孟赞
- 作品数：15 被引量：11H指数：2
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- 相关领域：医药卫生文化科学生物学哲学宗教更多>>
- 构建糖氧剥夺模型大鼠少突胶质细胞体外培养与分离纯化
- 2016年
- 目的:对原有少突胶质细胞祖细胞培养与分离纯化方法进行改进,以简单、高效获得少突胶质细胞并建立少突胶质细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型。方法:取SD乳鼠脑皮质,采用两种不同的细胞增殖法和两种不同的分离纯化法分四组培养,分别为细胞因子增殖联合摇床震荡分离纯化法组,B104CM增殖联合摇床震荡分离纯化法组,细胞因子增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组,B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组。倒置显微镜下观察神经细胞形态学变化并进行细胞计数。A2B5和髓鞘碱性蛋白鉴定少突胶质细胞并分析其纯度。纯化后的少突胶质细胞祖细胞分化培养3 d后分四组培养,正常组正常培养,低氧组分三组,换无糖DMEM培养基,OGD 1、2、3 h。然后采用MTT比色法检测细胞活力;流式细胞术分析细胞的凋亡率。结果:(1)B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法较其他3种培养方法收获的少突胶质细胞祖细胞数量多(P<0.05)。(2)A2B5和MBP特异性标记,细胞纯度可达到95%。(3)MTT结果显示:OGD 1 h少突胶质细胞的细胞活力即降低(P<0.05),随着缺氧时间延长细胞活力呈降低的趋势更加明显(P<0.05)。(4)流式细胞测细胞凋亡的结果显示:OGD 1 h、2 h、3 h,细胞的凋亡率分别为14.43%±0.20%,21.99%±0.42%和44.71%±0.20%,均高于正常对照组(6.86%±0.05%,P<0.05)。结论:(1)B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化培养法与其他三种方法比较实验操作简单,收获的少突胶质细胞祖细胞数量最多,可用于少突胶质细胞的培养。(2)OGD可致少突胶质细胞损伤,且与OGD持续时间密切相关,实验成功的建立OGD损伤模型。
- 孟赞唐勇彭彦
- 关键词：少突胶质细胞原代培养细胞纯化EDTA
- 氟西汀对阿尔茨海默病模型小鼠的神经元保护作用被引量：3
- 2015年
- 目的:研究氟西汀对老年APP/PS1双重转基因阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响及对神经元的保护作用。方法:实验分为动物实验和细胞实验。动物实验中取APP/PS1双重转基因小鼠随机分为氟西汀组(n=8)和生理盐水组(n=8),另取C57同窝生同月龄正常小鼠10只为对照组。氟西汀组小鼠给予氟西汀(10 mg/kg)腹腔注射,生理盐水组及对照组注射等量生理盐水1次/d,持续8周。Morris水迷宫实验进行行为学检测。Tunel染色检测海马区神经元凋亡。细胞实验中将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)培养48 h后分为正常组、Aβ组、氟西汀组和氟西汀+Aβ组,后3组分别在含10μmol/Lβ-淀粉样蛋白、100 nmol/L氟西汀和100 nmol/L氟西汀+10μmol/Lβ-淀粉样蛋白的DMEM中继续培养48 h。行原位细胞凋亡染色检测各组细胞凋亡。结果:水迷宫定位航行实验中,氟西汀组小鼠较生理盐水组相比平均潜伏期明显缩短(P<0.01);空间探索实验中跨越平台次数增加(P<0.01);海马区凋亡神经元数量减少(P<0.01)。细胞实验中,氟西汀组和氟西汀+Aβ组与Aβ组相比,凋亡细胞数量明显减少(P<0.01)。结论:氟西汀对神经元细胞有保护作用,能减少神经元的凋亡,长期服用氟西汀能显著改善APP/PS1阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆力能力。
