潘俊杰
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省研究生培养创新工程项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 昆虫细胞制备AAV-ITR基因表达微载体被引量：1
- 2015年
- AAV-ITR基因表达微载体是只含有腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)倒置末端重复序列(Inverted terminal repeats,ITR)、基因表达顺式元件和目的基因,而不含有其他外源DNA序列的双链或单链DNA。本研究利用杆状病毒表达系统,制备得到两种重组杆状病毒Bac-ITR-EGFP和Bac-inrep,并将二者的P3代病毒共同感染昆虫细胞Spodoptera frugiperda(Sf9),抽提小分子量DNA,获得AAV-ITR-EGFP基因表达微载体,2×107的Sf9细胞抽提可以得到100μg AAV-ITR-EGFP基因表达微载体,核酸电泳显示AAV-ITR-EGFP基因表达微载体主要以单体和二聚体的形式存在。将AAV-ITR-EGFP基因表达微载体通过polyethylenimine(PEI)转染HEK 293T细胞,24 h后荧光显微镜观察有EGFP表达,48 h后达到高峰,转化效率达到65%。
- 李泰明潘俊杰祁静张春
- 关键词：杆状病毒表达系统非病毒载体
- 一种测定病毒滴度的方法
- 本发明提供了一种测定病毒滴度的方法，利用病毒感染细胞的侧向角散射的变化测定病毒的滴度。本发明的方法，避免了现有技术中测定病毒滴度普遍存在的判断结果主观性过强、测定结果不够准确的问题，可以客观的记录数据，其测定结果具有优越...
- 祁静刘涛张春潘俊杰
- 文献传递
- 一种测定病毒滴度的方法
- 本发明提供了一种测定病毒滴度的方法，利用病毒感染细胞的侧向角散射的变化测定病毒的滴度。本发明的方法，避免了现有技术中测定病毒滴度普遍存在的判断结果主观性过强、测定结果不够准确的问题，可以客观的记录数据，其测定结果具有优越...
- 祁静刘涛张春潘俊杰
- AAV-ITR基因表达微载体在小鼠体内表达
- 2016年
- 旨在比较AAV-ITR基因表达微载体及其单体在小鼠不同部位的表达差异,将相同拷贝数的AAV-ITR基因表达微载体和p UC57-minivector-EGFP分别转入小鼠脑组织,另外将相同拷贝数的AAV-ITR基因表达微载体单体,AAV-ITR基因表达微载体和p UC57-minivector-EGFP转入小鼠骨骼肌中,比较不同时期组织中的残余分子数量。荧光定量PCR、显微荧光观察以及荧光平均光密度和荧光灰度值分析表明,相同拷贝数的AAV-ITR基因表达微载体单体比AAV-ITR基因表达微载体和p UC57-minivectorEGFP具有更高的转染效率,其稳定性也优于AAV-ITR基因表达微载体。结果显示,AAV-ITR基因表达微载体单体在动物体内具有高效表达安全稳定的特点,有望成为基因治疗中一种安全可靠,稳定高效的新型载体。
- 李泰明许麒麟潘俊杰刘晓玫张春
- 关键词：RT-PCR组织切片
