通过对桂林猫儿山原生态地区采集的166份土样样品进行筛选,分离到含有新的杀虫晶体蛋白基因、所产抑菌物质热稳定性好的苏云金芽胞杆菌菌株。采用温度筛选法对土样进行初筛和复筛,结合SDS-PAGE分析和牛津杯法抑菌试验来挑选目的菌株。从采集的166份天然土壤样品中分离出49株苏云金芽胞杆菌,出菌率29.5%。光学显微镜观察发现有大菱形、小菱形和不规则晶体类型。用SDS-PAGE分析了其中14株野生菌株的杀虫晶体蛋白表达谱,发现14株均表达了130和65 k D的蛋白,其中有7株表达约90 k D蛋白、2株表达35 k D和6株表达30 k D的蛋白。对其中8株表达不同分子量蛋白的菌株发酵44h,取其发酵液的上清液进行抑菌活性成分热稳定性检测,发现其热稳定性相差较大,95℃水浴加热2 h处理后,除247-1外,其他几株产生的抑菌物质全部失活。菌株247-1不仅产生耐热的Zwittermicin A,可能还产生其他热敏感性的抑菌成分。
本研究以提高深红虫草Cordyceps cardinalis C033次级代谢产物卵孢菌素的产量为目标,对其产卵孢菌素的培养基进行筛选,并利用单因素和正交试验对深红虫草产卵孢菌素的发酵条件进行了优化。结果表明,深红虫草产卵孢菌素的最适发酵培养基为马铃薯‐蛋白胨‐葡萄糖培养基,最佳发酵参数为:发酵时间6d,培养基初始p H 7.0,接种量6%,培养温度24℃,每500m L锥形瓶装液量100m L,摇瓶转速120r/min。用最佳培养基进行发酵条件优化后获得卵孢菌素448.70μg/m L,产量是优化前的10.14倍。该研究结果为菌株C033在农业害虫防治上的应用奠定了基础。
