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应用重组慢病毒表达载体建立抑癌基因WTX稳定高表达结直肠癌SW620细胞系: 2015年; 目的构建WTX CDS区全长重组慢病毒表达载体,感染结直肠癌SW620细胞,建立WTX稳定高表达结直肠癌SW620细胞株。方法将WTX基因全长CDS区插入GV287慢病毒质粒载体,重组载体与包装载体共转染人胚肾293T细胞,收集上清、浓缩得到表达WTX的重组慢病毒。慢病毒感染结直肠癌SW620细胞,荧光显微镜初步观察感染效率,G418进一步筛选得到稳定感染细胞株。QPCR及Western blotting检测WTX过表达效率。每部分均设立相应对照。结果载体片段测序结果示成功构建了WTX重组表达载体;包装病毒滴度检测适中,提示WTX表达慢病毒包装成功;慢病毒感染结直肠癌SW620细胞后,WTX基因m RNA以及蛋白表达水平明显增高,有统计学意义,提示SW620结直肠癌细胞WTX高表达稳定株构建成功。结论建立慢病毒感染方法的结直肠癌SW620细胞WTX过表达稳定细胞株,为进一步研究WTX对结直肠癌发生、发展的作用机制提供分子生物学工具。; 马文霞贺莉刘椿张庆玲丁彦青; 关键词：CHROMOSOME 慢病毒载体稳定转染结直肠癌

白藜芦醇用于预防和治疗结直肠癌的研究进展被引量：2: 2016年; 近年来研究显示,白藜芦醇具有抗氧化、抗炎的特性,能够调节细胞内糖和神经酰胺的代谢,激活转录激活因子3和过氧化物酶体增殖物激活受体γ等抑癌因子,又可下调鼠类肉瘤病毒癌基因的表达,抑制癌细胞上皮间质转化的发生等,使得白藜芦醇在预防和治疗结直肠癌方面发挥重要作用.另外,白藜芦醇在联合治疗中显示出广阔的应用前景.; 徐家辉刘德英许志军马文霞张庆玲; 关键词：结直肠肿瘤白藜芦醇

抑癌基因WTX通过调节微丝细胞骨架稳定性抑制结直肠癌转移: 研究背景和目的肿瘤蛋白质组学技术,作为本世纪肿瘤学研究领域的新技术,在发现与肿瘤发生发展相关基因及阐明相关基因参与的信号通路、明确其影响肿瘤进展的分子机制等方面有重要作用。蛋白质组学可以实现对整条分子信号通路的逐点筛选,...; 马文霞; 关键词：结直肠癌 CDC42 细胞骨架黏着斑; 文献传递

WTX稳定敲低人结肠癌细胞及其制备方法: 本发明提供一种WTX稳定敲低人结肠癌细胞及其制备方法，其中WTX稳定敲低人结肠癌细胞的制备方法，其包括以下步骤：1)构建沉默WTX的SHRNA的质粒载体；2)以步骤1)所得的沉默WTX的SHRNA的质粒载体转染人结肠癌细...; 张庆玲马文霞刘霞; 文献传递

一种支持单启动子带动多个不同基因表达的载体构建方法: 本发明涉及一种支持单启动子带动多个基因表达的载体构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1)以PCR方法扩增以共同过渡片段连接的两个以上目标基因序列，获得包含两个以上目标基因序列的DNA片段；2)将步骤1)所得DNA片段纯化...; 张庆玲马文霞; 文献传递

WTX稳定敲低人结肠癌细胞及其制备方法: 本发明提供一种WTX稳定敲低人结肠癌细胞及其制备方法，其中WTX稳定敲低人结肠癌细胞的制备方法，其包括以下步骤：1)构建沉默WTX的SHRNA的质粒载体；2)以步骤1)所得的沉默WTX的SHRNA的质粒载体转染人结肠癌细...; 张庆玲马文霞刘霞; 文献传递

CDC42沉默对结直肠癌细胞形态的影响: 2016年; 目的根据CDC42蛋白二级结构,设计CDC42 si RNA干扰片段,构建CDC42稳定干扰sh RNA载体。观察CDC42有效沉默对结直肠癌SW480细胞形态的影响。方法根据CDC42基因CDS区序列,设计4条si RNA片段。Western blot筛选最有效沉默片段,酶切插入真核表达载体,将构建的sh RNA质粒载体,瞬时转染结直肠癌SW480细胞,QPCR及Western blot验证CDC42沉默效率;观察转染前后,SW480细胞形态变化。结果 4条si RNA转染细胞后,验证结果显示si RNA-3沉默效率大于50%,沉默效果最好,将此片段插入真核表达载体,测序结果提示CDC42 sh RNA构建成功,转染SW480细胞后,CDC42基因m RNA及蛋白水平表达明显下降,差异有统计学意义;显微镜观察CDC42沉默后,SW480细胞周边伪足伸出减少,细胞变光滑,细胞整体体积明显减小。结论成功根据基因序列设计有效沉默片段,构建CDC42稳定沉默载体,证实CDC42沉默可以逆向改变结直肠癌细胞高侵袭性形态,为研究CDC42对结直肠癌的发生、发展提供分子工具。; 贺莉马文霞张庆玲; 关键词：CDC42 结直肠癌细胞形态

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马文霞