陈方奇
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 供职机构：吉林农业大学食品科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 羊肚菌固态发酵玉米蛋白粉的研究被引量：9
- 2017年
- 以玉米蛋白粉为主要原料,采用羊肚菌对其进行固态发酵培养,确定羊肚菌固态发酵玉米蛋白粉的培养基配方以及培养条件。结果表明:羊肚菌固态发酵玉米蛋白粉最适培养基配方为玉米蛋白粉30 g、葡萄糖2.5%、Mg SO4·7H2O 0.15%、KH2PO40.25%、含水量65%;最佳培养条件为接种量14%、培养温度25℃、初始p H 6、发酵时间20 d。此条件下,得蛋白转化率为22.36%,菌丝体生物量为0.136 9 g/g。对发酵前后玉米蛋白粉进行氨基酸分析,结果表明:发酵后亲水性氨基酸含量比发酵前提高12.75%。对玉米蛋白粉原料和发酵后玉米蛋白粉进行扫描电镜观察,发酵后的玉米蛋白紧密的结构被打开,表面积增加,表面凹凸加剧,孔洞更为明显。
- 佟维娜蔡丹郑明珠修琳张浩陈方奇刘景圣
- 关键词：玉米蛋白粉羊肚菌固态发酵
- 玉米黄素生物活性及其在食品中应用研究进展被引量：4
- 2016年
- 玉米黄素属于含氧类胡萝卜素,是天然色素类物质,在自然界中主要以全反式异构体存在,饮食中主要来源于黄玉米和蛋黄等。玉米黄素具有极强的抗氧化活性,可用于预防癌症、视网膜黄斑变性白内障、心脑血管疾病、炎性及氧化应激反应,因此受到人们的广泛关注。综述了玉米黄素来源、生物活性最新研究进展以及在食品领域应用现状,并对玉米黄素的开发前景进行了展望。
- 刘美宏刘回民郑明珠陈方奇刘景圣
- 关键词：玉米黄素生物活性食品
- 响应面法分析玉米半胱氨酸蛋白酶活性影响因素被引量：1
- 2016年
- 玉米半胱氨酸蛋白酶(zea mays Cysteine Protease)是一类重要的蛋白水解酶,为了研究玉米半胱氨酸蛋白酶酶学性质,用重组毕赤酵母表达玉米半胱氨酸蛋白酶,以玉米半胱氨酸蛋白酶的相对酶活力为指标,采用响应面法分析p H、温度、Mg Cl2浓度对该酶活性的影响。结果表明,当p H 5.95,温度55.89℃,Mg Cl2浓度6.08 m M,预测的相对酶活力为166.78%,实测值为167.13%。模型合理,有参考价值。
- 陈方奇刘回民郑明珠靳松刘景圣
- 关键词：发酵响应面法酶活
- 植物中C1半胱氨酸蛋白酶的研究进展被引量：4
- 2014年
- C1家族蛋白酶,又称木瓜蛋白酶类半胱氨酸蛋白酶,是一类重要的蛋白水解酶。从不同的植物来源中提取得到了多种该家族的蛋白酶,并对其酶学活性、催化机理、功能开展了大量研究,该酶被广泛应用于食品、医药、化工等行业。
- 刘回民陈方奇刘景圣
- 关键词：分子生物学
- 玉米半胱氨酸蛋白酶的真核表达及酶学性质表征
- 2016年
- 玉米半胱氨酸蛋白酶是一种重要的蛋白水解酶,作为C1家族蛋白酶的一员,可在食品、医药等领域广泛应用。本研究从玉米幼苗中提取总RNA,反转录扩增得到玉米半胱氨酸蛋白酶基因,进而构建重组真核表达载体p PICZα-zm CP1,转化毕赤酵母GS115构建重组菌。对表达的玉米半胱氨酸蛋白酶进行酶学性质研究,结果表明该酶最适反应温度为55℃,最适反应pH值为6.0,具有较好的热稳定性和有机溶剂抗性,但是pH值的稳定性、金属离子耐受性表现一般。底物特异性研究发现,该酶对小分子底物具有较强的水解能力,且偏爱P1位点为精氨酸的底物。
- 刘回民陈方奇郑明珠佟维娜靳松刘景圣
- 关键词：真核表达酶学性质
- 玉米半胱氨酸蛋白酶的原核表达及酶学性质表征被引量：1
- 2015年
- 以玉米基因组DNA为模板扩增获得玉米半胱氨酸蛋白酶基因(zmCP1),先将其克隆至pET-28a(+)原核表达载体中,再转化至大肠杆菌BL21(DE3)中.对重组酶进行诱导表达后经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹(Western blotting)鉴定,经Ni柱纯化后其质量分数大于95%.利用二肽荧光底物(R-AMC)和四肽荧光底物(LAFR-AMC)进行酶反应动力学实验,证明该酶对小底物R-AMC具有更好的亲和力和催化活性.重组酶的酶学性质研究表明,该酶最适温度为55℃,最适pH值为6.0,在90℃下的半衰期为39.82min.
- 刘回民陈方奇郑明珠程国栋詹冬玲刘景圣
- 关键词：玉米半胱氨酸蛋白酶原核表达酶学性质
- 玉米半胱氨酸蛋白酶突变体W308C的原核表达和酶学性质表征被引量：3
- 2014年
- 通过对玉米半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease from Zea mays,zmCP1)同源模建和底物对接研究发现,W308位点在木瓜蛋白酶家族(C1家族)高度保守,且位于zmCP1催化三联体残基N306位点附近,与绝大多数底物形成π-π键,可参与底物和酶活性中心的结合,是该酶的关键位点;结合Rosetta design程序设计,对W308位点进行突变,获得W308C突变体,并在大肠杆菌BL21中表达。酶学性质表征实验结果表明:突变体W308C的最适温度为55℃,最适pH 6.0;在70、80、90℃下的半衰期为75.33、57.24、40.29 min,分别是野生型的1.21、1.19、1.01倍;突变体W308C和野生型的特异性常数Kcat/Km分别为11.02、5.92 L/(μmol·min),催化活性提高了0.86倍。
- 刘回民程国栋陈方奇郑明珠詹冬玲刘景圣
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶突变体原核表达酶学性质
