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基于UPLC-LTQ-Orbitrap-MS和网络药理学探讨石榴花改善脂质沉积的作用机制被引量：1: 2023年; 目的:探讨石榴花改善脂质沉积(lipid deposition,LD)的作用机制。方法:CCK-8法测定石榴花提取物(pomegranate flower extract,PFE)及棕榈酸(palmitic acid,PA)对细胞活力的影响,采用PA诱导HepG2细胞LD模型,实验分为PFE组、空白组(NC组)和模型组(PA组),油红O染色法测定细胞内脂质含量,GPO-PAP法测定细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)含量。UPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术鉴定差异代谢物并进行代谢通路富集。采用网络药理学方法筛选关键成分与核心靶点,并进行GO和KEGG富集分析。利用Autodock软件对关键成分与核心靶点进行分子对接,采用q-PCR检测PIK3CA、AKT1、MAPK、STAT3 mRNA的表达。结果:与NC组比较,PA组细胞内脂质、TC、TG含量显著升高(P<0.01),33种代谢物有显著差异(P<0.05);与PA组比较,PFE组细胞内脂质、TC、TG含量显著降低(P<0.05),10种代谢物显著回调(P<0.05)。33种差异代谢物富集到与LD关联性强的甘油磷脂代谢通路。网络药理学得到PF的关键成分为白桦脂酸、木犀草素等,核心靶点为MAPK1、PIK3CA、AKT1、STAT3等。交集靶点主要通过调控PI3K-AKT、HIF-1等信号通路发挥治疗作用。关键成分与核心靶点均有较好的结合能力。q-PCR实验表明PFE可抑制HepG2细胞中MAPK、PIK3CA、AKT1 mRNA表达,促进STAT3的mRNA表达。结论:石榴花可改善HepG2细胞LD,代谢组学和网络药理学发现其作用机制可能与调节甘油磷脂代谢、MAPK、STAT3基因表达及PI3K-AKT等信号通路有关。; 张凌田晓丹陈志曾艳丽廖佳伟何小燕华钰萍赵鹏金晨; 关键词：石榴花脂质沉积 HEPG2细胞代谢组学网络药理学

淫羊藿苷干预ConA诱导体外BRL-3A细胞损伤的机制被引量：1: 2015年; 目的:研究淫羊藿主要成分淫羊藿苷对ConA(刀豆蛋白)致体外BRL-3A细胞(大鼠肝细胞)损伤的影响和作用机制。方法:体外培养BRL-3A细胞,分别加入25、50、100μmol/L的淫羊藿苷24h,再以100μg/ml的ConA诱导损伤24h,MTT法检测BRL-3A细胞的存活率,考察细胞上清液中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、超氧化物歧化酶、丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶含量,以荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧含量,免疫细胞化学方法检测肝细胞Bax、Bcl-2表达水平。结果:淫羊藿苷显著提高ConA刺激后BRL-3A的存活率,25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L淫羊藿苷均明显降低谷草转氨酶的含量;100μmol/L淫羊藿苷明显降低谷丙转氨酶的含量,并明显升高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性,降低丙二醛、活性氧含量,增强Bcl-2的表达,降低Bax的表达。结论:淫羊藿苷能明显改善ConA诱导的BRL-3A细胞损伤,作用机制与淫羊藿苷抗氧化相关。; 曹怡刘波徐彭周年陈志候阳阳; 关键词：淫羊藿苷 CONA 氧化应激

鸡血藤化学成分、药理作用研究进展及其质量标志物(Q-Marker)预测被引量：13: 2023年; 鸡血藤Spatholobi Caulis为藤茎类中药,在我国南方地区及东南亚国家药用历史悠久。研究表明鸡血藤成分复杂,主要包括黄酮类、苯丙素类、酚酸类等成分,具有调节血液系统、抗氧化、抗肿瘤及抗病毒等活性。通过对鸡血藤化学成分和药理作用进行综述,基于化学成分特有性、药性、药效、入血成分和成分可测性对鸡血藤的质量标志物(quality marker,Q-Marker)进行预测,表明儿茶素、染料木素、芒柄花素等黄酮类成分及原儿茶酸和没食子酸等酚酸类、芦荟大黄素等蒽醌类、3-羟基豆甾-5-烯-7-酮等甾体类、白芷内酯和spasuberol C等香豆素类可作为鸡血藤的主要Q-Marker,为鸡血藤的质量评价提供科学依据。; 廖佳伟金晨陈志田晓丹曾艳丽何小燕张凌; 关键词：鸡血藤染料木素芒柄花素原儿茶酸芦荟大黄素

