周维
- 作品数：11 被引量：43H指数：4
- 供职机构：广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 哈氏弧菌(Vibrio harveyi)recA基因的克隆与原核表达被引量：3
- 2018年
- SOS反应不仅能够促使细菌本身产生耐药性,而且与细菌耐药基因的水平转移密切相关。rec A是细菌SOS反应的重要基因,影响SOS反应的开启和关闭。本研究以水产养殖经济动物的条件致病菌哈氏弧菌ZJ0603基因组DNA为模板,设计同源引物克隆出SOS基因rec A（recombinase A）,并对rec A基因进行了生物信息学分析。并构建了rec A基因的原核表达载体PGEX-rec A,在大肠杆菌BL21（DE3）中成功诱导表达,对Rec A蛋白的诱导温度、时间、IPTG浓度等条件进行了优化。结果表明,rec A基因的开放阅读框为693 bp,编码230个氨基酸,Rec A蛋白理论分子量为25.29 k D。重组蛋白表达的优化条件为37℃、0.04 mmol/L IPTG诱导6 h。
- 常云胜周维高增鸿丁燏
- 关键词：哈氏弧菌RECA基因克隆原核表达
- 哈氏弧菌(Vibrio harveyi)lexA基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2018年
- LexA是调节SOS反应的阻遏蛋白,而且与细菌耐药性的形成密切相关。本研究以水产养殖经济动物的条件致病菌哈氏弧菌ZJ0603基因组DNA为模板,设计同源引物克隆出SOS基因lexA,并对lexA基因进行了生物信息学分析;构建了lexA基因的原核表达载体PGEX-lexA,在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达成功,还对LexA蛋白表达的诱导温度、时间、IPTG浓度等条件进行了优化。结果表明,lexA基因的开放阅读框为621 bp,编码206个氨基酸,LexA蛋白理论分子量为22.68 kD;重组蛋白表达的最优条件为37℃、0.04 mmol/L IPTG诱导6 h。
- 常云胜周维高增鸿丁燏
- 关键词：哈氏弧菌LEXA基因克隆原核表达
- 复合益生菌在水产养殖上作用机理的探讨27
- 在当前养殖业急速发展的大背景之下,复合益生菌以其独特的性能特点在水产养殖上得到广泛的应用并取得良好的效果.但目前对复合益生菌作用机理的认识尚不够深入,因此研究和分析复合益生菌的作用机理有助于进一步发挥其应用潜力.该综述不...
- 陈树河常云胜周维汤菊芬丁燏
- 关键词：水产养殖复合益生菌菌株筛选配伍规律
- 溶藻弧菌耐药基因qnr的克隆及生物信息学分析被引量：5
- 2015年
- [目的]克隆溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)喹诺酮类耐药基因qnr并分析其蛋白结构,为研究该蛋白的生物学功能奠定基础。[方法]根据NCBI上公布的相关序列设计qnr基因特异性引物,利用PCR方法扩增基因序列,进行DNA测序及生物信息学分析。[结果]从溶藻弧菌染色体上获得qnr基因大小为651 bp,编码216个氨基酸,进化分析可知其与副溶血弧菌有很近的亲缘关系,二级结构分析含有五肽重复序列,三维结构与大肠杆菌质粒上的qnr蛋白空间结构极为相似。[结论]通过对蛋白质序列分析和结构预测,初步确定该基因为喹诺酮耐药基因,为水产细菌的耐药机制研究奠定基础。
- 周维汤菊芬甘桢简纪常吴灶和丁燏
- 关键词：溶藻弧菌喹诺酮耐药基因生物信息学
- 溶藻弧菌胱硫醚-β-合成酶基因cbs的克隆、生物学信息分析及原核表达被引量：1
- 2016年
- 提取溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的总DNA,克隆溶藻弧菌胱硫醚-β-合成酶基因cbs,对其进行生物信息学分析。结果表明,所克隆溶藻弧菌cbs基因的开放阅读框为1 095 bp,编码364个氨基酸。氨基酸序列比对发现,溶藻弧菌的CBS蛋白与其他弧菌的CBS相似性极高,与副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)CBS氨基酸序列相似性达98%;CBS蛋白质的二级结构为典型的"α+β"折叠模式,无跨膜结构及信号肽。构建cbs基因表达载体(p GEX-cbs)以表达重组蛋白,结果显示,cbs基因在大肠杆菌BL21中高效表达,可表达出分子质量约为66.4 ku的融合蛋白。对表达条件进行优化,发现在37℃、IPTG浓度0.6 mmol/L的条件下诱导5 h后,CBS蛋白的表达量较多,该蛋白主要以包涵体形式存在。
- 陈树河常云胜刘晖晖周维丁燏
- 关键词：溶藻弧菌胱硫醚-Β-合成酶基因克隆原核表达
