李红梅 作品数:30 被引量:119 H指数:5 供职机构: 华南农业大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 黑龙江省自然科学基金 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 语言文字 文化科学 医药卫生 更多>>
湖北株H3N8亚型马流感病毒HA基因的序列测定及其HA蛋白遗传特性分析 被引量:3 2010年 2008年从湖北省分离到1株H3N8亚型马流感病毒A/equine/Hubei/6/08。以2002年美国KENTUKY株为模板设计HA基因测序引物,进行RT-PCR,然后测定该分离株的HA基因核苷酸序列。经NCBI上Blast同源性比较发现,与A/equine/Newmarket/5/2003(H3N8)同源性较高为98.7%。HA蛋白遗传进化分析表明该毒株隶属于H3N8亚型马流感病毒中的美洲系福罗里达亚系。该株与OIE现在推荐的疫苗候选株A/equine/Kentuck-y/5/2002(H3N8)HA1蛋白氨基酸序列比对发现有3处氨基酸替换位点;与OIE以往推荐的疫苗候选株A/e-quine/Kentucky/1/1994(H3N8)比对发现有11处氨基酸替换位点。研究结果表明该分离株可作为中国研制马流感疫苗的候选株。 黄文强 郭巍 赵立平 盛名巍 王宇 李红梅 相文华关键词:H3N8亚型马流感病毒 HA基因 中国华南、华中、东北和西北地区马动脉炎病毒(EAV)感染马血清流行病学调查 被引量:6 2012年 马病毒性动脉炎(EVA)是一种由马动脉炎病毒(EAV)引起马属动物主要通过呼吸系统和生殖系统传播的传染病,是危害养马业及赛马业的重要疾病之一。本试验应用纯化EAV全病毒为抗原建立EAV-IgG间接ELISA方法与西班牙INGEZIM-ARTERITIS试剂盒分别检测华南、华中、东北和西北地区共计383份马血清样品。其结果为:华南地区赛马动脉炎阳性率为26%,华中地区赛马动脉炎阳性率为0,东北地区役用马动脉炎阳性率为8.26%,西北地区役用马动脉炎阳性率为7.55%。鉴于此,有必要加强EVA检测,掌握EVA在我国分布,以有效的预防和控制本病传播。 李红梅 侯玉杰 时成龙 郭巍 胡兰 赵立平 相文华关键词:赛马 马动脉炎病毒 流行病学调查 标准听写训练提升外语听力水平的定量研究 被引量:4 2011年 本研究的目的在于检验标准听写训练在提升学生EFL听力水平方面的实际效果,并揭示标准听写训练效果与学生英语听力基础之间的关系。基于149名非英语专业硕士研究生听力对比实验的定量研究结果表明:(1)标准听写训练有助于学生英语听力水平的提高;(2)标准听写训练对英语听力水平的提升效果与学生英语听力基础之间存在负相关关系。 李红梅关键词:听力水平 RNAi抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展 2013年 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,以妊娠母猪发热、厌食、早产、流产、死胎等繁殖障碍及仔猪高死亡率和育成猪呼吸困难,类流感症状、发育迟缓为主要的特征。该病给各个国家的养猪业带来巨大的经济损失,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。自2006年以来,不断有研究者应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术开展抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究,并取得了一些阶段性成果。对已有的研究成果进行了综述。 李红梅 贺聪 张春红 张健騑 张建峰 孟轩 郭鹏举关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNAI 抗病毒 腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体的构建 被引量:1 2013年 为解决日本脑炎病毒(JEV)复制子DNA疫苗载体不稳定和递送效率低的缺点,本研究利用具有高效递送效率的人5型复制缺陷性腺病毒(AdV)来递送JEV复制子,构建嵌合载体。本研究将已构建的含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的JEV复制子克隆至经过改造的带有SwaⅠ酶切位点的pShuttle-CMV载体中,再将来自pCI载体的嵌合内含子插入JEV复制子中,得到转移载体pSh-JEV-In-EGFP,经SwaⅠ线性化后电转化至含有腺病毒骨架载体AdEasy-1的BJ5183感受态细胞,将所得重组腺粒经PacⅠ线性化后转染HEK293细胞,传代直至出现细胞病变,得到含有表达EGFP的JEV复制子的重组腺病毒,命名为rAdV-JEV-In-EGFP。结果表明,pSh-JEV-In-EGFP在细菌中传20代仍然保持稳定,而且在rAdV-JEV-In-EGFP感染的HEK293细胞中,JEV复制子能够自我复制,并启动EGFP蛋白稳定、高效地表达。