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张春: 作品数：32 被引量：30H指数：5; 供职机构：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏高校优势学科建设工程项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术经济管理更多>>

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制备外源功能基因定点整合的人神经干细胞的方法: 本发明公开了一种制备外源功能基因定点整合的人神经干细胞的方法，所述细胞株为定点整合有外源功能基因，且能稳定表达外源功能基因的人神经干细胞株；通过构建一种高效表达外源功能基因的质粒载体，然后用此质粒包装的重组腺相关病毒(r...; 张春张金菊张云刘晓玫栾佐蓝文俊; 文献传递

一种测定病毒滴度的方法: 本发明提供了一种测定病毒滴度的方法，利用病毒感染细胞的侧向角散射的变化测定病毒的滴度。本发明的方法，避免了现有技术中测定病毒滴度普遍存在的判断结果主观性过强、测定结果不够准确的问题，可以客观的记录数据，其测定结果具有优越...; 祁静刘涛张春潘俊杰

重组Sushi多肽的表达质粒体系、其构建方法及应用: 本发明公开了一种重组Sushi多肽的表达质粒体系、其构建方法及应用。作为本发明技术方案的典型实施方案之一，其可以包括：利用蛋白质体外剪切系统，在特定位点断开鲎C因子中能与内毒素结合的功能片段，分别连接到断裂蛋白质内含子的...; 张春王影影齐兴梅刘涛祁静; 文献传递

重组鲎三因子试剂及其检测内毒素的方法: 本发明公开了一种重组鲎三因子试剂，其包含如下组分：无内毒素水；无热源Tris缓冲液；吐温‑20；荧光底物；重组鲎C因子；重组鲎B因子；重组鲎凝固酶原因子。本发明提供一种重组鲎三因子试剂及其检测内毒素方法，通过利用昆虫杆状...; 张春张轶岭祁静刘晓玫

基于AAV-ITR的基因表达微载体及其构建方法和应用: 一种基于AAV-ITR的基因表达微载体及其构建方法和应用。该微载体包括用于表达外源基因的基因表达框，所述基因表达框两端分别连接有AAV基因组的ITR序列。其中，所述基因表达框优选采用线性表达框，包含在两段ITR序列之间依...; 张春平菡刘晓玫

AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法: 本发明提供了一种AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法，其包括：构建含有外源基因的第一重组质粒，并将其包装得到第一rAAV；构建含有AAV Rep78的第二重组质粒，并将其包装得到第二rAAV；第一rAA...; 刘晓玫张春姜岩袁运魏静王东鑫王飞飞魏峥曹金晶; 文献传递

稳定分泌近红外荧光标记外泌体的乳腺癌细胞株的制备: 本发明公开了一种稳定分泌近红外荧光标记外泌体的乳腺癌细胞株的制备方法，通过构建一种融合表达近红外荧光iRFP682蛋白和CD63蛋白的质粒载体，然后用此质粒包装的重组腺相关病毒(rAAV)和辅助病毒以一定比例共感染人乳腺...; 张宗德张春蓝文俊刘晓玫潘丽萍; 文献传递

人细胞基因组AAVS1位点基因定点整合率的荧光定量PCR检测方法: 2018年; 基因疗法是将基因导入靶细胞内,以纠正缺陷和异常基因引起的疾病的治疗方法。目前,多个基因治疗药物已经进入临床研究阶段或已上市,为癌症、罕见病、神经性疾病等多个领域的疾病治疗带来了希望。基因治疗中最关键的步骤就是如何将外源基因准确安全地导入宿主细胞。腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)载体是当前最受欢迎的人类基因治疗载体之一,它是唯一能定点整合到人类基因组特定位点的病毒载体。AAV定点整合的位点AAVS1 (the adeno-associated virus site 1)已经被证明是安全的基因整合位点。本实验以Rep蛋白介导基因定点整合至人T淋巴细胞基因组AAVS1位点,随后采用标准曲线定量的方法,对混合细胞克隆AAVS1位点的定点整合率进行定量。实验进行两轮PCR,首先通过常规PCR扩增包含ITR-AAVS1结合位点的序列,然后取标准品和检测样本第一轮PCR产物作为模板,进行第二轮定量PCR。通过本实验中的研究方法可以简单快速地定量分析AAVS1定点整合率。; 张轶岭王飞飞张春李文生; 关键词：荧光定量PCR

基于双链微载体将CAR基因定点整合至T细胞AAVS1位点的方法: 本发明公开了一种基于双链微载体将CAR基因定点整合至T细胞AAVS1位点的方法，其包括用来携带CAR基因的双链微载体，命名为CELiD<Sup>CAR</Sup>；帮助微载体定点整合至人19号染色体AAVS1位点的质粒，...; 张春张云刘晓玫张轶岭; 文献传递

表达重组人FVIII的整合质粒、细胞株及其构建方法和应用: 一种表达重组人FVIII的整合质粒、细胞株及其构建方法和应用。该整合质粒包括：rAAV质粒骨架，以及连接于rAAV质粒骨架内的两个ITR元件之间的B区缺失的FVIII基因。进一步的，该整合质粒中还可包含：GFP基因，用作...; 刘晓玫张春; 文献传递