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小鼠品系影响胚胎移植成功率的比较研究被引量：3: 2006年; 目的:探讨不同受体鼠和供体鼠品系对胚胎移植成功率的影响以及不同品系胚胎混合移植的可行性.方法:以Balb/c雄鼠和C57BL/6雌鼠杂交F1代(B6CF1)小鼠24只和昆明鼠(KM鼠)14只作为供体鼠,共取状态良好的受精卵362颗,分别或混合回种于8只B6CF1和16只KM受体鼠输卵管内,比较两种品系鼠的产仔率.结果:除同品系回种可产仔外,KM鼠和B6CF1杂交鼠受精卵交叉回种B6CF1或KM受体鼠以及两品系受精卵混合回种均可产仔.其中B6CF1受体鼠产仔率(29.0%)明显高于KM受体鼠(7.0%),B6CF1供体鼠产仔率(16.0%)也略高于KM供体鼠(11.0%);杂交B6CF1受精卵同品系回种产仔率最高(32.0%),KM鼠受精卵同品系回种产仔率仅4.0%,而B6CF1和KM鼠作为受体鼠混合回种两品系受精卵的产仔率分别为25.0%和15.0%.结论:不同品系小鼠胚胎可交叉或混合回种,小鼠胚胎移植技术不受品系限制,但同品系胚胎移植成功率更高;B6CF1作为胚胎移植实验动物明显优于KM鼠.; 张庆玲贺莉杨玉芳李祖国丁彦青; 关键词：胚胎移植小鼠品系

严重急性呼吸综合征患者病变组织中凋亡相关基因Fas/FasL的表达及其意义被引量：1: 2007年; 目的观察并探讨凋亡相关基因Fas/FasL在严重急性呼吸综合征(SARS)病变组织肺、脾、淋巴结中的表达及其在SARS发病中的作用。方法2003年3月至5月,应用免疫组织化学方法对南方医科大学南方医院病理科4例SARS患者尸检组织及正常对照组织(取自非SARS患者尸检个体)肺、脾、淋巴结进行检测。结果与正常组织相比,SARS肺组织肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、巨噬细胞;脾脏及淋巴结淋巴细胞及单核巨噬细胞Fas,FasL表达增强。结论Fas/FasL过度表达在SARS病变组织中普遍存在,提示Fas/FasL介导的凋亡途径在SARS发病过程中可能起一定作用。; 贺莉张庆玲丁彦青; 关键词：严重急性呼吸综合征 FAS/FASL

TGF-β_1在SARS患者急性肺损伤中的作用被引量：3: 2006年; 目的观察SARS急性肺损伤的组织病理学特点并探讨SARS-CoV S蛋白,TGF-β1(转化生长因子β)在SARS急性肺损伤中的作用。方法利用4例SARS尸检肺组织为研究对象,经常规HE染色及免疫组织化学检测。结果双肺广泛性实变,呈脱屑性肺泡炎及脱屑性支气管炎改变,肺透明膜形成及小灶性坏死;病变肺组织内肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞及浆液腺腺上皮细胞、单核巨噬细胞SARS-CoV S蛋白及TGF-β1均呈强阳性表达。结论肺是SARS病毒主要攻击的靶器官,严重的肺部病变是本病死亡的主要原因;TGF-β1协同病毒致病加速急性肺损伤发生。; 贺莉张庆玲丁彦青; 关键词：严重急性呼吸综合征转化生长因子Β SARS-COV S蛋白

应用重组慢病毒表达载体建立抑癌基因WTX稳定高表达结直肠癌SW620细胞系: 2015年; 目的构建WTX CDS区全长重组慢病毒表达载体,感染结直肠癌SW620细胞,建立WTX稳定高表达结直肠癌SW620细胞株。方法将WTX基因全长CDS区插入GV287慢病毒质粒载体,重组载体与包装载体共转染人胚肾293T细胞,收集上清、浓缩得到表达WTX的重组慢病毒。慢病毒感染结直肠癌SW620细胞,荧光显微镜初步观察感染效率,G418进一步筛选得到稳定感染细胞株。QPCR及Western blotting检测WTX过表达效率。每部分均设立相应对照。结果载体片段测序结果示成功构建了WTX重组表达载体;包装病毒滴度检测适中,提示WTX表达慢病毒包装成功;慢病毒感染结直肠癌SW620细胞后,WTX基因m RNA以及蛋白表达水平明显增高,有统计学意义,提示SW620结直肠癌细胞WTX高表达稳定株构建成功。结论建立慢病毒感染方法的结直肠癌SW620细胞WTX过表达稳定细胞株,为进一步研究WTX对结直肠癌发生、发展的作用机制提供分子生物学工具。; 马文霞贺莉刘椿张庆玲丁彦青; 关键词：CHROMOSOME 慢病毒载体稳定转染结直肠癌

CDC42沉默对结直肠癌细胞形态的影响: 2016年; 目的根据CDC42蛋白二级结构,设计CDC42 si RNA干扰片段,构建CDC42稳定干扰sh RNA载体。观察CDC42有效沉默对结直肠癌SW480细胞形态的影响。方法根据CDC42基因CDS区序列,设计4条si RNA片段。Western blot筛选最有效沉默片段,酶切插入真核表达载体,将构建的sh RNA质粒载体,瞬时转染结直肠癌SW480细胞,QPCR及Western blot验证CDC42沉默效率;观察转染前后,SW480细胞形态变化。结果 4条si RNA转染细胞后,验证结果显示si RNA-3沉默效率大于50%,沉默效果最好,将此片段插入真核表达载体,测序结果提示CDC42 sh RNA构建成功,转染SW480细胞后,CDC42基因m RNA及蛋白水平表达明显下降,差异有统计学意义;显微镜观察CDC42沉默后,SW480细胞周边伪足伸出减少,细胞变光滑,细胞整体体积明显减小。结论成功根据基因序列设计有效沉默片段,构建CDC42稳定沉默载体,证实CDC42沉默可以逆向改变结直肠癌细胞高侵袭性形态,为研究CDC42对结直肠癌的发生、发展提供分子工具。; 贺莉马文霞张庆玲; 关键词：CDC42 结直肠癌细胞形态

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贺莉