周碧君
- 作品数：624 被引量：1,724H指数：19
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- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金贵州省农业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株Nsp10的表达及鉴定
- 2012年
- 为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株非结构蛋白Nsp10,以克隆质粒pMD18-T-Nsp10/JL为模板,将Nsp10基因克隆至原核表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,对不同温度和IPTG浓度进行优化,以获得Nsp10蛋白表达的最佳条件,采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况,并通过Western blotting检测其免疫活性。结果表明,Nsp10基因成功克隆至pET-32a,有分子量约为43.4 kD的融合蛋白获得表达,重组蛋白于诱导4 h后达到高峰,IPTG浓度为0.2-1.2 mmol/L时,重组蛋白表达量无明显差异,Western blotting证实该表达蛋白具有反应原性。
- 周思旋徐健周碧君文明王开功
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 三带喙库蚊体内猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定被引量：2
- 2009年
- 【目的】调查猪场蚊虫是否能携带猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒。【方法】采集发生PRRS疫情的3个养猪场蚊虫样本,采用RT-PCR方法检测PRRS病毒核酸,取阳性蚊虫样本接种Marc-145细胞进行病毒的分离培养,以间接免疫荧光抗体技术和分子克隆技术进行病毒的鉴定。【结果】养猪场内的蚊虫主要有三带喙库蚊Culex tritaeniorhychus、凶小库蚊Culexmodestus、中华按蚊Anopheles sinensis和骚扰阿蚊Armigeres obturbans,其中三带喙库蚊占86.76%;以PRRS病毒N基因引物进行扩增,三带喙库蚊样本呈现阳性反应,而其他蚊种均为阴性。在蚊虫接种的Marc-145细胞中可见细胞融合和空泡形成等细胞病变效应;用抗PRRS病毒N蛋白抗体和羊抗猪IgG(H+L)-FITC进行间接免疫荧光染色,感染细胞呈现黄绿色荧光;以NSP2基因引物进行RT-PCR扩增、克隆与测序,发现库蚊源病毒与相应猪场猪源病毒中相应基因的序列具有较高同源性。【结论】三带喙库蚊为猪舍优势蚊种,并能携带猪繁殖与呼吸综合征病毒。
- 史开志文明周碧君王开功汪德生
- 关键词：三带喙库蚊猪繁殖与呼吸综合征病毒猪场
- 山羊痘病毒ITR基因片段的克隆与序列分析
- 山羊痘病毒反向末端重复序列(Inverted Terminal Repeat,ITR)基因位于病毒基因组的两端, 且结构完全相同的两个片段,理论上 ITR 基因片段的 PCR 扩增较位于病毒基因组中部的 P32基因更容易...
- 周碧君徐春志
- 关键词：山羊痘病毒
- 文献传递
- 山羊痘病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：13
- 2009年
- 利用DNAStar分析了GenBank中所有8株羊痘病毒全基因序列,选取位于山羊痘病毒(AY077835)基因组gp064区域约64bp的基因片段,设计并合成了一对PCR引物和一条TaqMan-MGB探针,建立了FQ-PCR和标准曲线,并利用该方法对山羊痘临床皮肤痘疹材料和人工感染动物材料进行GPV核酸检测。结果表明,构建的FQ-PCR具有良好的敏感性、特异性、稳定性和临床应用性。该方法的建立为山羊痘临床快速高效地诊断和山羊痘病毒感染羊只的发生、发展及转归研究提供了一种有效的手段。
- 程振涛岳筠李永明许乐仁王开功周碧君陈军义李俊江楠
- 关键词：山羊痘病毒荧光定量PCR
- 猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查与病原核酸检测
- 为了解贵州省猪群中猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行情况，并对临床发生的疑似PRRS疫情作出确定性诊断，本试验采用PRRS酶联免疫诊断试剂盒对非免疫猪群和免疫猪群的1254头份血清样本进行抗体检测，采用RT-PCR方法...
- 岳筠周碧君程振涛徐春志周思旋史开志李永明韦忠梅
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征血清学调查
- 文献传递
- 鹌鹑的大肠杆菌病
- 1995年
- 鹌鹑的大肠杆菌病周碧君，李永明，吴彤（贵州农学院贵阳５５００２５）１９９２年１１月，贵阳市某养殖专业户饲养的鹌鹑发生一种传染病，从１１月２～１１日１０天内共死亡鹌鹑１０００余只，死亡率约为１０％。疾病流行初期经当地兽防站检查，怀疑为巴氏杆菌病，采用青...