- 李刚况超孟赞周良马晶罗艳敏李曌刘品月何洁唐勇刘永刚
- 关键词：阿尔茨海默病氟西汀神经元
- 阿糖胞苷通过抑制HDAC6促进白血病细胞K562凋亡的机制研究被引量：1
- 2018年
- 为了探讨阿糖胞苷（Ara-C）通过组蛋白乙酰化酶6（HDAC6）影响人红白血病K562细胞株凋亡作用及可能的机制。采用CCK-8法检测不同浓度的Ara-C作用24h后检测细胞活力;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率;Hoechest染色观察细胞核染色质的形态;RT-PCR检测HDAC1-6基因的表达变化;Western blotting检测HDAC6、p38和p-p38的蛋白表达。CCK-8检测显示不同浓度的Ara-C能抑制K562细胞的活力,并呈浓度依赖性;FCM检测显示Ara-C能增加细胞的凋亡率;Hoechest染色发现Ara-C组细胞呈凋亡形态学改变;RT-PCR检测显示Ara-C能降低HDAC1、HDAC2和HDAC6的表达;FCM和Hoechest染色发现HDAC抑制能增强Ara-C诱导K562细胞凋亡;Western blotting检测发现Ara-C能降低HDAC6,增加磷酸化p38和激活型Caspase-3表达。可见Ara-C能够通过抑制HDAC6激活p38,诱导K562细胞发生凋亡。
- 罗昊陈玉谭丽孟赞陈晓露
- 关键词：阿糖胞苷白血病凋亡
- TRPC3参与糖氧剥夺致培养的少突胶质细胞凋亡
- 背景： 随着社会人口老龄化，神经退行性疾病的发病率日益增高，而临床上，对于这类疾病尚无有效控制病程进展的措施。瑞士研究者发现神经系统退行性疾病与髓鞘脱失有关，进一步研究证明少突胶质细胞退化导致脱髓鞘，少突胶质细胞对缺血...
- 孟赞
- 关键词：神经退行性疾病髓鞘脱失少突胶质细胞流式细胞仪
- 氟西汀对阿尔茨海默病神经细胞模型保护作用分子机制的研究分析被引量：1
- 2016年
- 本研究初步探讨氟西汀(fluoxetine)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)神经细胞模型小鼠神经纤维瘤细胞,野生型N2A/WT细胞和β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)过表达型N2A/APP695swe细胞的保护作用及可能机制。CCK-8法进行氟西汀对APP695细胞抑制率的测定,以半数抑制率(IC50)的氟西汀浓度作为后续实验的药物浓度。后分为WT组、APP695+氟西汀组、APP695组,三组细胞分别培养48 h后,进行细胞原位凋亡染色。最后以Western测定Aβ和BDNF的表达量。实验结果测得半数抑制率(IC50)的氟西汀浓度10-7mol/L。细胞凋亡染色结果显示APP695组凋亡的细胞明显多于其他两组(p<0.01),与APP695+氟西汀组相比凋亡细胞增加(p<0.05),而WT组与APP695+氟西汀组凋亡细胞无显著性差异(p>0.05)。Western结果显示APP695组Aβ表达多于其他两组(p<0.05)而BDNF表达明显少于其他两组(p<0.01),与APP695+氟西汀组相比Aβ表达增加(p<0.05)但BDNF表达减少(p<0.05),而WT组与氟西汀组相比Aβ和BDNF的表达量均无显著性差异(p>0.05)。本研究结果提示氟西汀可以通过抑制APP695过表达Aβ,从而减少有毒Aβ对BDNF的影响,增加BDNF的表达量,对神经细胞起保护作用,为氟西汀治疗AD提供新的思路。
- 李曌况超李刚叶柳熊伟陈雄斌李晓朋戴颂扬朱殷青张蕾孟赞唐勇刘永刚
- 关键词：阿尔茨海默病氟西汀Β-淀粉样蛋白BDNF
- 就业指导对高职护生求职的影响
- 2018年
- 随着护理专业博士教育,硕士教育,本科教育的发展及其扩招,护理专业毕业生人数增加,使得我们高职高专专业毕业生就业形势也变得严峻起来.本文探讨学校做好就业指导课的重要性和必要性,并结合我校护理专业毕业生的实际情提出如何指导护理专业毕业生求职就业的建议及对策.
