程国栋
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学食品科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 玉米半胱氨酸蛋白酶突变体W308C的原核表达和酶学性质表征被引量：3
- 2014年
- 通过对玉米半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease from Zea mays,zmCP1)同源模建和底物对接研究发现,W308位点在木瓜蛋白酶家族(C1家族)高度保守,且位于zmCP1催化三联体残基N306位点附近,与绝大多数底物形成π-π键,可参与底物和酶活性中心的结合,是该酶的关键位点;结合Rosetta design程序设计,对W308位点进行突变,获得W308C突变体,并在大肠杆菌BL21中表达。酶学性质表征实验结果表明:突变体W308C的最适温度为55℃,最适pH 6.0;在70、80、90℃下的半衰期为75.33、57.24、40.29 min,分别是野生型的1.21、1.19、1.01倍;突变体W308C和野生型的特异性常数Kcat/Km分别为11.02、5.92 L/(μmol·min),催化活性提高了0.86倍。
- 刘回民程国栋陈方奇郑明珠詹冬玲刘景圣
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶突变体原核表达酶学性质
- 玉米发酵面团品质特性研究
- 玉米是主要粮食作物,其富含营养物质。玉米筋性差,影响主食品质。通过将普通玉米粉改性的手段可以达到增加筋性的作用。本文以主栽玉米品种先玉335,郑单958改性玉米粉为原料,谷朊粉及大豆蛋白为辅料进行玉米发酵面团的研制,对玉...
- 程国栋
- 关键词：玉米发酵面团感官评价
- 文献传递
- 玉米半胱氨酸蛋白酶的原核表达及酶学性质表征被引量：1
- 2015年
- 以玉米基因组DNA为模板扩增获得玉米半胱氨酸蛋白酶基因(zmCP1),先将其克隆至pET-28a(+)原核表达载体中,再转化至大肠杆菌BL21(DE3)中.对重组酶进行诱导表达后经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹(Western blotting)鉴定,经Ni柱纯化后其质量分数大于95%.利用二肽荧光底物(R-AMC)和四肽荧光底物(LAFR-AMC)进行酶反应动力学实验,证明该酶对小底物R-AMC具有更好的亲和力和催化活性.重组酶的酶学性质研究表明,该酶最适温度为55℃,最适pH值为6.0,在90℃下的半衰期为39.82min.
- 刘回民陈方奇郑明珠程国栋詹冬玲刘景圣
- 关键词：玉米半胱氨酸蛋白酶原核表达酶学性质
- 玉米发酵面团工艺优化研究被引量：2
- 2015年
- 通过单因素试验和正交试验确定了玉米发酵面团最佳制作工艺,并采用感官评价和质构特性对玉米发酵面团品质进行分析,得出酵母添加量0.8%、发酵时间为1.5h、醒发时间为40min条件下制得的玉米发酵面团硬度5 967.618、弹性809、黏聚性772、咀嚼性3 728.860、回复性354,品质良好。研究结果可为玉米主食化加工奠定良好的基础,间接推动玉米产业发展。
- 程国栋郑明珠刘回民刘景圣解慧
- 关键词：玉米发酵面团质构特性感官评价
