目的:基于网络药理学预测心律康宁方治疗缓慢性心律失常的作用机制并初步进行细胞生物学验证。方法:通过中药分子机制的生物信息学分析工具(Bioinformatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine,BATMAN-TCM)、人类基因的综合数据库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)等数据库分别对心律康宁方和BA进行分析靶点预测,并将二者获得的靶点基因取交集,获取心律康宁方治疗缓慢性心律失常(Bradyarrhythmia,BA)的靶点基因,通过蛋白互作分析,获取核心靶点基因,通过基因本体论(The Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,获取关键基因和靶点通路;制备含有不同浓度的心律康宁含药血清,利用Langendorff灌流系统急性分离单个大鼠的心肌细胞,加入含药血清,初步验证预测结果。结果:药物靶点1591个,疾病靶点1886个,交集靶点467个,KEGG通路主要通过钙信号通路、心肌中环磷酸腺苷(Cyclic Adenosine Monophosphate,cAMP)信号通路、丝裂原活化的蛋白激酶(Mitogen-activated Protein Kinase,MAPK)、神经活性配体-受体相互作用传导,GO主要涉及分子功能、细胞成分、生物过程三方面。动物实验验证表明,与正常血清对照组相比,心律康宁低、中、高剂量含药血清对静息细胞胞浆Ca^(2+)平均荧光强度有显著的增强作用(P<0.05),前后差值两两比较(P<0.05),有剂量依赖性。结论:网络药理学预测结果较为可靠,心律康宁能促进心肌细胞自发的外钙内流,具有治疗BA的潜在作用。
