唐菀泽
- 作品数：4 被引量：11H指数：1
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- 腺苷酸环化酶对泡沫细胞胆固醇流出的影响
- 2015年
- 目的观察腺苷酸环化酶AC1和AC4对泡沫细胞胆固醇流出的影响。方法以人AC1和AC4基因为靶点,设计合成sh RNA寡核苷酸片段,插入慢病毒载体p GMLV-SC1,构建重组慢病毒载体。用构建的AC-sh RNA慢病毒感染THP-1细胞,q PCR检测干扰载体对AC1和AC4基因的干扰效果。慢病毒感染泡沫细胞后,采用液体闪烁计数法测定apo A-1介导的泡沫细胞胆固醇流出率。结果测序结果表明,AC1和AC4基因的sh RNA寡聚核苷酸序列已成功插入慢病毒载体。荧光观察显示,两种慢病毒的感染效率达80%。q PCR分析表明,AC1-sh RNA和AC4-sh RNA干扰载体对靶基因有明显的抑制效果(P<0.01),其抑制效率分别为83.9%和80.1%。AC1和AC4-sh RNA慢病毒感染泡沫细胞后,胆固醇流出明显降低(P<0.01)。结论本实验初步证实AC1和AC4可降低泡沫细胞胆固醇流出,提示其可能在胆固醇代谢中起作用。
- 丁航唐菀泽向乐马卫列覃燕梅刘慧明张志珍
- 关键词：腺苷酸环化酶泡沫细胞胆固醇
- 高脂模型长爪沙鼠生化指标变化
- 2015年
- 目的观察高脂饲料喂养14周的长爪沙鼠生化指标变化。方法选取雄性长爪沙鼠20只,随机分为高脂饲料组和对照组,每组10只。对照组喂养普通饲料,高脂饲料组喂养含1.0%胆固醇、20.0%猪油的高脂饲料。14周后颌下静脉丛采血,检测血糖(GLU)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等。结果高脂饲料组长爪沙鼠血清TC、LDL-C、TG、HDL-C水平[分别为(14.27±2.97)、(4.72±1.94)、(3.04±1.22)、(3.43±0.90)mmol/L]明显高于对照组[分别为(1.72±0.22)、(0.19±0.09)、(1.53±0.49)、(1.46±0.25)mmol/L],差异均有统计学意义(P<0.01)。GLU水平[(6.47±0.55)mmol/L]低于对照组[(8.19±1.02)mmol/L],但差异无统计学意义(P>0.05)。结论高脂饲料喂养能明显升高长爪沙鼠血脂水平,导致长爪沙鼠高脂血症。
- 唐菀泽向乐林东子刘慧明覃燕梅丁航
- 关键词：血清生化指标
- 氧化芍药苷对泡沫细胞胆固醇流出的影响被引量：10
- 2017年
- 目的分析氧化芍药苷对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出的影响。方法 THP-1细胞加入160 nmol/L佛波酯(PMA)24 h,再加入50μg/ml乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL)建立泡沫细胞模型,CCK-8法测定氧化芍药苷的细胞毒性,同位素标记法测定各处理组泡沫细胞胆固醇流出率。共聚焦显微镜观察泡沫细胞内脂肪分化相关蛋白(ADFP)表达变化,Western blot分析泡沫细胞中ADFP、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白表达变化。结果成功建立THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞模型。氧化芍药苷毒性分析表明,质量浓度在200.0μg/ml以下无细胞毒性。150.0μg/ml与200.0μg/ml氧化芍药苷处理泡沫细胞,胆固醇流出率分别为(10.317±0.508)%与(11.265±0.713)%,与apo A-1组相比,差异有统计学意义(P<0.05),均高于apo A-1组。氧化芍药苷处理的泡沫细胞内ADFP荧光明显减弱。Western blot分析泡沫细胞ADFP表达量降低28%。氧化芍药苷处理组PPARα表达量增加51%,ABCA1表达量增加45%。结论实验表明氧化芍药苷可通过上调PPARα增加ABCA1表达,进而促进泡沫细胞胆固醇流出。
- 唐菀泽马卫列丁航向乐张志珍
- 关键词：THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出
- 慢病毒介导磷酸二酯酶7A基因沉默细胞株的构建及三磷酸腺苷结合盒转运体A1的表达变化被引量：1
- 2016年
- 目的利用慢病毒介导构建磷酸二酯酶7A(PDE7A)基因沉默人单核巨噬细胞(THP-1)株,并分析沉默细胞株的三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达变化。方法以PDE7A基因为靶点,设计合成3段sh RNA片段,与慢病毒载体Pmi Rzip连接,构建重组质粒。测序鉴定后进行病毒包装,感染THP-1细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)进行分析,确定最佳干扰片段。嘌呤霉素筛选得到PDE7A基因沉默稳转细胞株。q PCR和Western blot检测鉴定所构建的细胞株,将其诱导成为泡沫细胞后鉴定ABCA1基因的表达。结果转染sh RNA1、sh RNA2、sh RNA3细胞的PDE7A相对表达量分别为(0.480±0.028)、(0.561±0.016)和(0.377±0.013),故选择sh RNA3作为干扰PDE7A基因的最佳片段。采用1.4 g/L嘌呤霉素成功筛选出PDE7A沉默细胞株,q PCR和Western blot检测PDE7A基因的干扰效率,其抑制效率>70%。将其诱导成巨噬泡沫细胞后,Western blot检测显示,ABCA1的表达量增加40%。结论成功构建PDE7A sh RNA慢病毒干扰载体,并筛选出PDE7A基因沉默的THP-1细胞株,且ABCA1的表达量增加。
- 向乐唐菀泽张志珍马卫列
- 关键词：RNA干扰慢病毒三磷酸腺苷结合盒转运体A1
