徐斌
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外泌体对SH—SY5Y细胞缺氧再灌注损伤的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨外泌体对人神经母细胞瘤细胞株（SH—SY5Y）缺氧再灌注损伤的影响。方法构建人脐静脉血管内皮细胞（mJVEC）缺氧再灌注损伤（HUVECI／R1模型．从中提取外泌体并予以鉴定。构建SH．SY5Y细胞缺氧再灌注损伤（SH．SY5YI／R）模型并分为2组．其中外泌体组于再灌注同时予以外泌体刺激，对照组于再灌注同时予以无外泌体血清培养基培养。采用CCK8法检测2组细胞培养24h、48h、72h时细胞活力，采用Hochest33258染色检测细胞凋亡情况，采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况及细胞周期，采用划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测细胞迁移能力和侵袭能力，采用RT．qPCR、Westernblotting检测细胞中Caspase-3、Bax、Bcl-2mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较，外泌体组细胞培养48h、72h时细胞活力明显提高（48h：0．70±0．05vs0．94±0．08；72h：0．83±0．05vs1．02±0．06），G0／G1期细胞比例明显降低（71．26％±5．24％vs566．87％±4．23％）．S期细胞比例明显增高（14．39％±4．11％vs20．54％±3．46％），相对划痕损伤面积明显减少（0．61±0．07vs50．52±0．10），穿膜细胞数量明显增多（44．00±6．56vs70．67±6．11），细胞中Bax、Caspase-3mRNA表达水平明显降低、Bcl-2mRNA表达水平明显增高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论HUVECI／R模型来源外泌体可在SH-SY5Y细胞缺氧再灌注损伤后发挥神经保护作用。
- 柴毅范阳华纪晨星吕世刚吴淼经叶敏华肖兵徐斌祝新根
- 关键词：外泌体脑卒中缺血再灌注损伤神经保护
- 过表达SNORD47对U87-EGFRvIII胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响
- 2017年
- 目的探讨过表达SNORD47对U87-EGFRvIII胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法将对数生长期U87垣GFRvIII胶质瘤细胞分为SNORD47组、阴性对照组、空白对照组3组，前2组分别转染携带SNORD47核苷酸序列、阴性对照核苷酸序列的重组慢病毒，空白对照组不作任何处理。48h后qRT—PCR检测3组细胞SNORD47的表达水平：Westernblotting检测3组细胞基质金属蛋白酶2（MMP2）、MMP9蛋白的表达；CCK-8实验检测接种后4、24、48、72、96h3组细胞的存活率：平板克隆实验检测3组细胞的克隆能力；划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测3组细胞的迁移能力和侵袭能力。结果qRT-PCR和Westernblotting检测显示：与阴性对照组及空白对照组比较，SNORD47组细胞SNORD47表达水平升高，MMP2、MMP9蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）；CCK-8和平板克隆实验显示：与阴性对照组及空白对照组比较，SNORD47组细胞接种后48、72、96h吸光度值降低，SNORD47组细胞克隆数降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）：划痕实验、Transwell侵袭实验显示：与阴性对照组及空白对照组比较，SNORD47组划痕损伤面积增大，穿膜细胞数明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论SNORD47能有效抑制u87-EGFRvIII胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力。
- 徐斌叶敏华吕世刚吴淼经肖兵范阳华柴毅祝新根
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖细胞侵袭细胞迁移
- 人脑胶质瘤中CENP-W/B23调控Ras信号通路的相关性被引量：6
- 2015年
- 【目的】探讨人不同病理级别脑胶质瘤组织中着丝粒蛋白W(CENP-W)、核仁磷酸蛋白(B23)、大鼠肉瘤癌基因(RAS)的表达及其相关性。【方法】在高级别胶质瘤组织、低级别胶质瘤及瘤旁正常脑组织中,采用免疫组织化学法分别检测CENP-W的表达水平,并统计学分析蛋白表达水平与胶质瘤临床病理特征的关系,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测CENP-W、B23、RAS的表达水平,分析与胶质瘤分级的关系以及表达的相关性。应用特异性si RNA干扰U251细胞中CENP-W表达使其下调后,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测RAS蛋白及m RNA表达的变化。【结果】胶质瘤组织CENP-W、B23、RAS的表达水平明显高于正常脑组织,并且与胶质瘤的病理级别呈正相关性;CENP-W、B23、RAS的m RNA表达水平之间成正相关性。CENP-W可以上调RAS的表达。【结论】CENP-W、B23、RAS表达均与胶质瘤的病理级别呈正相关。CENP-W可以调节RAS的表达,预示CENP-W可作为胶质瘤治疗新靶点。
- 范阳华吴淼经吕世刚汲乾坤柴毅徐斌叶敏华祝新根
- 关键词：RAS脑胶质瘤
- 下调CENP-W对人脑胶质瘤U87细胞的影响被引量：4
- 2017年
- 目的:研究下调着丝粒蛋白W(centromere protein W,CENP-W)的表达水平对人脑胶质瘤U87细胞的影响。方法:采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人脑胶质瘤U87细胞CENP-W的表达,采用RT-qPCR和Western blot法评价siRNA的干扰效果,采用MTT法、BrdU实验和平板集落形成实验测定细胞的增殖,Transwell小室检测细胞侵袭力的变化,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的改变。结果:MTT实验、平板集落形成实验和BrdU实验显示转染siRNA的实验组U87细胞的增殖能力、集落形成能力较空白对照组及阴性对照组明显降低;Transwell实验和划痕实验显示实验组细胞的迁移、侵袭能力较空白对照组及阴性对照组明显减弱;流式细胞术分析表明实验组细胞的细胞周期被阻滞在G_0/G_1期;实验组细胞凋亡比例较对照组增多(P<0.05)。结论:下调CENP-W的表达可抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进细胞的凋亡,提示CENP-W有望成为人脑胶质瘤基因治疗的候选靶点。
- 汲乾坤李建斌范阳华徐斌柴毅纪晨星祝新根
- 关键词：小干扰RNA细胞侵袭