本研究为进一步研发以腺病毒递送的JEV复制子为基础的二价新型疫苗奠定基础。 李红梅 孙元 亓文宝 孟其麟 田大勇 廖明 仇华吉关键词:腺病毒 内含子 马动脉炎病毒GL、M和N蛋白主要抗原域的原核表达及抗原性鉴定 被引量:1 2012年 采用RT-PCR方法从EAV Bucyrus株扩增了截短的GL、M和全长的N基因片段,将三者分别克隆到表达载体pGEX-6p-1中,测序验证后转化Rosetta(DE3)宿主菌中经IPTG诱导表达,诱导后菌体裂解物经SDS-PAGE分析。试验结果表明,重组菌表达出约35 000、34 000和38 000的特异性条带,通过条件优化及切胶纯化获得较高浓度的目的蛋白。经Western-blot和间接ELISA分析,纯化的蛋白只与抗马动脉炎病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性和特异性。 王贵宾 郭巍 赵立平 李红梅 赵敏 相文华关键词:马动脉炎病毒 原核表达 抗原性 汉语“被”字结构中“被”字语类的解析:特殊动词说 被引量:1 2015年 作为汉语"被"字结构研究的焦点问题,"被"字语类归属的认定直接关系到对该结构句法生成过程的认知。按照句法理论发展的阶段顺序,对不同时期围绕汉语"被"字结构中"被"字的各种特殊动词说进行比较与分析。虽然早期研究者对"被"在句法运算中的"特殊性"持不同看法,并给"被"字冠以"ECM动词""轻动词""次动词""表示被动的功能性动词成分"等不同名号,但普遍认同"被"在"被"字句中承担的是辅助性的作用。据此,在句法理论发展的最新阶段,这种"辅助性"可以通过把"被"分析成"表示被动,且具有类似EPP特征的强名词性特征的功能性动词成分"以获得较好的解释。 李红梅shRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JXA1-R株在Marc-145细胞中复制及抗PRRSV细胞株的建立 被引量:1 2013年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。本研究选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)JXA1-R株ORF1a、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7的保守区域为靶序列,利用pSilencer2.1-U6neo构建shRNA表达载体并转染Marc-145细胞。经实时荧光定量PCR、细胞病变及病毒滴度分析,结果显示,ORF1a-4-shRNA、ORF3-1-shRNA、ORF6-2-shRNA干扰质粒能明显抑制病毒基因的转录,并有效抑制PRRSV在Marc-145上的增殖,显著降低病毒滴度。最后筛选ORF6-2-shRNA表达质粒转染猪胎儿成纤维细胞,构建稳定转染细胞株,为抗PRRSV转基因猪的生产奠定了基础。 李红梅 贺聪 张茂 孟轩 张建峰 张健騑 郭鹏举关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 RNA干扰 马疱疹病毒1型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:8 2012年 为建立马疱疹病毒Ⅰ型(EHV-1)的检测方法,本研究以EHV-1 gB基因的一段保守区域(1 207 bp~1 509 bp)作为检测的目的片段设计引物,通过对其反应条件的优化,建立了特异性检测EHV-1的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。实验结果表明:该方法检测目的基因的灵敏度下限为10拷贝/μL,比常规PCR方法高100倍;与马疱疹病毒4型(EHV-4)及其他马传染病病原体无交叉反应;组内及组间的变异系数均小于2%。该方法检测速度快及高敏感性的特点为马鼻肺炎的防制提供了有力保障,同时也为进一步开展马鼻肺炎相关的研究提供了有效的辅助检测方法技术。 王征 郭巍 姬媛媛 曲娟娟 赵立平 李红梅 相文华关键词:SYBR 荧光定量PCR 抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备 被引量:1 2012年 为制备抗马动脉炎病毒(EAV)衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达重组N蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,细胞融合后经间接ELISA筛选获得两株能够稳定分泌抗EAV N蛋白的杂交瘤细胞株,MAbs亚型鉴定为IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,这两株杂交瘤细胞分泌的MAb均能够识别EAV。EAV N蛋白MAb的制备,为EAV血清学检测方法的建立奠定了基础。 赵世华 戚亭 郭巍 李红梅 王贵宾 刘翠云 仇铮 田志革 王征 卢刚 潘佳亮 相文华关键词:马动脉炎病毒 核衣壳蛋白 单克隆抗体