0.03)vs(0.91±0.04),P<0.01)],明显升高。同时PPARγ[(0.93±0.04)vs(0.58±0.02),P<0.05]及平滑肌细胞标志物SM22α表达减少[(1.02±0.09)vs(0.77±0.03),P<0.05],而加入罗格列酮后,高磷状态下VSMCs的钙盐沉积明显降低[(0.19±0.02)vs(0.12±0.03),P<0.05],PPARγ[(0.63±0.04)vs(0.85±0.03),P<0.05]和SM22α[(0.69±0.02)vs(0.99±0.03),P<0.01]表达明显上升,相反,BMP2[(1.02±0.04)vs(0.48±0.05),P<0.01]及Runx2[(1.00±0.06)vs(0.67±0.03),P<0.01]的表达则明显受抑。结论高磷诱导VSMCs向成骨细胞分化和钙化可能与下调PPARγ的表达有关,而罗格列酮可通过激活PPARγ抑制高磷状态下VSMCs钙化的发生。
- 刘亮肖堂利余彦霖何婷徐新丽管旭杨可张道海郑昌玲赵景宏
- 关键词：血管钙化高磷血症
