周铭
- 作品数：13 被引量：15H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省科技统筹创新工程计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 陕西榆林某羊场羊口疮病毒的分离鉴定被引量：4
- 2016年
- 为获得陕西榆林地区羊口疮病毒野毒株,以榆林地区某羊场疑似羊口疮(Orf)的山羊口唇部结痂为材料,将结痂研磨悬液接种于犊牛睾丸原代细胞进行传代培养,通过特征性细胞病变(CPE)观察、PCR检测、动物回归试验等对分离的毒株进行鉴定。结果表明,经研磨的病料悬液接种于犊牛睾丸原代细胞后,盲传至第4代时产生细胞病变,测得病毒滴度为10^(7.66) TCID_(50)/mL。对分离毒株的B2L基因克隆测序、同源性对比分析结果显示,该毒株与与国内报道的多株羊口疮毒株核苷酸序列均具有较高的同源性,其中与甘肃株(KC485343.1)福建株(KC568399.1)的同源性均达到99%。用纯化病毒液划痕接种2月龄羔羊后,在其唇部和腹股沟内侧出现丘疹和脓疱等ORFV感染的典型的羊口疮症状。表明成功获得了羊口疮病毒陕西榆林株。
- 周铭岳进华刘鹤媛高洋李雯丽杨启明陈德坤
- 关键词：羊口疮病毒聚合酶链反应动物回归试验
- 羊口疮病毒文登株和石林株毒力致弱及毒力相关基因的生物信息学分析
- 羊口疮（Contagious pustular dermatitis,CPD）,也被称作接触传染性脓疱皮炎,是由羊口疮病毒（Orf virus,ORFV）引起的一种使山羊、绵羊及一些野生反刍动物等发生传染性脓疮的动物传染...
- 周铭
- 关键词：羊口疮生物信息分析
- 文献传递
- 羊口疮病毒刺激山羊淋巴细胞增殖及细胞因子产生特性的研究被引量：1
- 2015年
- 为研究促炎性细胞因子IL-17是否参与羊口疮炎症的发生,用羊口疮强、弱毒株分别体外刺激山羊外周血单个核淋巴细胞(PBMCs),采用real-time PCR方法检测IL-17及与Th17细胞分化并活化相关的细胞因子mRNA水平。结果表明用羊口疮病毒强毒株刺激山羊PBMCs后,IL-17转录水平升高;与Th17细胞分化并活化相关的细胞因子如TGF-β、IL-1β、IL-6和IL-23P19转录水平变化明显。证明羊口疮病毒强毒株能刺激羊PBMCs增殖,使初始T细胞分化为Th17细胞并活化分泌IL-17,从而介导炎症反应。
- 杨雯昱周铭岳进华霍宁宁刘鹤媛陈德坤
- 关键词：羊口疮病毒IL-17免疫应答炎症
- 一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法
- 本发明涉及生物技术领域，提供一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明以完整的伪结核棒状杆菌菌体作为包被抗原，建立间接ELISA检测方法，检测血清中是否含有抗伪结核棒状杆菌抗体，判断山羊是否感染伪结核...
- 陈德坤霍宁宁刘鹤媛周铭
- 山羊IFN-γ免疫血清制备及抗体ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2016年
- 摘要：为制备山羊干扰素-γ（IFN-γ）免疫血清并建立山羊IFN-γ抗体ELISA检测方法，以原核表达的山羊γIFN重组蛋白（rIFN-γ）为材料，免疫小鼠制备免疫血清；通过对测定不同的抗原包被浓度及包被时间，酶标抗体稀释度，免疫血清的孵育时间等条件的优化建立检测抗体效价的ELISA检测方法，并采用建立的方法测定免疫血清的抗体效价。结果显示，rIFN-γ抗原包被浓度为10μg／mL，4℃包被12h；酶标抗体稀释度为1：5000；免疫血清孵育时间为60min，可以得到最佳ELISA的检测结果。重复试验显示该方法变异系数（CV）在1．5％～5％之间。采用建立的方法测得免疫小鼠免疫血清效价为10^7。该ELISA检测方法灵敏高，稳定性好，为山羊IFN-γ抗体检测提供了技术支持。
- 刘鹤媛周铭岳进华张洪杰陈德坤
- 关键词：山羊免疫血清酶联免疫吸附试验
- 羊口疮病毒低含量样品的病毒分离方法
- 本发明涉及羊口疮病毒低含量样品的病毒分离方法。传统的羊口疮病毒都是从结痂和患病羊的口唇皮屑中分离的，分离周期长，需要盲传5代后才会有病变，同时，病料来源范围小，限制的羊口疮病毒的研究工作。本发明使用特有的Virus ho...
- 陈德坤周铭刘方刘鹤媛高洋赵燕青
- 文献传递
- 特异性鉴别羊乳中掺加牛乳的单克隆抗体及其制备方法
- 本发明涉及特异性鉴别羊乳中掺加牛乳的单克隆抗体及其制备方法。市场上常出现羊乳中掺加牛乳的现象，以次充好，影响羊乳质量。本发明以脱脂牛乳为抗原，免疫BALB/c小鼠，分离脾细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合，筛选出具有稳定...
- 陈德坤刘鹤媛张洪杰桑锋锋周铭岳进华霍宁宁杨雯昱高洋赵燕青
- 文献传递
- 一种羊口疮病毒ELISA检测试剂盒的制备方法
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种羊口疮病毒ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明针利用实验室现有两株杂交瘤细胞D4和G9，分别制备并纯化小鼠腹水，建立双抗夹心ELISA检测方法，并组装成试剂盒。该试剂盒能够特异性检测...
- 陈德坤刘鹤媛周铭
- 文献传递
- 一种羊口疮病毒的快速分离方法
- 本发明涉及一种羊口疮病毒的快速分离方法，具体涉及利用牛睾丸细胞从患病羊及隐性带毒羊的外周血中分离羊口疮病毒的方法。其利用牛睾丸细胞，从羊口疮发病羊及隐性带毒羊的外周血中分离羊口疮病毒，为羊口疮病毒的分离提供了方便快捷的方...
- 陈德坤刘方周铭刘鹤媛岳进华高洋赵燕青
- 文献传递
- 一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法
- 本发明涉及生物技术领域，提供一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明以完整的伪结核棒状杆菌菌体作为包被抗原，建立间接ELISA检测方法，检测血清中是否含有抗伪结核棒状杆菌抗体，判断山羊是否感染伪结核...
- 陈德坤霍宁宁刘鹤媛周铭
- 文献传递
