王梅梅
- 作品数：44 被引量：119H指数：6
- 供职机构：华北理工大学基础医学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金唐山市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学环境科学与工程更多>>
- 京唐港沉积物放线菌的分离及其抗菌活性研究
- 2013年
- 自京唐港采集海泥样品,采用湿热60℃、处理10 min的预处理方法,稀释涂布于改良高氏1号培养基上,分离得到147株海洋源的放线菌。经初步形态显微观察判断,其中89株为链霉菌,58株为非链霉菌,非链霉菌中以小单孢菌为主。其中,7株具有显著地抑菌活性。
- 熊亚南杨连秀李巧娜刘爱华王梅梅刘志勇
- 关键词：沉积物放线菌抗菌活性
- 高校青年教师如何协调教学与科研的关系被引量：1
- 2014年
- 教学与科研是大学的两项基本职能,随着社会的发展,高校对青年教师的要求越来越高。文章从青年教师、学校、政府三方面阐述了青年教师如何正确处理和协调教学与科研的关系,从而促进高校的发展。
- 王梅梅熊亚南朱丽华章广玲袁丽杰李淑英
- 关键词：高等教育青年教师
- 筛选调节HBV增殖和HBsAg产生的宿主细胞的miRNA被引量：2
- 2012年
- 目的筛选调节乙型肝炎病毒(HBV)增殖和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)产生的宿主细胞的miRNA。方法用328种miRNA的反义链转染HepG2 2.2.15细胞,72 h收获上清,MTS检测细胞的增殖活性,ELISA检测表面抗原和e抗原的表达水平,实时定量PCR检测其中HBV DNA的拷贝数。构建筛选到的miRNA的过表达载体,转染HepG22.2.15细胞,也分别用MTS、ELISA和实时定量PCR进行检测。结果 miR-199a-3pASO、miR-210ASO和miR-185ASO促进了HBsAg产生和HBV增殖(P<0.05);miR-199a-3p、miR-210、miR-185的过表达,分别抑制了HBsAg的产生和HBV的增殖(P<0.05);miR-199a-3p、miR-210和miR-185的ASO转染组与对照组相比,分别降低了细胞内miR-199a-3p、miR-210和miR-185的表达水平(P<0.05);miR-199a-3p、miR-210和miR-185的过表达载体转染组与对照组相比,分别增加了细胞内miR-199a-3p、miR-210和miR-185的表达水平(P<0.05)。结论在没有对细胞的增殖活性产生影响的情况下,miR-199a-3p、miR-210和miR-185抑制了HBV表面抗原的产生和HBV的增殖,miRNA作为病毒与宿主细胞相互作用中的调节因子,在HBV的生命活动周期中具有重要作用。
- 章广玲王梅梅朱丽华熊亚南李怡璇刘民汤华袁丽杰
- 关键词：MIRNA乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒表面抗原
- 赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用及其分子机制被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠的治疗作用,阐明RHL治疗大鼠胆汁淤积性肝纤维化的分子机制。方法:将35只大鼠分为对照组、模型组、35和70mg·kg-1 RHL治疗组及赖氨酸组,每组7只大鼠。通过胆总管结扎(BDL)方法建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型。使用全自动生化分析仪检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性以及总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL)水平;HE染色对肝脏组织行病理学检查;Masson三色染色观察肝组织纤维数量;使用试剂盒通过酶标仪测定肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)水平;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布;Western blotting法检测α-SMA表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平升高(P<0.05);肝组织肝小叶结构被破坏,纤维异常增生,Hyp水平亦升高(P<0.05)。免疫组织化学染色,α-SMA着色于胞膜和胞浆且表达增多;Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠α-SMA表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,35和70mg·kg-1RHL治疗组大鼠肝脏质量与体质量比值、血清中AST和ALT活性以及TBA和TBIL水平明显降低(P<0.05)。