张荣花
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
- 供职机构：华北理工大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金唐山市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-185对肝癌细胞生长增殖及侵袭迁移的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨miR-185对人肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721生长增殖、侵袭迁移能力的影响。方法构建miR-185过表达载体、合成miR-185反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO),经脂质体转染肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721。利用CCK-8和Transwell小室实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力;生物信息学数据库预测结合基因芯片结果确定miR-185的候选靶基因NR1D1;利用实时荧光定量PCR技术和Western blot检测miR-185对细胞中NR1D1基因表达水平的影响;荧光报告载体实验验证miR-185对靶基因的调控作用。结果 miR-185在人肝癌细胞中的mRNA表达水平显著低于正常肝细胞(P<0.01);过表达miR-185使人肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力降低,下调肝癌细胞中NR1D1基因的mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);荧光报告载体实验证明miR-185可以通过作用于NR1D1 mRNA的3'端非翻译区(untranslated region,UTR)下调其表达水平(P<0.05)。结论 miR-185能抑制肝癌细胞的增殖、侵袭迁移能力,NR1D1是miR-185的直接靶基因。
- 王密斯张荣花王琳孔艺璇冯雪研刘志勇甄永占章广玲
- 关键词：肝癌细胞细胞增殖肿瘤浸润细胞运动
- 赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用及其分子机制被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用,阐明RHL治疗大鼠胆汁淤积性肝纤维化的分子机制。方法:将35只大鼠分为对照组、模型组、35和70mg·kg-1 RHL治疗组及赖氨酸组,每组7只大鼠。通过胆总管结扎(BDL)方法建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型。使用全自动生化分析仪检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性以及总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL)水平;HE染色对肝脏组织行病理学检查;Masson三色染色观察肝组织纤维数量;使用试剂盒通过酶标仪测定肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)水平;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布;Western blotting法检测α-SMA表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平升高(P<0.05);肝组织肝小叶结构被破坏,纤维异常增生,Hyp水平亦升高(P<0.05)。免疫组织化学染色,α-SMA着色于胞膜和胞浆且表达增多;Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠α-SMA表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,35和70mg·kg-1RHL治疗组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平明显降低(P<0.05)。肝脏病理组织学,与模型组比较,35和70mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中纤维成分数量减少,Hyp水平降低(P<0.05);免疫组织化学和Western blotting法,与模型组比较,35和70mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中α-SMA表达减少(P<0.05)。结论:RHL能抑制肝星形细胞激活、肝脏纤维变性和蓄积以发挥对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏的保护作用,RHL有望成为治疗胆汁淤积性肝纤维化的药物。
- 郝晓方张荣花王琳王梅梅甄永占章广玲陈静
- 关键词：胆汁淤积肝纤维化
- 赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化大鼠Smad2、Smad3表达的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠Smad2、Smad3表达的影响。方法采用胆总管结扎(BDL)的手术方法建立大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型,将大鼠随机分为5组:对照组、模型组、赖氨酸组、低剂量RHL组[35mg/(kg·d)]、高剂量RHL组[70mg/(kg·d)]。应用实时荧光定量PCR的方法检测大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3mRNA的相对表达量。Western blot的方法检测Smad2、Smad3蛋白时相对表达量的变化。结果与模型组大鼠比较,经RHL治疗后胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3mRNA相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组大鼠相比,经RHL治疗后胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3蛋白的相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RHL能够抑制肝纤维化的发展,可能是通过抑制Smad2、Smad3mRNA和蛋白的表达,阻断TGF-β1/Smads信号传导通路实现的。
- 王琳郝晓方张荣花王密斯孔艺璇冯雪妍章广玲
- 关键词：胆汁淤积肝纤维化SMAD2SMAD3
- 赖氨大黄酸通过调控miRNA表达水平抑制HBV增殖被引量：3
- 2015年
- 目的研究赖氨大黄酸在体外对乙型肝炎病毒(HBV)增殖及病毒抗原表达的影响及分子机制,为研究赖氨大黄酸抗HBV作用机制奠定初步的实验依据。方法将HepG2.2.15细胞分为实验组(分别加入5、10、20、40、80μmol/L赖氨大黄酸)及不加赖氨大黄酸的对照组,分别培养24、48h收获上清液,采用四唑氮化合物(MTS)法检测细胞的增殖活性,采用ELISA法检测HBsAg和HBeAg的表达水平,实时定量PCR(RT-PCT)检测其中HBV DNA的拷贝数及miR-210、miR-185、miR-199a-3p、miR-370、miR-196a、miR-184、miR-217的表达水平。miR-210、miR-185、miR-199a-3p、miR-370、miR-196a、miR-184、miR-217反义链(ASO)分别转染HepG2.2.15细胞后,MTS法检测细胞的增殖活性,ELISA法检测HBsAg和HBeAg的表达水平。结果在没有对HepG2.2.15细胞的增殖活性产生影响的情况下,赖氨大黄酸抑制了HBsAg的产生和HBV的增殖。20μmol/L的赖氨大黄酸明显促进了miR-210、miR-185、miR-199a-3p的表达,而抑制了miR-370的表达,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论赖氨大黄酸可能通过影响细胞内miRNA的表达抑制HepG2.2.15细胞中HBV的增殖和HBsAg的产生。
- 张荣花王密斯王琳冯雪研郝晓方甄永占李琳陈静章广玲
- 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒表面抗原
