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孙晓霞: 作品数：19 被引量：161H指数：9; 供职机构：河北出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目博士科研启动基金更多>>; 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学生物学更多>>

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应用流式细胞技术快速检测液态商品中的细菌总数被引量：11: 2011年; 建立应用流式细胞技术(flowcytometry,FCM)快速检测液态商品牛奶、果汁中的细菌总数的方法。采用膜过滤、离心技术对果汁样品进行前处理,去除影响FCM检测的基质颗粒,使样品达到FCM可检测状态,检测限达到101CFU/mL数量级。对液态商品牛奶进行重复性和验证实验,检测结果经Q检验法和方差分析,在一定范围浓度下,FCM检测液态商品中的细菌总数与平板法成线性相关。FCM是一种比平板法检测细菌总数更加快速、准确的方法。; 刘道亮赵占民胡连霞张峻峰孙晓霞; 关键词：流式细胞技术细菌总数

流式细胞术在微生物快速检测领域的研究进展被引量：17: 2010年; 概述了流式细胞术的发展历史、工作原理及其在微生物快速检测方面的应用。; 张峻峰刘道亮赵占民孙晓霞胡连霞; 关键词：流式细胞术微生物

单核细胞增生李斯特氏菌实时荧光SPIA方法的建立被引量：2: 2017年; 以单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,L.monocytogenes)hly A基因为靶序列,设计5'端为RNA序列,3'端为DNA序列的嵌合引物和链终止Blocker序列,经过优化,建立实时荧光单引物等温扩增(Real-time fluorescence SPIA)方法,进行特异性、检出限实验,并对不同DNA提取方法进行比较。结果显示,确定荧光染料SPIA法的最佳反应温度为58℃,反应30 min,引物特异性良好,只有4株不同来源的L.monocytogenes DNA产生典型的S型荧光扩增曲线。对L.monocytogenes纯培养DNA的检出限为3.6×10~1fg/μL,相应菌液浓度为1.2×10~1CFU/m L;Realtime fluorescence SPIA检测试剂盒法、水煮法、溶菌酶-蛋白酶K法、饱和酚提取法四种方法提取DNA,均产生典型的扩增曲线,Ct值没有明显差异。对人工添加猪肉火腿样品中的L.monocytogenes,采用水煮法提取DNA的检出限为1.1×10~2CFU/g。结果表明,所建立的L.monocytogenes的Real-time fluorescence SPIA新型等温扩增方法,特异性强、灵敏度高、不受DNA纯度的影响、快速、简便。; 王建昌胡连霞孙晓霞李静; 关键词：荧光单核细胞增生李斯特氏菌 A基因

我国进口种鸡群禽白血病及禽网状内皮组织增生症的血清学检测: 2015年; 为了解河北进口种鸡群禽白血病病毒(ALV)及禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的感染情况,对实验室留存的2011—2013年间来自美国、加拿大和法国的15批进口种鸡的血清样品450份,通过ELISA方法进行ALV-A、B亚群和REV的抗体检测。结果共有8批28份样品为ALV-A、B亚群抗体阳性,群体阳性率和个体阳性率分别为53.3%和6.2%;未检出REV抗体阳性样品。结果表明目前我国进口种鸡群中存在一定比例的禽白血病病毒A、B亚群抗体阳性个体。; 王建昌付琦王金凤李静孙晓霞刘立兵; 关键词：禽白血病间接ELISA 血清学检测

应用流式细胞技术快速定量检测UHT奶产品中的微生物被引量：3: 2011年; 采用基于单个活细胞的新型荧光标记技术，精确区分UHT奶样品中的活菌细胞与死细胞以及其他大颗粒物质，并应用流式细胞技术（flow cytometry，FCM）对UHT奶产品进行微生物快速定量检测。通过与传统的平板计数检测方法进行比对，结果表明，FCM方法的检测范围为10^1～10^7CFU／mL，远远高于平板计数法。2种方法的计数结果相关性分析表明，在一定菌液浓度范围内，FCM方法的定量结果与平板计数法线性相关良好，且对不同类型菌种都能精确标记定量，是更为快速、准确的检测方法。; 孙晓霞赵占民刘道亮张峻峰; 关键词：UHT奶微生物

基于内参系统的阪崎肠杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2: 2016年; 根据阪崎肠杆菌ompA靶基因设计特异性引物和探针,并加入内参(IAC),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法对阪崎肠杆菌基因组DNA的最低检测限为1pg;对细菌的最低检测限为1×10~4 CFU;对含有靶基因质粒的最低检测限为10~3拷贝;Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(R^2=0.999)。人工污染试验结果表明,在初始菌量为10CFU/25g奶粉样品时,采用水洗加试剂盒法和水煮法提取DNA,阪崎肠杆菌均在增菌10h时检出。研究结果为进一步优化和完善阪崎肠杆菌分子生物学方法的标准化提供了参考。; 王金凤王建昌胡连霞孙晓霞陈志敏姜彦芬; 关键词：阪崎肠杆菌 OMPA 实时荧光定量PCR 内参