基于网络药理学和分子对接分析丰城鸡血藤治疗乳腺癌的分子靶点和机制被引量：11: 2022年; 目的利用网络药理学、分子对接技术并进行体外实验验证,探讨丰城鸡血藤有效成分对应靶基因治疗三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的作用机制。方法基于文献研究并结合数据库筛选得到丰城鸡血藤主要活性成分以及TNBC相关靶标寻找交集基因构建蛋白相互作用(PPI)网络图,根据相互关系大小筛选核心靶标。构建“中药-成分-靶点-疾病”核心靶标相互作用网络模型。将交集靶点进行基因GO功能分析和KEGG通路富集分析。最后将筛选出的成分与靶标进行分子对接以及体外实验验证。结果收集到丰城鸡血藤38个活性成分,相关潜在靶点388个,TNBC靶点3919个,丰城鸡血藤治疗TNBC靶点277个。主要作用于PIK3R1、PIK3CA、MAPK1、AKT1、SRC等多个靶标,在体外实验中可知,丰城鸡血藤三氯甲烷部位萃取物以及单体化合物木犀草素、白桦脂酸对细胞增殖均有一定的抑制作用。在给药浓度范围内各组均能抑制VEGFA、AKT、PIK3CA、CDK1、CDK4的表达。结论基于网络药理学和分子对接方法,对丰城鸡血藤治疗TNBC可能的靶标和信号通路进行探讨,并进行体外验证实验,进一步验证了网络药理学的预测。; 李洵珣金晨陈康程玉瑶张庆熙田晓丹陈志张凌; 关键词：网络药理学分子对接丰城鸡血藤三阴性乳腺癌靶点

石榴花对棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质沉积的改善作用及机制研究被引量：1: 2023年; 目的探讨石榴花提取物(Punica granatum flower extract,PFE)及其活性成分白桦脂酸和木犀草素对棕榈酸诱导的人肝癌HepG2细胞脂质沉积的改善作用和作用机制。方法通过CCK-8法测定棕榈酸、辛伐他汀、PFE、白桦脂酸和木犀草素对HepG2细胞活力的影响,以确定后续给药剂量。利用500μmol/L棕榈酸建立HepG2细胞脂质沉积模型,同时给予PFE(50、100、200 mg/L)、白桦脂酸(40、80、160μmol/L)、木犀草素(40、80、160μmol/L)进行干预,采用油红O染色法测定细胞内脂质含量;GPO-PAP法测定细胞内三酰甘油(triglyceride,TG)和总胆固醇(Total cholesterol,TC)含量;流式细胞仪检测早、晚期凋亡细胞率;Western blotting检测凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)、Janus激酶2/信号传导及转录激活因子3(Janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)通路相关蛋白表达;qRT-PCR测定PI3K、Akt、JAK2、STAT3的m RNA表达。结果选取对细胞活力无显著影响的PFE(50、100、200 mg/L)、白桦脂酸(40、80、160μmol/L)和木犀草素(40、80、160μmol/L)进行后续实验。与对照组比较,模型组细胞内脂质、TC和TG含量均显著升高(P<0.001),细胞凋亡率显著升高(P<0.001),PI3K、Akt、Bax蛋白和PI3K、Akt mRNA表达水平均显著升高(P<0.001),JAK2、STAT3、Bcl-2蛋白和JAK2、STAT3 mRNA表达水平均显著下降(P<0.001)。与模型组比较,各给药组细胞内脂质、TC和TG含量均显著降低(P<0.05、0.01、0.001),细胞早、晚期凋亡率显著下降(P<0.01、0.001),细胞中PI3K、Akt、Bax蛋白和PI3K、Akt m RNA表达水平均显著降低(P<0.05、0.001),JAK2、STAT3蛋白和m RNA表达水平均显著升高(P<0.05、0.01、0.001),PFE组和白桦脂酸组Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.01、0.001)。结论 PFE、白桦脂酸和�; 田晓丹金晨陈志曾艳丽廖佳伟何小燕华钰萍赵鹏张凌; 关键词：石榴花脂质沉积 HEPG2细胞棕榈酸白桦脂酸

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陈志

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