- 阻断ATM/Chk2通路减轻心肌缺氧性损伤的机制探讨
- 背景:急性心肌梗死(Acutmyocardial infarction,AMI)是一种在动脉粥样硬化基础上,因血栓形成或斑块破裂阻塞血管而导致的心肌急性缺血缺氧性疾病,在全球范围内发病率和死亡率极高,严重危害人类健康。大...
- 许瑞
- 关键词:心肌梗死细胞损伤细胞病理学
- 低氧工作站建立大鼠原代心肌细胞缺氧模型
- 目的:分离新生大鼠原代心肌细胞(NRVMs),低氧工作站建立该细胞物理法缺氧模型。方法:取出生3日内Wistar大鼠心脏,胶原酶消化及Percoll密度梯度离心法分离NRVMs,免疫荧光检测心肌细胞特异性肌钙蛋白Ⅰ(cT...
- 许瑞
- 关键词:缺氧模型
- 低氧工作站建立大鼠原代心肌细胞缺氧模型被引量:1
- 2016年
- 心肌梗死、缺血再灌注损伤等多种心血管疾病的发生和发展过程中多伴有细胞缺氧,进而引起细胞损伤,影响心正常生理功能.体外心肌细胞缺氧模型能够较好排除神经、体液等因素及个体差异性的影响,更加有利于对缺氧性心肌损伤发生机制的研究,为探讨如何保护缺氧心肌提供重要理论基础.因此,建立体外细胞缺氧模型是从细胞和分子水平研究该类疾病的重要方法,在多种缺血缺氧性疾病中均得到广泛应用.目前,国内外应用较多的心肌细胞缺氧模型包括物理法缺氧模型和化学法缺氧模型.如何更好地模拟体内真实缺氧环境,建立更加稳定、理想的缺氧模型,一直是该领域研究的关键环节之一.
- 许瑞陈希蒋易楠祝伟娜王耀辉
- 关键词:原代心肌细胞缺氧模型工作站缺氧性心肌损伤缺血缺氧性疾病
- 密度梯度离心法同时分离新生大鼠原代心肌细胞与成纤维细胞被引量:8
- 2015年
- 本文旨在探讨一种改良的同时分离新生大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞的方法,以建立良好的原代心肌细胞及成纤维细胞研究模型。无菌状态下取Wistar乳鼠(出生不超过2天)心室,用II型胶原酶消化,控制消化时间及次数、搅拌速度、离心次数和速度等,结合Percoll密度梯度离心法分离心肌细胞及成纤维细胞,进行体外培养,观察细胞形态,继而用0.2%台盼蓝染色检测细胞存活率,免疫荧光染色法检测心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,c Tn I)、波形蛋白(Vimentin)及α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,分别用于鉴定心肌细胞和成纤维细胞纯度。结果显示,本方法5次分离的心肌细胞平均存活率达92%,纯度达95%以上,细胞生长状态良好,可见贴壁自发搏动;成纤维细胞平均存活率达96%,纯度达94%。本方法能同时获得新生大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞,具有很高的产量、存活率及纯度,且操作简便,耗时短,重复性好,是一种较为理想的原代细胞分离、培养方法,可满足各种后续实验要求。
- 陈希许瑞蒋易楠祝伟娜王耀辉
- 关键词:心肌细胞成纤维细胞