刘秀丽
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：北京生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌重组腺病毒双价疫苗的构建及免疫学评价被引量：4
- 2004年
- 幽门螺杆菌 (Hp)是导致胃炎、消化道溃疡和胃癌的的主要病原菌 .利用基因重组技术 ,成功将Hp的ureB和hspA基因融合 .将ureB hspA融合基因成功构建到腺病毒载体上 .检测结果表明 ,该重组腺病毒具有侵染真核细胞能力 ,且能在真核细胞中表达目标抗原 .以血清中IgG和新鲜粪便中sIgA ,评价其免疫效果 ,结果显示 。
- 刘秀丽刘纯杰陶好霞李淑琴李勣张兆山
- 关键词：幽门螺杆菌重组腺病毒尿素酶B热休克蛋白A体液免疫
- CHO细胞表达人源μ型阿片受体及其活性分析被引量：1
- 2004年
- μ型阿片受体在阿片类药物镇痛与成瘾中发挥重要作用 .从人脑组织总RNA通过一次反转录和两次PCR法扩增获得 μ型阿片受体的cDNA ,将其克隆至pcDNA3 1 (+)中 ,转染CHO细胞后 ,筛选单克隆细胞株并制备膜受体 ,检测重组细胞株表达的 μ型阿片受体与特异性配体的结合能力 .通过饱和性结合和竞争性结合试验证实 ,重组细胞株表达的 μ型阿片受体与天然的 μ型阿片受体具有基本一致的生物学特性 。
- 刘威段海清李淑琴刘秀丽张兆山
- 人源μ型阿片受体的cDNA克隆及转染CHO细胞的活性分析
- 2004年
- μ型阿片受体是阿片类药物镇痛与成瘾的分子基础。从人脑组织总RNA通过RT PCR扩增获得 μ型阿片受体的cDNA ,将其克隆至pcDNA3 1(+)中 ,用酶切鉴定正确的重组质粒转染CHO细胞。筛选的单克隆细胞株 ,检测阳性的细胞克隆表达的 μ型阿片受体介导胞内信号转导的能力。通过与激动剂和拮抗剂的信号转导分析证实 ,阳性的细胞克隆表达的 μ型阿片受体与天然的 μ型阿片受体具有基本一致的生物学特性 ,因此可以用来作为高效镇痛低成瘾药物筛选平台的候选细胞株。
- 刘威段海清李淑琴刘秀丽张兆山
- 关键词：Μ型阿片受体信号转导
- 幽门螺杆菌HspA亚基的表达与纯化
- 2005年
- 目的:利用原核表达载体高效表达幽门螺杆菌热休克蛋白A(HspA),并进行纯化. 方法:PCR扩增hspA基因,将其克隆至原核表达载体pET22b,pQE-60,pGEX-4T-2中,转化大肠杆菌,经IPTG诱导后,SDS—PAGE分析表达.利用镍离子亲和层析对表达产物进行纯化.免疫印迹检测蛋白的抗原性. 结果:PCR扩增得到hspA基因,在载体pQE-60中以HspA和HspA-His6两种形式得到表达,表达量高达菌体总蛋白的40%以上.经镍离子亲和层析后,纯化率分别为88.63%和86.32%,但HspA—His6在纯化过程中发生降解.免疫印迹实验表明,HspA和HspA-His6都有很好的抗原性. 结论:实现了HspA蛋白的高效表达和纯化,为幽门螺杆菌HspA亚单位疫苗的免疫实验奠定基础.
- 刘秀丽张兆山陶好霞展德文刘纯杰
- 关键词：幽门螺杆菌A亚基HSPA免疫印迹检测纯化过程
