王铭
- 作品数：10 被引量：6H指数：2
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：贵州省农业科技攻关项目国家自然科学基金贵州省优秀青年科技人才计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 贵州省PEDV M基因克隆及序列分析
- 引言猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起,临床上以猪的呕吐、腹泻和脱水为主要特征,是一种急性接触性肠道传染病,对哺乳仔猪的致死率可达100%,给当前...
- 王铭周碧君王开功文明程振涛温贵兰冯旭芳
- 文献传递
- 某赛鸽养殖场新城疫感染的诊治报告
- 2017年
- 为了确诊贵州省贵阳市某赛鸽养殖场赛鸽死亡的原因,采用了流行病学调查、临床症状观察、病理剖解、细菌分离、发病鸽HI试验和RT-PCR检测诊断等方法对发病死亡的赛鸽进行诊断。结果表明:根据流行病学调查、病理剖检初步诊断送检的病死赛鸽疑似禽流感、新城疫和细菌感染,经病毒核酸检测和细菌分离,结果新城疫病毒RT-PCR检测出特异性条带,判断为阳性。确诊造成该赛鸽场赛鸽发病死亡的原因为新城疫病毒感染。
- 张海杨忠成廖梅王伟胡兴义王铭周碧君王开功文明程振涛
- 关键词：赛鸽养殖场新城疫诊治
- 牛乳头瘤病毒基因2型贵州GZ01流行株全基因组序列测定及其特征分析被引量：3
- 2017年
- 为从分子水平了解牛乳头瘤病毒(bovine papillomavirus,BPV)贵州镇宁GZ01流行株全基因组序列、结构特征及遗传变异情况,本研究选取贵州镇宁患病牛皮肤肿瘤样物,以乳头瘤病毒L1基因的简并引物MY11/MY09进行PCR扩增,测序后并确定其基因型。根据Gen Bank中BPV参考株设计6对特异性引物,经扩增、测序和拼接后获得BPV流行株全基因组序列。结果序列分析表明,GZ01流行株全基因组长为7 944 bp,具有BPV2基因型的结构特征,与Gen Bank收录的牛乳头状瘤病毒2型基因型参考株BPV2、BPV2-SW01和BPV2-AKS01的核苷酸同源性高达98.8%、99.7%和99.4%,同时与BPV13、BPV1和BPV14的基因型参考株进化关系也比较最近,同属Dalte属。因此,贵州镇宁GZ01株为BPV2基因型,GZ01株为贵州地区首次检测确认并测定了全基因组序列的牛乳头瘤病毒。本研究为贵州地区的牛乳头状瘤的病原鉴定、流行规律、遗传变异以及科学的防控提供了理论依据。
- 张海张军杨忠成廖梅周碧君王开功文明程振涛王伟王铭胡兴义
- 关键词：全基因组序列
- 鸵鸟新城疫病例诊断及部分F基因特征分析
- <正>1研究目的新城疫病毒(New castled disease virus,NDV)是副粘病毒科腮腺炎病毒属成员[1],能导致多种禽类发生严重的呼吸系统和神经系统疾病,致死率较高。NDV的基因组为单股负链RNA,可编...
- 王铭周碧君文明王开功程振涛温贵兰车驰毛黎红
- 文献传递
- 鸵鸟新城疫病例诊断及部分F基因特征分析被引量：1
- 2016年
- 为了了解贵州省鸵鸟感染新城疫病毒后的症状及分离株F基因的分子生物学特性，试验通过患病雏鸵鸟临床症状、剖检病变观察和鸡胚感染分离鉴定，并针对新城疫分离株F基因序列设计特异性引物，采用RT—PCR方法对从贵州省某养殖场采集的雏鸵鸟病料进行新城疫检测。结果表明：该病例感染了新城疫病毒，分离株F基因裂解位点的氨基酸序列为^112G—R-Q-G-R-L^117，是1株新城疫弱毒株；与其他贵州省毒株间的核苷酸同源性为84．1％～89．7％，与国内外新城疫病毒代表株的核苷酸同源性为83．9％-89．9％；系统发生树分析显示，贵州分离株与新城疫病毒弱毒株在同一分支上，属于基因Ⅱ型新城疫病毒。
- 王铭王伟张华张元鑫周碧君文明王开功程振涛温贵兰车驰毛黎红
- 关键词：鸵鸟分子生物学特性F基因基因分析
- 鸵鸟新城疫病例诊断及部分F基因特征分析
- ＜正＞1研究目的新城疫病毒（New castled disease virus,NDV）是副粘病毒科腮腺炎病毒属成员[1],能导致多种禽类发生严重的呼吸系统和神经系统疾病,致死率较高。NDV的基因组为单股负链RNA,可编...