肝脏病理组织学,与模型组比较,35和70mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中纤维成分数量减少,Hyp水平降低(P<0.05);免疫组织化学和Western blotting法,与模型组比较,35和70mg·kg-1 RHL治疗组大鼠肝脏组织中α-SMA表达减少(P<0.05)。结论:RHL能抑制肝星形细胞激活、肝脏纤维变性和蓄积以发挥对胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏的保护作用,RHL有望成为治疗胆汁淤积性肝纤维化的药物。
- 郝晓方张荣花王琳王梅梅甄永占章广玲陈静
- 关键词：胆汁淤积肝纤维化
- miR-663通过靶向TGFB1对肺癌细胞A549增殖的调控被引量：2
- 2012年
- 目的利用双荧光蛋白报告基因分析系统,验证miR-663的直接靶基因TGFB1,探讨miR-663促进肺癌细胞A549增殖的可能机制。方法实时定量RT-PCR检测10对肺癌组织和正常肺组织中miR-663的表达水平;利用细胞计数和集落形成实验来验证细胞转染miR-663 ASO后的A549细胞增殖。选取表达绿色荧光蛋白的质粒pcDNA3/EGFP,将TGFB1 3′UTR的一段特异性序列插入该质粒中,并与miR-663及表达红色荧光蛋白质pDsRed2-N1共同转染肺癌细胞系A549,转染后细胞提取的蛋白样品,荧光分光光度计进行定性和定量检测。结果 miR-663在肺癌组织中的表达高于在正常肺组织中的表达;miR-663表达明显促进了细胞A549的增殖;共转miR-663和pcDNA3/EGFP-TGFB13′UTR质粒后,绿色荧光蛋白的表达量明显低于pcDNA3和pcDNA3/EGFP-TGFB13′UTR共转组。结论 miR-663可能通过靶定靶基因TGFB1,促进了肺癌细胞A549的增殖。
- 章广玲李宏杰熊亚南王梅梅袁丽杰朱丽华刘志勇
- 关键词：肺癌A549转化生长因子B1靶基因
- miR-210靶基因HBVSP2的鉴定
- 2012年
- 目的:构建miR-210的过表达载体,利用双荧光蛋白报告基因分析系统验证miR-210的靶基因HBVSP2。方法:构建含有miR-210前体序列的miR-210的过表达质粒pcDNA3.1(+)/pri-miR-210;选取表达绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pcDNA3/EGFP,将miR-210在HBVSP2上靶位点的一段特异性序列插入该质粒中,构建EGFP报告载体pcDNA3/EGFP-HBVSP2,并与miR-210ASO或者pcDNA3.1(+)/pri-miR-210及表达红色荧光蛋白质(RFP)的pDsRed2-N1共同转染HEK293以及HepG22215细胞,用荧光分光光度计定量检测转染后提取的蛋白样品的荧光值。结果:共同转染pcDNA3/pri-miR-210和pcDNA3/EGFP-HBVSP2质粒后,EGFP/RFP的表达量明显低于pcDNA3和pcDNA3/EGFP-HBVSP2共转染组,差异具有统计学意义(P<0.05)。pcDNA3/pri-miR-210和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组EGFP/RFP低于pcDNA3和pcDNA3/EGFP-HBVSP2共转染组(P<0.05)。共转染miR-210ASO和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组EGFP/RFP的表达量高于共转染LacZ和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组,差异具有统计学意义(P<0.05)。LacZ和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组EGFP/RFP低于LacZ和pcDNA3/EGFP组(P<0.05)。结论:成功构建miR-210的过表达质粒pcDNA3.1(+)/pri-miR-210和含有miR-210靶位点的pcDNA3/EGFP-HBVSP2,HBVSP2可能是miR-210的直接靶基因。
- 章广玲熊亚南朱丽华王梅梅甄永占袁丽杰汤华
- 关键词：质粒MIR-210基因转染
- 城市居民饮用水及水源水藻类污染的研究
- 阚振荣李彦芹昌艳萍赵春海王梅梅闫蕾蕾辛欣苏明李春青
- 该课题研究了保定市市民饮用的自来水及其水源水和石家庄市水源水中藻类存在状况，同时研究了淡水藻类的培养方法、分离纯化方法及其破壁方法，对其中的蓝藻进行分离鉴定，对分离的部分藻种进行了生长特性研究和化感作用的初步探索，发表论...
