谢东芳
- 作品数：20 被引量：15H指数：3
- 供职机构：浙江科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金宁波市自然科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 一种交联壳聚糖微球及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种交联壳聚糖微球及其制备方法和应用，属于高分子材料领域。所述制备方法，包括以下步骤：(1)将壳聚糖粉末溶于乙酸溶液中形成水相，将乳化剂加入液体石蜡中混匀形成油相；(2)将水相注入油相中，搅拌形成油包水型乳液...
- 黄俊林越呈毛建卫梅乐和胡升王宏鹏龚金炎张祥谢东芳
- 一种羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶及其制备方法和应用，所述羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶，以羧基磁珠为载体，所述谷氨酸脱羧酶通过氨基和羧基偶联固定在羧基磁珠表面，所述谷氨酸脱羧酶的编码基因的碱基序列如SEQ ID N...
- 黄俊梅乐和李佳男胡升谢湉谢东芳方卉
- 文献传递
- ω-转氨酶突变体及其编码基因和制备方法
- 本发明公开了ω‑转氨酶突变体及其编码基因和制备方法，ω‑转氨酶突变体氨基酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.10所示。核苷酸序列如S...
- 黄俊谢东芳楼坚蒋成君吴元锋龚金炎
- 文献传递
- 删除Loop区域表面不稳定氨基酸提高(R)-ω-转氨酶热稳定性被引量：3
- 2017年
- 手性胺是一类具有重要价值的医药及精细化工中间体,如何实现手性胺类化合物的不对称合成是目前人们普遍关注的一个焦点问题。ω-转氨酶(ω-Transaminase,ω-TA)是一类能直接合成对映体手性胺的天然生物催化剂。相比于(S)-ω-TA,(R)-ω-TA的研究较少,但其需求量随着手性胺类药物的发展日趋增大。提高具有潜在应用价值的(R)-ω-TA的热稳定性,将有利于手性胺的制备。本文利用Py MOL软件和YASARA软件预测来源于土曲霉Aspergillus terreus的(R)-ω-TA中具有高温度因子(B-factor)的Loop区域,通过定点突变对Loop区域表面不稳定氨基酸逐步进行删除获得突变酶。结果表明,突变酶R131del和突变酶P132-E133del半失活温度分别为41.1℃和39.4℃,比野生酶提高了2.6℃和0.9℃;在40℃下的半衰期分别为15.0 min和10.0 min,为野生酶的2.2倍和1.5倍。此外,在400 K和10 ns的分子模拟条件下,突变酶R131del在Loop区域的均方根涨落(Root mean square fluctuation,RMSF)比野生型低,突变酶P132-E133del在Loop区域增加了4个氢键。本研究通过删除(R)-ω-转氨酶Loop区域表面不稳定氨基酸提高了该蛋白的热稳定性,同时也为其他酶热稳定性的理性设计提供了方法学指导。
- 谢东芳吕常江方卉杨卫康胡升赵伟睿黄俊梅乐和
- 关键词：手性胺B-FACTOR热稳定性
- 一种引入二硫键的ω-转氨酶突变体及其应用
- 本发明提供了一种引入二硫键的ω‑转氨酶突变体及其应用，所述ω‑转氨酶突变体氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明ω‑转氨酶突变体由土曲霉(Aspergillus terreus)ω‑转氨酶131位的精氨酸和134...
- 黄俊谢东芳梅乐和王宏鹏胡升方卉赵伟睿吕常江李伊莹
- 羧基化磁性微球固定化谷氨酸脱羧酶被引量：3
- 2017年
- 通过化学共沉淀法结合高锰酸钾氧化制备羧基化Fe_3O_4磁性微球,以该磁性微球作为载体,固定化谷氨酸脱羧酶。利用热重分析(TGA)、透射电镜(TEM)及振动样品磁强计(VSM)对羧基化磁性微球进行表征,结果表明该磁性微球磁含量约为95.1%,粒径均一,呈近似球形且具有超顺磁性。通过对固定化酶进行傅里叶红外光谱(FT-IR)、VSM和X射线衍射(XRD)分析,确定磁性微球载体与谷氨酸脱羧酶分子间形成酰胺键,实现共价结合且固定化酶前后粒子晶形完整,均具有良好的磁响应能力和超顺磁性。与游离谷氨酸脱羧酶相比,固定化酶的热稳定性和酸碱耐受性均有不同程度的提高,且制备的固定化酶重复使用10批后相对酶活力仍大于90%。
- 李佳男谢湉胡升谢东芳方卉梅乐和黄俊王进波姚善泾
- 关键词：谷氨酸脱羧酶固定化稳定性
- DCCD对植物乳杆菌H^+-ATPase活性及基因表达水平的影响
- 2018年
- 研究添加外源抑制剂双环己基碳二亚胺(DCCD)对植物乳杆菌H^+-ATPase基因表达水平及酶活力的影响,探讨植物乳杆菌H^+-ATPase的调控机制。分别测定加入DCCD前后的亲本菌和低H^+-ATPase活力突变菌的生长能力、葡萄糖代谢速率、乳酸产量和H^+-ATPase活性,并通过荧光定量PCR对编码H^+-ATPase的相关基因进行相对定量分析。结果表明,亲本菌ZUST、突变菌ZUST-1和ZUST-2在添加DCCD后菌体生长能力均减弱,葡萄糖代谢速率减慢,乳酸产量降低,H^+-ATPase酶活性也降低。由于受到发酵液中酸性环境以及外源抑制剂DCCD的胁迫,亲本菌ZUST和突变菌ZUST-2编码H^+-ATPase的所有基因在稳定期表达水平都高于对数期。与未添加DCCD相比,添加DCCD的亲本菌和突变菌ZUST-2在对数期H^+-ATPase各基因的表达水平均下调或基本不变,抑制了H^+-ATPase活力从而导致菌株的生长代谢速率减弱。此研究结果为进一步揭示植物乳杆菌中H^+-ATPase在酸胁迫下的调控机制奠定了基础。
- 谢东芳张祥花雨娇杨俊兴JIANG Ping吕常江方卉黄俊
- 关键词：植物乳杆菌荧光定量PCR
- 一种ω-转氨酶突变体及其应用
- 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其应用，该ω‑转氨酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明ω‑转氨酶突变体由土曲霉(Aspergillus terreus)ω‑转氨酶77位的异亮氨酸、150位的甲硫氨酸...
- 黄俊梅乐和谢东芳吕常江朱婉丽胡升赵伟睿
- 文献传递
- 一种N-羧乙基壳聚糖纳米磁珠及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种N-羧乙基壳聚糖纳米磁珠及其制备方法和应用，属于化学技术领域。所述N-羧乙基壳聚糖纳米磁珠的制备方法包括：将N-羧乙基壳聚糖、Fe<Sub>3</Sub>O<Sub>4</Sub>纳米粒子和交联剂溶于乙酸...
- 黄俊叶慧谢湉林越呈张祥谢东芳方卉
- 文献传递
- ω-转氨酶突变体及其制备方法和应用
- 本发明公开了ω‑转氨酶突变体及其制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。ω‑转氨酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.1...
- 黄俊谢东芳方卉梅乐和王宏鹏胡升吕常江赵伟睿
- 文献传递