降解黄曲霉毒素M1菌株筛选方法的建立与菌株鉴定被引量：3: 2017年; 为实现对黄曲霉毒素M1(Aflatoxin M1,AFM1)的生物降解,建立从环境中筛选AFM1降解菌株的方法并得到降解菌株。结果表明:对采自农田、粮库、牛场的300个土壤或粪便样品,初筛选出能在以香豆素为唯一碳源的培养基上生长的菌株37株;用液相色谱法测定降解率进行复筛,得到3株降解率在50%以上的菌株;进而对复筛菌株进行生长条件和耐受性实验,筛选出降解率为78.6%,生长速度快、长势好、稳定期长,且降解过程中热稳定性好的菌株102807。经过菌落细胞形态学、生理生化特征及16S r DNA序列系统发育分析,鉴定为纤维纤维微菌(Cellulosimicrobium cellulans)。首次发现了纤维纤维微菌对AFM1的生物降解功能。; 孙晓霞胡连霞姜彦芬陈志敏付琦; 关键词：黄曲霉毒素M1 生物降解

美国和澳大利亚进境棉花中的霉菌测试及危害分析: 2019年; 为了解进境棉花中有害霉菌的情况,对美国和澳大利亚2017年进境我国的棉花样品进行了菌落检测。结果表明,进境棉花中均含有有害霉菌,只是种类及含量不同,美棉、澳棉中均含有黄曲霉、黑曲霉、阿曲霉、土曲霉以及芽孢杆菌。因而建议从事进境棉花检验或接触者应做好安全防范措施。; 连素梅孙晓霞娄巧哲李轲胡连霞牛增元郭会清; 关键词：美棉危害分析

沙门氏菌重组酶聚合酶检测方法的建立及应用被引量：19: 2019年; 建立一种重组酶聚合酶扩增技术(recombinasepolymeraseamplification,RPA)检测沙门氏菌(Salmonella)的方法。本研究依据沙门氏菌侵袭蛋白A基因(invA)的保守序列设计特异性引物,通过对反应时间的优化,建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反应20 min,即可实现对目的片段的有效扩增;除沙门氏菌外,其他26 种食源性致病菌均无扩增,具有良好的特异性;以沙门氏菌基因组DNA作为模板,该方法的检测灵敏度为1.1×10^(-3) ng/μL,与本研究应用的实时荧光聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,PCR)方法一致;人工污染实验表明,当羊肉、鸡肉和西兰花样品污染量为4 CFU/25 g,增菌8 h,即可通过RPA方法检出沙门氏菌。在人工污染实验中,RPA和PCR检测结果一致。本研究建立的沙门氏菌的RPA检测方法特异性强、操作简单、为食源性致病菌的鉴定提供了一种新的方向。; 刘立兵耿云云姜彦芬刘思颖刘思颖孙晓霞王建昌; 关键词：沙门氏菌

基于内参的副溶血性弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立被引量：3: 2015年; 目的建立基于内参的副溶血性弧菌实时荧光定量PCR方法,快速检测样品中的副溶血性弧菌。方法根据Gen Bank已公布的副溶血性弧菌基因组序列,筛选特异性靶基因,设计特异性引物探针,优化反应体系,并在体系中加入内参（IAC）,通过标记不同荧光基团的Taq Man探针来监测IAC,进而实时监控整个PCR反应。按照5~50 cfu/25 g的细菌量人工污染样品,以评价所建立反应的体系。结果以副溶血性弧菌基因组DNA为模板,最低检测限为1 pg/μl;以10倍梯度稀释的菌液经水煮法提取的DNA为模板,最低检测限为4×102cfu/ml;以含有gyr B的质粒为模板,最低检测极限可以达到100 copies/μl;建立gyr B和gyr B-IAC标准曲线,Ct值与模板拷贝数均呈良好线性关系（r2=0.999）;人工污染初始菌量为7 cfu/25 g时,样品中副溶血性弧菌增菌6 h即可检出。结论本研究所建立的gyr B-IAC实时荧光定量PCR方法,既能有效检测食品中副溶血性弧菌,又能实时监测PCR反应过程,有效防止＂假阴性＂的发生,结果可靠,有利于实现海产品中副溶血性弧菌实时荧光定量PCR检测方法的标准化。; 王建昌王金凤李静孙晓霞陈瑞春; 关键词：副溶血性弧菌 GYRB IAC 食源性致病菌

孙晓霞

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