- 关键词：
- 关键词：水源水饮用水
- 封闭内源性miR-23a对人胃腺癌细胞系MGC803增殖及侵袭的影响被引量：3
- 2013年
- 目的设计并合成miR-23aASO(ASO-23a),封闭内源性miR-23a的功能后,检测人胃腺癌细胞系MGC803增殖及侵袭能力的改变。方法首先设计并合成ASO-23a,经脂质体方法转染MGC803细胞,实时定量PCR检测转染细胞MGC803中miR-23a的表达水平;经MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验、TUNEL实验及transwell实验-观察细胞内源性miR-23a功能被封闭后对MGC803细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。结果实时定量PCR结果表明ASO-23a能够有效封闭细胞中内源性miR-23a;MTT、平板克隆形成及软琼脂克隆形成实验结果显示,封闭内源性miR-23a后可抑制MGC803细胞活性;TUNEL实验结果显示,ASO-23a可以促进MGC803细胞凋亡的发生;Transwell实验结果显示,ASO-23a可以抑制MGC803细胞的侵袭能力。结论设计并合成的.ASO-23a在人胃腺癌细胞系MGC803中有效封闭内源性miR-23a,能够抑制细胞活性及侵袭能力,并能促进细胞凋亡的发生。
- 朱丽华田家莉陈力王梅梅熊亚南章广玲李淑英袁丽杰
- 关键词：ASO增殖
- 赖氨大黄酸和紫杉醇对肺癌细胞增殖的抑制作用和凋亡诱导作用被引量：2
- 2013年
- 目的:研究赖氨大黄酸(RHL)、紫杉醇单独和两者联合对人肺癌H460细胞增殖和凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:选取处于对数生长期肺癌细胞株H460,随机分为对照组(不加药物)、紫杉醇组(1μmol.L-1紫杉醇)、RHL组(100μmol.L-1 RHL)和紫杉醇联合RHL组,并设空白组。采用MTT法和流式细胞术分别检测各组处理后48h的细胞增殖率和凋亡率;采用Western blotting方法检测凋亡相关蛋白和MEK/ERK蛋白的表达水平。结果:细胞培养48h后,联合用药组细胞增殖率显著低于对照组、紫杉醇组和RHL组(P<0.05),联合用药组细胞凋亡率显著高于对照组、紫杉醇组和RHL组(P<0.05),联合用药组caspase-3和poly ADP-ribose polymerase(PARP)的切割片段蛋白表达强度明显高于对照组、紫杉醇组和RHL组,联合用药组Bcl-2和NF-κB蛋白表达强度明显低于对照组、紫杉醇组和RHL组,同时RHL组紫杉醇上调的MEK和ERK蛋白磷酸化强度降低。结论:紫杉醇和RHL均可抑制肺癌H460细胞增殖,诱导细胞凋亡;RHL通过降低ERK活性、上调caspase-3和PARP的切割片段蛋白表达,增强紫杉醇抑制肺癌细胞增殖和凋亡诱导作用。
- 甄永占林雅军章广玲林小虎王梅梅李冉魏静波
- 关键词：紫杉醇肺癌细胞凋亡联合用药
- miR-210过表达载体的构建及Northern鉴定被引量：1
- 2012年
- ①目的构建miR-210的过表达载体,为进一步研究miR-210的功能奠定良好的实验基础。②方法首先设计并合成miR-210前体序列的PCR引物,以HEK293细胞的基因组为模板,PCR扩增包含有miR-210前体的序列,大小为440bp;PCR产物经过EcoRI和BglⅡ酶切后,与线性化的pcDNA3.1(+)载体连接后,转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、酶切鉴定以及基因测序鉴定其分子质量和插入片段的序列;构建的质粒转染HEK293细胞48小时后,提取小RNA,Northern blot检测miR-210的表达水平。③结果纯化质粒的相对分子质量为5.9kb,酶切鉴定结果符合目的条带(440bp)大小,插入的寡核苷酸序列NCBI Genbank提供序列完全相符,Northern Blot检测到的miR-210成熟体大小为21碱基大小。④结论成功构建了miR-210的过表达质粒pcDNA3.1(+)/pri-miR-210,为进一步研究miR-210的功能奠定良好的实验基础。
- 颜宇琦王梅梅熊亚南章广玲
- 关键词：质粒MIR-210基因