- 王铭周碧君文明王开功程振涛温贵兰车驰毛黎红
- 贵州省山羊源流产细菌调查及致病机理初探
- 2015年
- 为调查贵州省细菌性山羊流产疫病的主要原因,分析山羊源流产细菌对正常怀孕动物免疫平衡的影响,本试验采集贵州省6个地区(州、市)12个规模养羊场临床健康和发病流产山羊的胎儿、子宫和母羊的阴道棉拭子样本共计107份进行细菌分离和鉴定,采用药敏纸片琼脂扩散法对3种主要羊源分离菌进行20种抗生素的耐药性调查,并用羊源流产细菌建立BALB/c小鼠流产模型,通过ELISA方法对妊娠相关细胞因子和激素进行测定。结果显示,从采集的107份样本中共分离到13个属细菌共302株,其中发病流产山羊生殖器官中分离的细菌种类多于临床健康山羊;流产山羊生殖器官中分离的羊源细菌耐药率高于临床健康山羊细菌耐药率;3种主要羊源流产细菌埃希氏菌、葡萄球菌和链球菌均可引起怀孕BALB/c小鼠发生不同程度的流产,流产率为埃希氏菌>葡萄球菌>链球菌;胚胎吸收率为埃希氏菌>葡萄球菌>链球菌;与空白对照组相比,各试验组BALB/c小鼠血清中的IFN-γ、IL-2含量上升,而IL-4、IL-10和孕酮含量降低。结果表明,贵州省细菌性山羊流产的发生与山羊生殖器官细菌种类多少、耐药性高低有一定相关性,推测山羊源流产细菌可能通过影响怀孕山羊的主要妊娠相关细胞因子和激素的含量导致山羊流产。
- 王伟王开功周碧君王铭冯旭芳马光强罗意
- 关键词：山羊细菌耐药性细胞因子流产
- 问号钩端螺旋体对THP-1和J774A．1细胞NLRP3炎症小体活化的影响被引量：2
- 2016年
- 目的了解问号钩端螺旋体（钩体）对THP-1和J774A.1细胞NLRP3炎症小体活化的影响，为钩体感染不同宿主后引起不同炎症性反应的科学解释提供依据。方法分别采用real-time RT-PCR和流式细胞术检测问号钩体56601株感染的THP-1及J774A.1细胞NLRP3 mRNA及蛋白表达水平，采用ELISA结合NLRP3阻断试验检测细胞IL-1β、IL-18和IL-33表达水平。结果问号钩体感染1 h、2 h、4 h、12 h和24 h后，THP-1细胞NLRP3 mRNA水平分别为未感染细胞的4.05、0.34、0.33、0.06和1.66倍，J774A.1细胞分别为未感染细胞的12.98、16.19、10.68、5.8和0.57倍（P〈0.05）；THP-1细胞NLRP3蛋白表达率分别从感染前的9.26%上升至94.01%、89.24%、31.80%、19.74%和11.28%（P〈0.05），J774A.1细胞分别从感染前的18.71%上升至58.78%、43.64%、36.42%、76.46%和85.21% （P〈0.05）；THP-1细胞IL-1β分别上调至73.07 pg/ml、939.24 pg/ml、939.24 pg/ml、843.22 pg/ml和851.06 pg/ml（P〈0.05），J774A.1细胞IL-1β在感染后12 h出现上升，感染12 h和24 h的浓度分别为191.17 pg/ml和254.4 pg/ml（P〈0.05），THP-1细胞IL-18浓度分别为913.89 pg/ml、808.19 pg/ml、483.54 pg/ml、204.19 pg/ml和189.09 pg/ml（P〈0.05），J774A.1细胞IL-18在感染后24 h出现上升，浓度为113.37 pg/ml，THP-1细胞IL-33水平无明显变化（P〉0.05），而J774A.1细胞感染后IL-33水平在12 h和24 h后略有上升（P〈0.05）。