张梦岩
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 2014—2015年我国华东部分地区猪流行性腹泻病毒的检测及S基因的序列分析被引量：5
- 2016年
- 采用RT-PCR方法对2014年至2015年送至实验室的104份腹泻仔猪小肠组织病料进行检测,结果显示42份为猪流行性腹泻病毒（PEDV）阳性,选择不同地区的7份阳性病料进行S基因克隆和测序,并与Gen Bank中已发布的PEDV S基因比对分析。核苷酸和氨基酸比对结果显示,7株流行毒株S基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别是98.1%～99.2%和97.6%～99.1%。该7株流行毒株与经典毒株CV777和DR13核苷酸序列的同源性分别为94.0%～94.2%和93.9%～94.1%,氨基酸序列的同源性分别为93.1%～93.6%和92.5%～93.1%。S基因进化树分析结果表明,根据S基因的变异情况PEDV可以分为3个型,本试验分析的7株PEDV流行毒株均属于Ⅲ型,与2012年以来中国流行毒株的亲缘关系较近,与国外传统毒株和中国较早分离到的毒株的亲缘关系较远。
- 王广操陆倩倩张梦岩许长萌王志建王先炜
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S基因遗传变异分析
- 猪细小病毒3型VP2蛋白主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：1
- 2015年
- 为建立检测猪细小病毒3型(PPV3)的间接ELISA方法,本研究选取PPV3 VP2多表位亲水区序列设计引物,扩增并原核表达该基因片段,以表达的重组蛋白作为包被抗原建立了PPV3间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该检测方法仅对PPV3血清检测为阳性,与PPV1、PPV2、猪瘟病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒等的标准阳性血清均无交叉反应,具有较强的特异性;批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有良好的重复性。本研究为临床上PPV3的检测提供了血清学检测手段。
- 王广操崔鹏超何玉张梦岩苑文涛王先炜
- 关键词：VP2蛋白原核表达间接ELISA
- 猪细小病毒2型VP蛋白主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2015年
- 为了有效监测猪细小病毒2型(PPV2)的抗体水平,选择PPV2VP蛋白主要亲水区及高抗原指数区进行原核表达。以表达的重组tVP蛋白为包被抗原建立了检测PPV2抗体的间接ELISA。优化后的反应条件为:抗原包被浓度为0.8μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶100,酶标二抗的工作浓度为1∶20 000,检测的临界值为0.400 5(D450nm≥0.400 5判定为阳性)。特异性试验证明,与猪细小病毒1型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、口蹄疫病毒O型血清抗体无交叉反应,批内、批间重复性试验变异系数均小于10%。应用此方法对采自江苏省的480份临床血清样本进行了检测,PPV2抗体阳性率为31%。试验结果表明,tVP蛋白能很好地获得表达,以此蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA具有较高的特异性和敏感性,可以用于临床血清PPV2抗体的检测。
- 何玉王广操张梦岩李玉峰白娟姜平王先炜
- 关键词：原核表达间接酶联免疫吸附试验