- 不良环境对溶藻弧菌胱硫醚-β-合成酶活力及抗氧化系统的影响
- 2016年
- 研究非适宜的p H、温度和盐度条件,以及抗生素胁迫和添加外源H2S条件下溶藻弧菌胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化物酶(peroxidase,POD)的活力及谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量的变化,分析CBS与抗氧化系统的相关性,探讨不良环境对CBS活性及抗氧化系统的影响。结果表明,在非适宜温度、盐度及抗生素胁迫下,溶藻弧菌的CBS活力均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在非适宜温度下,其SOD和POD的活力及GSH含量均有不同程度的提高(P<0.05)。在非适宜盐度下,GSH含量上调(P<0.05)。在红霉素和壮观霉素胁迫下,SOD和POD活力均上调(P<0.05),而庆大霉素和四环素胁迫则分别提高SOD、POD活力(P<0.05)。在非适宜p H条件下,低p H上调CBS、SOD和POD的活力及GSH含量(P<0.05);高p H条件下CBS活力与对照组差异无统计学意义(P>0.05),SOD活力较对照组下降(P<0.05)。相关性分析发现,在不同温度、盐度条件下及抗生素胁迫下CBS活力与SOD、POD活力及GSH含量之间具有显著正相关(P<0.05),而在不同p H条件以及抗生素+Na HS处理后,CBS活力与SOD、POD活力及GSH含量之间的相关性无统计学意义(P>0.05)。溶藻弧菌可通过提高CBS活力以调节其抗氧化系统,从而抵御不良环境,而外源H2S则提高溶藻弧菌SOD活力和GSH水平以维持溶藻弧菌正常生理活动。
- 陈树河常云胜刘晖晖周维丁燏
- 关键词：不良环境溶藻弧菌胱硫醚-Β-合成酶抗氧化系统
- 复合益生菌在水产养殖中的作用机制研究进展被引量：23
- 2016年
- 复合益生菌在水产养殖业已得到广泛应用,并取得了良好的效果。但目前对复合益生菌作用机制的认识尚不够深入,研究和分析复合益生菌的作用机制有助于进一步发挥其应用潜力。因此,主要从净化养殖水质、抑制有害病原、增强动物免疫力和减轻应激反应等几个方面探讨了复合益生菌在水产养殖中的作用机制,并概述了当前该领域中存在的问题及其解决对策,同时还对其应用前景进行了展望。
- 陈树河陈秋常云胜周维王青华丁燏
- 关键词：复合益生菌水产养殖
- 徐闻方斑东风螺暴发性疾病病原分离鉴定以及防治手段探索被引量：6
- 2016年
- 为了明确引起方斑东风螺急性死亡症的病原,对2015年6月广东省徐闻县发生的方斑东风螺(Babylonia areolata)急性死亡症进行了病原分离纯化,获得1株优势细菌,命名为XW-01。将XW-01人工感染方斑东风螺,表现出自然发病症状,证实分离菌株为致病菌。分离的菌株经形态学观察、生理生化鉴定和病原16S r RNA序列分析,结果显示该病原菌为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)。XW-01对方斑东风螺半致死剂量(LD50)测定值为6.3×106 cfu/m L。药敏试验结果显示,该病原菌对常见的7种抗菌药物氟哌酸、氟苯尼考、氨苄西林、恩诺沙星、头孢三嗪、左旋氧氟沙星和妥布霉素敏感。添加不同剂量的三联生物噬菌王产品到水族箱中,对方斑东风螺用浸泡法进行人工感染哈维氏弧菌试验,观察东风螺发病及死亡情况。试验结果表明,添加1%的此产品可以明显降低东风螺的死亡率,表明三联生物噬菌王产品对东风螺感染哈维氏弧菌所引起的急性坏死病有明显的预防作用。
- 黄瑜汪志文周维蔡小辉张海艳鲁义善简纪常汤菊芬
- 关键词：方斑东风螺哈维氏弧菌
- 体外诱导哈氏弧菌对喹诺酮类药物耐药及其耐药机制的初步研究
- 为研究哈氏弧菌对喹诺酮类药物的耐药机制,本实验以哈氏弧菌标准菌株ATCC33843 和临床分离的敏感菌株为研究对象,在含亚抑菌浓度诺氟沙星的培养基上进行逐步诱导,分别检测诱导前后各菌株对诱导药物(诺氟沙星)和非诱导药物(...
- 周维汤菊芬丁燏鲁义善简纪常吴灶和
- 关键词：哈氏弧菌喹诺酮类基因突变外排泵
- 哈维氏弧菌qnr基因的克隆及原核表达条件优化被引量：4
- 2016年
- 根据Gen Bank中公布的哈维氏弧菌qnr基因序列设计引物扩增哈维氏弧菌qnr序列,将其插入p ET-32a质粒,构建原核表达载体p ET32-qnr,并对诱导温度、时间、IPTG浓度等条件进行优化。结果表明,哈维氏弧菌qnr全长651 bp,编码216个氨基酸;重组蛋白优化条件为于28℃、IPTG浓度为0.05 mmol/L条件下诱导6 h。
- 周维汤菊芬高增鸿甘桢简纪常吴灶和丁燏
- 关键词：哈维氏弧菌QNR基因原核表达