钩体感染引起THP-1和J774A.1细胞IL-1β、IL-18和IL-33升高均能被NLRP3特异性阻断剂有效阻断（P〈0.05）。结论人和小鼠巨噬细胞感染钩体后NLRP3炎症小体均发生活化并参与介导分泌炎性细胞因子，细胞因子分泌规律存在明显差异，人巨噬细胞感染钩体后IL-1β和IL-18的分泌早于小鼠巨噬细胞，且分泌水平较小鼠巨噬细胞更高。
- 王铭陈红刘英马青韦小瑜游旅唐光鹏王定明李世军周碧君
- 关键词：问号钩端螺旋体巨噬细胞炎性细胞因子
- 鸵鸟新城疫病例诊断及部分F基因特征分析
- 新城疫病毒(New castled disease virus,NDV)是副粘病毒科腮腺炎病毒属成员,能导致多种禽类发生严重的呼吸系统和神经系统疾病,致死率较高.NDV的基因组为单股负链RNA,可编码6种结构蛋白,即NP...
- 王铭周碧君文明王开功程振涛温贵兰车驰毛黎红
- 关键词：鸵鸟新城疫基因特征
- 文献传递
- 问号钩端螺旋体对J774A.1和THP-1细胞NADPH氧化酶活性及ROS产生的影响
- 2016年
- 目的：探索问号钩端螺旋体（简称钩体）对小鼠和人单核-巨噬细胞株NADPH氧化酶活性及活性氧簇（ ROS）产生的影响,了解不同宿主巨噬细胞对问号钩体的杀菌机制。方法采用问号钩体56601株感染J774A.1和THP-1细胞建立钩体细胞感染模型,光度法测定细胞NADPH氧化酶活性和超氧离子O-2水平,免疫荧光法检测细胞ROS水平变化。结果光度法检测结果显示,问号钩体赖株感染2 h、4 h、12 h和24 h后,J774A.1细胞NADPH氧化酶活性分别从感染前的0.6190μmol·min-1· mg-1上升至0.3055μmol · min-1· mg-1、6.1415μmol · min-1· mg-1、1.4871μmol·min-1·mg-1和0.9646μmol · min-1· mg-1；THP-1细胞 NADPH 氧化酶活性分别从感染前0.7235μmol·min-1·mg-1上升至0.8842μmol·min-1·mg-1、1.8971 μmol·min-1·mg-1、1.1254μmol·min-1·mg-1和0.5627μmol·min-1·mg-1；超氧离子结果显示,J774A.1细胞超氧离子水平由正常细胞的0.1890 μmol/L 分别上调至0.2363μmol/L、0.2977μmol/L、0.3240μmol/L 和0.3057μmol/L；THP-1细胞由正常细胞的0.1237μmol/L 分别上调至0.1493μmol/L、0.2490μmol/L、0.2700μmol/L和0.2727μmol/L；免疫荧光检测结果表示,钩体感染J774A.1和THP-1细胞2 h、4 h、12 h和24 h后,细胞ROS水平较正常细胞逐渐变强,24 h出现降低。结论问号钩体感染J774A.1和THP-1细胞NADPH氧化酶活性和超氧离子O-2均显著上调,且J774A.1细胞上调更明显,结果有助于揭示巨噬细胞杀灭问号钩体的分子机制。
- 李世军李沛丽王铭周碧君刘英马青韦小瑜王定明唐光鹏
- 关键词：问号钩端螺旋体巨噬细胞