- 周碧君李永明吴彤
- 关键词：鹌鹑大肠杆菌病病理剖检病原分离
- 2018年贵州省部分地区高致病性禽流感H5和H7亚型免疫抗体检测分析被引量：6
- 2020年
- 为了评价贵州省高致病性禽流感的免疫效果,采用血凝试验和血凝抑制试验对2018年贵州省10个地区76个养殖场(33个散养户和43个规模化养殖场)送检的1304份禽血清样本进行高致病性禽流感H5和H7亚型免疫抗体检测.结果:(1)H5亚型免疫抗体总体合格率为68.10%(888/1304),其中冬春季节合格率为78.34%(358/457),夏秋季节合格率为62.57%(530/847);H7亚型免疫抗体总体合格率为65.57%(855/1304),冬春季节合格率为70.46%(322/457),夏秋季节合格率为62.93%(533/847).(2)检测的10个地区中,毕节市、安顺市、遵义市、贵阳市4个地区H5亚型免疫抗体合格;毕节市、贵阳市、安顺市、遵义市、黔西南州5个地区H7亚型免疫抗体合格.(3)检测的76个养殖场中,规模化养殖场H5亚型免疫抗体合格率为80.85%(587/726),有36个养殖场免疫抗体合格;散养户合格率为52.08%(301/578),有16个养殖户免疫抗体合格.规模化养殖场H7亚型免疫抗体合格率为83.19%(604/726),有35个养殖场免疫抗体合格;散养户合格率为43.43%(251/578),有17个养殖户免疫抗体合格.
- 王兵廖书丹周怡蒋山翊周碧君王开功
- 关键词：禽流感血凝试验血凝抑制试验免疫抗体
- 鸡SIgA的提取鉴定及其抗体制备被引量：1
- 2008年
- 实验采用饱和硫酸铵法从健康肉鸡胆囊收集的胆汁中粗提二聚体SIgA,继而透析粗提产物除盐,然后进行纤维素DEAE-52离子交换层析,使用紫外分光光度计测定收集液的蛋白浓度,对层析产物浓缩使其浓度≥2.0 mg/m l,最后使用SDS-PAGE进行鉴定,从电泳所得图像中可以看到清晰的两个条带,一个条带分子量在67～70 ku之间为重链,另一个条带在26～28 ku之间为轻链。进一步将纯化的鸡SIgA抗体免疫健康兔,制备得到兔抗鸡SIgA抗体。
- 韩建保王开功于洪洋周碧君文明
- 关键词：二聚体SIGA纤维素SDS-PAGESIGA
- 产气荚膜梭菌唾液酸酶研究进展被引量：1
- 2022年
- 产气荚膜梭菌是重要的人畜共患病原菌,可导致许多类型动物坏死性肠炎和肠毒素血症。产气荚膜梭菌产生多种毒素以及许多酶,该菌可产生3种唾液酸酶,包括1个内分泌唾液酸酶NanH与2个外分泌唾液酸酶NanI和NanJ。产气荚膜梭菌唾液酸酶表达调控系统(VirS/VirR 2组分信号转导系统、RevR调控系统、ReeS调控系统、NanR调控系统、VR-RNA调控系统)通过增加毒素的活性以及增强产气荚膜梭菌对肠细胞的黏附等方式在产气荚膜梭菌发病机理中发挥潜在作用。近年来,对唾液酸酶的结构和功能的研究取得了重大进展,唾液酸酶在细菌发病机理中的功能已成为研究的热点。现综述产气荚膜梭菌唾液酸酶分子结构与特性、表达调控、唾液酸酶及其抑制剂的作用,以期为进一步探索产气荚膜梭菌的发病机理与唾液酸酶抑制剂的开发和临床应用提供依据。
- 王娜段世宇程振涛程振涛文明周碧君
- 关键词：产气荚膜梭菌唾液酸酶
- 免疫压力下猪繁殖与呼吸综合症病毒变异分析
- 目的为了解连续免疫压力下PRRSV变异规律。方法以PRRSV AS株接种免疫猪后捕杀,取组织分离病毒,再接种免疫猪后捕杀分离病毒;采用PRRSV Nsp2和GP5基因特异性引物进行扩增,回收目的基因片段并克隆测序,应用生...
- 熊朝丽史开志程振涛周碧君王开功文明
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