- 孟赞祝青
- 关键词：就业指导护生求职
- 星形胶质细胞通过CX47促进少突胶质前体细胞增殖被引量：2
- 2015年
- 目的:研究星形胶质细胞(AST)对少突胶质前体细胞(OPC)生长分化的影响及作用机制。方法:用P3SD乳鼠,建立星形胶质细胞与少突胶质前体细胞原代培养体系。实验分两部分,第一部分为常规OPC培养组、AST分泌因子组、AST与OPC直接接触式培养组;第二部分为AST与OPC直接接触式培养组、缝隙连接干扰对照组、缝隙连接干扰组。免疫荧光鉴定OPC与AST细胞纯度,光镜观察细胞生长状态,流式细胞术检测细胞周期,转录组测序分析不同状态下OPC中缝隙连接蛋白CX47差异表达,PCR和Western blot检测鉴定转录组测序CX47差异表达,EDU检测CX47干扰后OPC增殖能力,流式细胞术测干扰CX47后细胞周期变化。结果:光镜与流式检测发现,与AST接触培养的OPC增殖能力最强、新生细胞数目最多。转录组测序分析和PCR验证显示,AST接触调控OPC增殖的主要差异表达蛋白为CX47,干扰CX47后细胞周期阻滞在G1期,OPC增殖能力明显下降。结论;AST可通过缝隙连接蛋白CX47调控细胞周期,促进OPC增殖。
- 李真刘兆雨徐丹陈婷孟赞唐勇彭彦
- 关键词：少突胶质前体细胞髓鞘再生转录组测序
- 浅论我国老年护理学发展的现状
- 2018年
- 我国已步入老龄化社会,人口老龄化是我们面临的重大社会问题。人口老龄化带来了庞大的老年医护服务和养老服务需求,老年护理专科护士的培养及老年护理的专业技术,都尚不能满足老年护理需求。本文分析和探讨目前我国老年护理学在实践、教育及研究方面的发展现状,思考未来我国老年护理的发展趋势,促进老年护理的发展。
- 孟赞张磊
- 关键词：老年护理学
- TRPC3参与糖氧剥夺致培养的少突胶质细胞凋亡被引量：1
- 2015年
- 目的:研究瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential channel 3,TRPC3)是否参与糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)少突胶质细胞的凋亡。方法:以原代培养的新生SD大鼠少突胶质细胞为对照组,以OGD2h的少突胶质细胞为模型组,将模型组+Pyr3阻断设为处理组。采用蛋白质免疫印迹法检测TRPC3蛋白的表达水平,MTT试剂盒比色法检测各组细胞存活率,Annexin V-FITC试剂盒染色后经流式细胞仪检测细胞凋亡,fluo-3染色后经流式细胞仪和激光共聚焦显微镜测定胞内游离钙的变化。结果:少突胶质细胞A2B5和MBP特异性标记阳性,细胞纯度可达到95%以上;少突胶质细胞OGD2h成功建立OGD模型;OGD组TRPC3蛋白表达增加;OGD组细胞活性为(54.34±6.55)%,凋亡率为(24.24±0.86)%,与对照组有显著差异(P<0.05),Pyr处理组细胞存活率为(72.26±5.41)%,凋亡率为(14.82±0.28)%,与OGD组有显著差异(P<0.05);OGD组胞内游离钙浓度显著升高,而Pyr3阻断以后可以部分抑制其升高。结论:TRPC3表达增加介导胞内游离钙离子水平的升高可能是OGD少突胶质细胞凋亡的重要原因之一。
- 孟赞徐丹李真李静李刚刘永刚刘兆雨吴宏唐勇彭彦
- 关键词：少突胶质细胞OGD凋亡钙离子
- 少突胶质细胞的分离培养方法
- 2018年
- 改进少突胶质细胞体外培养方法。取新生24 h内SD大鼠大脑皮质组织,采用机械性吸管吹打的方法获取细胞悬液,进行种植培养,Galc免疫细胞化学法鉴定少突胶质细胞。经Galc免疫细胞化学染色,少突胶质细胞纯度达95%。采用此种方法培养出的少突胶质细胞纯化度高,且方便简易。
- 孟赞唐栎
- 关键词：少突胶质细胞
