- Tra2β1蛋白在神经特异性的基因剪接中的功能被引量：1
- 2004年
- 体外(in vitro)生化研究已证明哺乳动物Tra2蛋白是前体mRNA剪接的重要调控因子,但是,对该蛋白在in vivo条件下的剪接功能,尤其是在神经特异性基因剪接中的功能及其细胞特异性,目前所知甚少。本文采用in vivo分析模型,在COS-1和PFSK两种不同类型的细胞中,研究了两个神经特异性基因(GluR-B,SMN2)剪接的细胞特异性,同时分析了Tra2β1在这两个基因剪接中的功能及其细胞特异性。结果表明,在研究的两种细胞中,GluR-B和SMN2“小基因”的剪接均具有明显的细胞特异性;而Tra2β1蛋白的过量表达在这两种不同的细胞中对“小基因”的剪接有显著的相同倾向的调节作用,提示Tra2β1蛋白对该两个基因剪接的调节作用可能没有细胞特异性。
- 陈献华李静林万敏吴琨徐平
- 关键词：基因剪接细胞特异性MRNA
- 用于前体mRNA剪接机制研究的小基因模型的建立和研究应用被引量：1
- 2003年
- 建立可用于选择性前体mRNA剪接分析的小基因模型。以人或小鼠基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得GluR-B,FGF-2R和ZiS小基因片段,并将其克隆至真核表达载体中,构建了小基因的质粒。在此基础上,将上述3个小基因模型和剪接因子Tra2β_1或Zis2表达质粒共转染HeLa细胞,并用RT-PCR进行了被剪接的小基因产物的半定量检测。结果表明,这些小基因可用于细胞水平的基因剪接分析,利用该技术平台,发现了Zis2亚型可以促进Zis小基因选择性剪接。
- 李静陈献华林万敏李丽书韩彧徐平
- 关键词：剪接机制基因表达调控选择性剪接ZIS
- 前体mRNA剪接蛋白ZNF265的表达、调控及功能研究
- 锌指蛋白ZNF265/(ZNF265,Zfp265,zis/)于1997年由Karginova等人从大鼠的JG细胞/(renal juxtaglomerular/)中克隆到。JG细胞是位于肾动脉和肾小球紧密连接处的一类特...
- 李静
- 关键词：RT-PCRWESTERN-BLOTRT-PCRWESTERN-BLOT附睾组织附睾组织RENINZISRENINZISRT-PCR
- 文献传递
- 前体mRNA剪接蛋白Tra2β1的抗体制备及鉴定被引量：1
- 2003年
- Tra2 β1是Tra2 β前体mRNA剪接调节蛋白家族中的一个组织分布最广、表达量最多的成员 ,它在选择性前体mRNA剪接中有调节功能 ,而在基础性剪接中不是必需的 .为便于对该蛋白功能的进一步研究 ,需要制备能特异地检测Tra2 β1蛋白的抗体 .选择包含Tra2 β1的N端 12个氨基酸的特异编码序列的Tra2 β2全长编码序列 (共 117个核苷酸 ) ,将其克隆至pGEX 3X表达载体形成GST融合基因 ,并以诱导表达和纯化的该融合蛋白为抗原免疫新西兰兔 ,获得了相应的抗体 .Western印迹和免疫细胞化学分析结果显示 ,获得的抗体能特异地检测Tra2
- 陈献华李静孙凯华林万敏徐平
- 关键词：抗体融合蛋白免疫细胞化学
