王铁东
- 作品数：3 被引量：30H指数：3
- 供职机构：解放军军需大学军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 重组逆转录病毒的制备、浓缩及保存研究被引量：3
- 2001年
- 选择含有新霉素磷酸转移酶Ⅱ（ＮｅｏＲ）的重组逆转录病毒载体，用包装细胞进行包装，得到了含有重组逆转录病毒粒子的病毒上清，该病毒上清经差速离心法浓缩后，－８０℃无任何添加物的情况下保存３个月，体外感染靶细胞ＮＩＨ３Ｔ３以测定其滴度，冻存前后的浓缩病毒上清的感染滴度无明显降低，经过冻存的浓缩病毒上清的感染滴度仍可达到１０６ｃｆｕ／ｍｌ，具有理想的感染靶细胞的能力。
- 王凤阳扈荣良杜卫华王铁东殷震
- 关键词：重组逆转录病毒
- 猎豹与虎猫杯状病毒的分离及其超变区基因比较研究被引量：21
- 2003年
- 用F8 1细胞从上海某动物园患口腔溃疡的猎豹和虎的唾液病料中分离获得两株杯状病毒 ,经形态学、理化学、生物学鉴定和病毒核酸超变区基因RT_PCR扩增与序列测定证明两株病毒均为猫杯状病毒 (FCV) ,分别命名为FCV/cheetah/Shanghai/ 0 2 / 2 0 0 2与FCV/tiger/Shanghai/ 0 3/ 2 0 0 2。人工感染猫可引起体温升高 ,口腔溃疡 ,食欲下降等症状。两株病毒的超变区序列 5 2 0bp长片段间的同源性为 99.2 % ,与国内桂林虎分离株 (TFCV9710 )的同源性为 74 .0 % ,与国外分离株的总体同源性为 5 8.1% ,说明不同宿主或同种不同个体间杯状病毒分离株超变区核酸差异十分显著 。
- 高玉伟夏咸柱扈荣良黄耕徐春忠王铁东
- 关键词：猎豹病毒分离
- 伪狂犬病病毒弱毒株LY株的分离鉴定被引量：6
- 2003年
- 从辽阳某猪场的 1 0日龄仔猪中分离到 1株病毒 ,经纯化后测得其毒价为 1 0 7.2 9TCID50 / m L。细胞中和试验表明 ,该病毒能被猪伪狂犬病病毒标准阳性血清所中和。电镜下可见到典型的疱疹病毒粒子 ,具有囊膜及外周纤突。所分离的病毒对氯仿、胰蛋白酶、乙醚敏感 ,在 p H5 .0～ 9.0下稳定 ,5 6℃ 30 m in可以灭活。应用特异性引物 ,通过 PCR能扩增出伪狂犬病病毒 1 2 4 0 bp的 g D基因。分离病毒对 3日龄乳鼠有一定的致病力 ,但对家兔、3～ 5日龄仔猪及妊娠母猪都有很高的安全性。用不同剂量的病毒培养液肌肉注射于 3～ 5日龄仔猪 ,1 4 d后用 1 0 5.7TCID50 伪狂犬病病毒强毒攻击 ,所有试验仔猪均可得到有效保护。用分离毒免疫母猪 ,其后代可获高滴度的母源抗体 ,1 5日龄的仔猪能抵抗1 0 5.7TCID50 强毒的攻击。试验的结果初步说明 ,所分离的病毒为伪狂犬病病毒 (命名为 PRV L Y株 ) ,并可能是一株弱毒株 。
- 马凤龙王文成李尚波马振宇丁建民卫广森王铁东宣华
- 关键词：伪狂犬病病毒
